維生素是維持生物體正常機能的必不可少的一大類有機物質(zhì)，雖然機體對這類物質(zhì)的需求量很小，但卻十分重要。維生素是個龐大的家族，目前所知的維生素就有幾十種，大致可分為脂溶性和水溶性兩大類。維生素常被作為營養(yǎng)強化食品的添加因子，廣泛存在于谷類、果蔬、肉禽和蛋類等加工食品中，因此，維生素的檢測對食品、飼料和醫(yī)藥領(lǐng)域都有很重要的意義。
維生素檢測背景：市場上，食品添加劑像藥品一樣被標(biāo)注上“劑量”。一般的添加食品有嬰兒配方食品、谷類產(chǎn)品和果汁，可以為日常飲食添加更多營養(yǎng)成分。食品中添加的維生素必須進(jìn)行嚴(yán)格控制，維生素在添加進(jìn)食品之前就應(yīng)通過檢測，如果儲存后再使用，則應(yīng)重新檢測。European Directive 2002/46 EC制定了一系列關(guān)于食品添加劑標(biāo)識及檢測添加過維生素的食品中標(biāo)注的維生素含量的法規(guī)。我國國家標(biāo)準(zhǔn)GB5413-2010對嬰幼兒配方食品與乳品中維生素含量也有明確的規(guī)定，標(biāo)準(zhǔn)中涉及的方法有微生物法及高效液相色譜法。
維生素傳統(tǒng)測定方法大多步驟繁瑣，檢測周期長，操作費時，其中一些方法受干擾因素影響大，靈敏度較低，而在實際工作中往往要求測定結(jié)果準(zhǔn)確、測定周期短、經(jīng)濟合算，這就導(dǎo)致對維生素快速分析方法的需求越來越迫切。為此，上海西寶生物科技有限公司將繼續(xù)秉承其研發(fā)宗旨，致力于追求簡便、快速、準(zhǔn)確的維生素分析檢測方法。
維生素檢測方法
國際及國內(nèi)維生素檢測方法主要為微生物法及HPLC法，上海西寶生物提供檢測用標(biāo)準(zhǔn)品，檢測結(jié)果更準(zhǔn)確可靠。
1.傳統(tǒng)經(jīng)典方法——微生物法
微生物法根據(jù)維生素為細(xì)菌生長所必需的原理,以細(xì)菌繁殖程度或代謝產(chǎn)物定量該維生素含量，適用于檢測多種衍生物的總和。國家標(biāo)準(zhǔn)GB5413中檢測維生素B12、煙酸和煙酰胺、葉酸、泛酸、生物素及肌醇測定第一法(仲裁法) 均為等同采用AOAC的方法——微生物法。微生物方法檢測葉酸是國際官方機構(gòu)認(rèn)可的方法。盡管微生物法靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確，但傳統(tǒng)微生物法有許多局限性：整個實驗周期長,批次檢測結(jié)果重復(fù)性差,檢測結(jié)果誤差大。上海西寶生物致力研發(fā)新產(chǎn)品進(jìn)行改進(jìn)。
2.儀器方法——HPLC液相色譜法及LC-MS-MS液質(zhì)聯(lián)用法
HPLC高效液相色譜法是根據(jù)被分離的組分在流動相和固定相中溶解度不同而分離，分離過程是一個分配平衡過程。其樣品前處理簡單，待測物一般不需要衍生化；靈敏度高（檢出限達(dá)ng水平），特異性強，常用的檢測器有熒光檢測器(FD)、紫外吸收檢測器(UV)、電化學(xué)檢測器(ECD)等；分離速度快（10～30分鐘）、效果好，適合多組份及同分異構(gòu)體的分離；可一次性分析多種水溶性維生素。逐漸成為檢測維生素的常用分析方法。
LC-MS-MS液質(zhì)聯(lián)用法基于質(zhì)譜分析，先將物質(zhì)離子化，按離子的質(zhì)荷比分離，然后測量各種離子譜峰的強度，從而實現(xiàn)分析目的。不純的樣品要用色譜和質(zhì)譜聯(lián)用儀，是通過色譜分離，質(zhì)譜充當(dāng)色譜的檢測器。
德國拜發(fā)公司配合HPLC高效液相色譜方法和LC-MS-MS法，按照ISO質(zhì)量體系研發(fā)和推出了針對維生素B12、葉酸及生物素檢測的免疫親和柱，用于樣品中維生素的純化，廣泛適用于多種樣品，且樣品前處理及操作簡單，相比于MBA方法，具有更高的精確性和特異性，更加省時高效。其開發(fā)的新型高效維生素B12親和柱EASI-EXTRACT®Vitamin B12(LGE)已通過美國AOAC審核和比對驗證。研究人員LGE免疫親和柱對提取后的樣品進(jìn)行純化，并通過HPLC液相色譜或LC-MS-MS測定，測定結(jié)果準(zhǔn)確度高：標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1%，重現(xiàn)性為4.3%，檢測限和定量檢測限為0.10和0.30μg/kg。該法適用范圍廣，與傳統(tǒng)的微生物方法相比，具有快速、方便、靈敏度和準(zhǔn)確性高的特點。親和柱法關(guān)鍵是通過除去樣品中的其他非維生素B12物質(zhì)的方法，從而起到濃縮樣品中的維生素B12的目的，使得樣品中維生素B12含量達(dá)到液相色譜法檢測限，提高其檢測靈敏度。
3.其他推廣方法
除了微生物法及HPLC法和LC-MS-MS法外，還有靈敏度和特異性都很高的ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒及酶法檢測試劑盒。酶法試劑盒可用于維生素C的檢測，該方法為MEBAK Commision中檢測果汁等食品中維生素C的標(biāo)準(zhǔn)方法；而德國拜發(fā)生產(chǎn)的ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒能快速、方便、準(zhǔn)確地定量檢測食品中的維生素B12、生物素及葉酸等成分，不需要配備昂貴的儀器設(shè)備，大大節(jié)省了檢測時間和測試成本。
維生素 ( Vitamin)是人和動物為維持正常的生理功能而必需從食物中獲得的一類微量有機物質(zhì),在人體生長、代謝、發(fā)育過程中發(fā)揮著重要的作用。提供各種HPLC級別維生素標(biāo)準(zhǔn)品。