SuperSep Phos-tag 丙烯酰胺預制膠
- 英文名:SuperSep Phos-tag
- 別名:丙烯酰胺預制膠
- 品牌:Wako
*西寶提示:我司所銷售的化學試劑、原料等所有產品(包括但不限于抗生素類、蛋白質類、試劑盒類產品等)僅限用于科學研究用途,不得作用于人體。
■ 根據磷酸化程度分離磷酸化蛋白
■ 分離效果好,條帶清晰
■ 無需磷酸化特異性抗體和放射性同位素標記
[電泳緩沖液]
Tris-甘氨酸-SDS 緩沖液 [電泳樣品] 條帶1: 未處理白蛋白 條帶2: 去磷酸化白蛋白 [電泳條件] 20 mA, 70分鐘 [染色] CBB快速染色 [脫色] 去離子水 白蛋白(Wako# 010-17071)的去磷酸化,采用的是堿性磷酸酶(日本基因公司,貨號319-02661)。條帶遷移證明去磷酸化完成。 |
[電泳緩沖液]
Tris-甘氨酸-SDS 緩沖液 [電泳樣品] 條帶1: β-酪蛋白 (堿性磷酸酶處理, 0 分鐘) 條帶2: β-酪蛋白 (堿性磷酸酶處理, 15 分鐘) 條帶3: β-酪蛋白 (堿性磷酸酶處理, 30 分鐘) 條帶4: β-酪蛋白 (堿性磷酸酶處理, 45 分鐘) 條帶5: β-酪蛋白 (堿性磷酸酶處理, 60 分鐘) [電泳條件] 35 mA, 60分鐘 [染色] CBB快速染色 [脫色] 去離子水 β-酪蛋白按時間序列進行去磷酸化。結果證明磷酸化和去磷酸化β-酪蛋白分離開了。同時驗證去磷酸化程度與時間相關。 |
Product Name | Wako Cat. No. | Pkg. Size |
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SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5%, 17 wells 83 x 100 x 3.9 mm |
198-17981
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5 gels
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SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 wells 83 x 100 x 3.9 mm |
195-17991
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5 gels
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Product Name | Wako Cat. No. | Pkg. Size |
---|---|---|
SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5%, 17 wells 100 x 100 x 6.6 mm |
192-18001
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5 gels
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SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 wells 100 x 100 x 6.6 mm |
199-18011
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5 gels
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Product Name | Well | Wako Cat. No. | Pkg. Size |
---|---|---|---|
SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 6% |
13 wells
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192-17401
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5 gels
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17 wells
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199-17391
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5 gels
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SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5% |
13 wells
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195-17371
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5 gels
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17 wells
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192-17381
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5 gels
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SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10% |
13 wells
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193-16711
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5 gels
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17 wells
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190-16721
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5 gels
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SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5% |
13 wells
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195-16391
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5 gels
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17 wells
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193-16571
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5 gels
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SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15% |
13 wells
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193-16691
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5 gels
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17 wells
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196-16701
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5 gels
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SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5% |
13 wells
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197-16851
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5 gels
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17 wells
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194-16861
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5 gels
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Phos-tag SDS-PAGE對于蛋白樣品中的雜質非常敏感,尤其是螯合劑,釩酸,無機鹽,表面活性劑這類物質。
強烈建議在Phos-tag SDS-PAGE之前通過TCA沉淀或滲析法降低雜質含量。
轉膜前處理:
另一個必須的步驟是在轉膜前,用EDTA去除凝膠中的金屬離子(Mn2+或者Zn2+); 該步驟可提高蛋白的轉膜效率。
- 分別準備10 mmol/L 含EDTA和不含EDTA 兩種1x transfer buffer。
- 將凝膠浸泡在含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,至少20分鐘,溫和搖晃。更換新緩沖液,重復3次。
- 將凝膠浸泡在不含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,10分鐘,溫和搖晃。
- 轉膜操作*。
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