Seebio(R) Reverse Transcriptase逆轉錄酶

來源：作者：人氣：-發(fā)表時間：2021-12-27 09:34:00【大中小】

“逆轉錄”是指，在生物學中以RNA為模板合成DNA的過程，即RNA指導下的DNA合成。此過程中，核酸合成與轉錄（DNA到RNA）過程與遺傳信息的流動方向（RNA到DNA）相反，故稱為逆轉錄。逆轉錄過程是RNA病毒的復制形式之一，在逆轉錄的過程中需要逆轉錄酶的催化。故而逆轉錄酶在RNA逆轉錄的過程中起著不可或缺的作用。

簡要過程如下：

逆轉錄酶的作用是以dNTP為底物，以RNA為模板，tRNA(主要是色氨酸t(yī)RNA)為引物，在tRNA3'-末端上，按5'→3'方向，合成一條與RNA模板互補的cDNA單鏈，它與RNA模板形成RNA-cDNA雜交體。隨后又在反轉錄酶的作用下，水解掉RNA鏈，再以cDNA為模板合成第二條DNA鏈。至此，完成由RNA指導的DNA合成過程。

應用背景：

逆轉錄在分子生物領域已有很廣泛的應用，比如逆轉錄，主要是提取組織或細胞中的總RNA，以RNA為模板，利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA，再以cDNA鏈為模板進行PCR擴增，從而獲得大量拷貝。逆轉錄PCR的出現(xiàn)使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數(shù)量級，使一些極為微量RNA樣品分析成為可能。這在體外診斷領域大大提高了疾病的檢測診斷效率。

臨床應用：

逆轉錄PCR可用于分析基因的轉錄產物、檢測細胞中RNA病毒的含量、合成cDNA探針、直接克隆特定基因的cDNA序列等。如在臨床上RT-PCR可以用于遺傳病診斷、癌癥檢測、檢測病人標本中的RNA病毒，如HAV、HCR、HIV等。

西寶生物致力于開發(fā)高品質的體外診斷原材料，潛心研發(fā)，專注品質，我們開發(fā)出了一種新型逆轉錄酶，Seebio®Reverse Transcriptase”是Seebio®逆轉錄酶家族中一個全新的成員，詳情可咨詢400-021-8148！

截止目前市場上逆轉錄酶數(shù)不勝數(shù)，很多逆轉錄酶能夠在基本性能上滿足科學家在研發(fā)過程中的使用比如（擴增長度、靈敏度、可重復性、產量），但當存在抑制劑、RNA被降解、樣本制備困難的時候、實際使用就會低于預期效果，這時Seebio®Reverse Transcriptase逆轉錄酶就表現(xiàn)出了非同一般的效果。西寶生物系列逆轉錄產品，與市面上其他逆轉錄產品相比，擁有更高的逆轉錄反應溫度，cDNA產量更高，具有更完整的基因代表性。

產品概述

Seebio®逆轉錄酶是一種大腸桿菌重組表達的鼠白血病逆轉錄酶，是一款全新的高效逆轉錄酶，可進行高效率的逆轉錄反應。對于復雜二級結構的RNA，可將逆轉錄溫度提高至50~55℃，避免RNA復雜二級結構對cDNA合成的抑制，可有效合成高質量的cDNA。除此之外，本產品具有優(yōu)越的持續(xù)合成能力和強的雜質耐受度。可提供更高的全長cDNA產量，具有更完整的基因表現(xiàn)性。產品咨詢：400-021-8158！

產品優(yōu)勢

1)逆轉錄效率高、產量優(yōu)異：缺失了RNA酶H活性，具有更強的延伸能力和穩(wěn)定性，具有卓越的逆轉錄效率，可提供較普通逆轉錄酶更高的全長cDNA產量；
2)耐熱性及穩(wěn)定性強：逆轉錄酶耐受高溫的能力是cDNA合成的重要影響因素，Seebio逆轉錄酶在50-55℃下具有更高的熱穩(wěn)定性和更長的半衰期；
3)適用性廣兼容性好：可兼容動物、植物、病毒等多種模板；
4)雜質耐受度強：對于常見雜質（乙醇、異丙醇、水平衡酚、異硫氰酸胍、腐殖酸）均具有強的耐受度。

產品組分

產品	組分	產品編號	訂購規(guī)格
Seebio® Reverse Transcriptase	Seebio® Reverse Transcriptase（200U/μl） Seebio® dNTP Mixture 5× RT Buffer RNase-free ddH2O	DAA0309B	2KU 10KU 4*10KU

保存條件

-30~-15℃儲存。于-20~0℃運輸。

單位定義

以Poly (rA)·Oligo (dT)為模板/引物，在37℃，10 min條件下，摻入1 nmol的dTTP為酸不溶性物質所需要的酶量定義為1個活性單位 (U)。

產品應用

總RNA或者mRNA合成cDNA第一鏈，合成的cDNA第一條鏈后續(xù)可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二條鏈的合成等。

注意事項

防止RNase污染：請保持實驗區(qū)域潔凈；操作時需穿戴干凈的手套、口罩；實驗所用的離心管、槍頭等耗材均需保證RNase-free。

功能檢測

逆轉錄體系中加入200U本酶，以1pg 293細胞總RNA為模板，Oligo(dT)20為引物，42℃反應15min。取1/10 cDNA產物進行PCR擴增GAPDH基因。瓊脂糖凝膠電泳，可見有單一的550bp條帶。

耐熱檢測

溫度對普通逆轉錄具有顯著影響，反應溫度由42℃升至52℃，MMLV-RTs效果明顯變差，C(t) 值由18升至25，但對于Seebio-RTs的影響不顯著， C(t)值未發(fā)生顯著改變。

西寶生物可提供各種分子診斷酶產品，均可定制大包裝，詳情咨詢西寶生物400-021-8158！或者聯(lián)系我司診斷團隊。

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