疫苗分離純化技術解決方案
產品編號： 發表日期：2014-08-19 11:24:00
疫苗生產過程中不可避免的有一些雜質，如細菌菌體、細胞碎片、血清、雜蛋白、核酸等。為了得到具有高純度、無菌性和安全性的疫苗，要除去這些雜質。
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疫苗生產過程中不可避免的有一些雜質，如細菌菌體、細胞碎片、血清、雜蛋白、核酸等。為了得到具有高純度、無菌性和安全性的疫苗，要除去這些雜質。
傳統疫苗的分離純化方法
連續離心、沉淀、過濾或萃取等物理、化學方法。我國采用酸沉淀法生產百日咳滅活疫苗，就是由菌體培養液加甲醛殺菌滅活后，用HCl調pH至3.8~4.4，靜置十幾小時自然沉淀出菌體和可溶性抗原，再離心、洗滌而得。
1 鹽析
鹽析一般是指溶液中加入無機鹽類而使某種物質溶解度降低而析出的過程。如：加濃(NH4)2SO4使蛋白質凝聚的過程。鹽析可以通過各種物質的溶解度的不同進行分離，但是溶解度相同或差異不大很難進行分離。
2 酸沉淀
酸沉淀是指溶液的pH改變，使得溶液中某些物質的溶解度降低，從而凝聚沉淀。過酸容易使得蛋白質變性。
3 超速離心
蔗糖、CsCl、KBr密度梯度離心。處理樣品量太少、操作復雜、難以控制。
采用此技術純化嗜血流感細菌(Haemophilus influenzae)外膜脂蛋白P6，先連續離心(9000g)收獲菌體超聲破碎，再高速離心(21000g)沉淀出肽聚糖和含有P6的未破碎細胞，然后超速離心(100000g)除去肽聚糖，加壓透析得到目的抗原組分。
現代分離純化技術
膜過濾、分子篩層析、離子交換層析、親和層析等。
1 膜過濾
膜過濾是一種與膜孔徑大小相關的篩分過程，以膜兩側的壓力差為驅動力，以膜為過濾介質，在一定的壓力下，當原液流過膜表面時，膜表面密布的許多細小的微孔只允許水及小分子物質通過而成為透過液，而原液中體積大于膜表面微孔徑的物質則被截留在膜的進液側，成為濃縮液，因而實現對原液的分離和濃縮的目的。
2 分子篩層析（凝膠過濾層析）
使用有一定大小孔隙的凝膠作層析介質(如葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)，利用凝膠顆粒對分子量和形狀不同的物質進行分離的層析技術。由于各種分子的大小、形狀不同，擴散到凝膠孔隙內的速度不同，因而通過層析柱的快慢不同而分離。
3 離子交換層析
固定相是離子交換劑的層析分離技術。樣品中待分離的溶質離子，與固定相上所結合的離子交換，不同的溶質離子與離子交換劑上離子化的基團的親和力和結合條件不同，洗脫液流過時，樣品中的離子按結合力的弱強先后洗脫。在生物化學和分子生物學領域此法常用于分離蛋白質、核酸等生物大分子。
4 親和層析
利用分子與其配體間特殊的、可逆性的親和結合作用而進行分離的一種層析技術。可以選用生物化學、免疫化學或其他結構上吻合等親和作用而設計的各種層析分離方法。如用寡脫氧胸苷酸-纖維素分離純化信使核糖核酸；用DNA-纖維素分離依賴DNA的DNA聚合酶；用瓊脂糖-抗體制劑分離抗原；用金屬螯合柱分離帶有成串組氨酸標簽的重組蛋白質等。
西寶生物提供該實驗所需的儀器設備：
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Miragen離心機系列
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型號
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主要技術指標
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● 轉速：1000-14,000rpmrpm
● 容量可達：18 x 1.5/2.0 ml ● 離心力可達：16,000 x g ● 時間控制：1 to 30 分鐘或者連續
● “Quick”按鈕進行瞬時啟動
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● 容量：2 PCR 板
● 轉速：2500 rpm ● 離心力：500 g ● 轉子：垂直固定 |
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● 轉速可達：6,000rpmrpm
● 容量可達：八排管轉子：2x0.2ml八排管； 標準轉子：6×1.5/2.0mL ● 離心力可達：2,000 x g ● 關閉蓋子旋轉，開蓋即停止 |
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● 轉速：500-13,300rpm
● 容量可達：24 x 1.5/2.0 ml ● 離心力可達：16,300 x g ● 時間控制：1~30 minutes or continuous
● “Quick”按鈕進行瞬時啟動
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美國Labnet離心機系列
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型號
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優勢
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PCR板迷你離心機
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● 可以置于冷庫中工作
● 快速離下掛壁液滴 ● PCR實驗前后使用，顯著改善實驗 結果
● 適用帶裙邊、不帶裙邊及各種標準PCR微孔板 ● 體積不到大多數微孔板離心機體積的1/4 |
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Spectrafuge 24D 微型高速離心機
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● 全新的空氣循環系統防止轉頭過熱
● 轉子設計合理，有24個孔位
● 強力的無刷馬達驅動轉頭可以迅速加速到設定轉速
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Prism高速臺式離心機
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● 采用無碳刷強力電機和直觀的操作控制面板
● 采用風冷設計
● 速度顯示有rpm和rcf兩種方式
● 使用設計獨特的24x1.5/2.0mL轉子
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Spectrafuge Mini 迷你離心機
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● 非常適用于微管過濾和快速離心
● 適用于1.5mL、0.5mL和0.4mL的離心管及0.2mL八聯管、單個PCR管
● 標配含有轉子和適配器。
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Spectrafuge 6C離心機
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● 本款離心機主要是為血液分離而設計的
● 可在冷庫中使用
● 也適用于化學分析樣品、尿沉淀、染色體組DNA粒化等
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Prism R 微型高速冷凍離心機
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● “速冷”功能在8分鐘內把溫度降到4℃.裝備
● 不平衡檢測系統、自動停止功能
● 加速到速度小于16秒、降回零速小于18秒。
● 兩年免費保修。
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