TMB即四甲基聯(lián)苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強的基團,因此容易進入細胞與細胞器中的HRP反應(yīng),且由于這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產(chǎn)生粗大的、深蘭色沉淀物,這使得TMB成為組化實驗中的一種很好的發(fā)色團。同時反應(yīng)產(chǎn)物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反應(yīng)進行。
TMB的反應(yīng)產(chǎn)物為深藍色,利于光鏡觀察,且反應(yīng)產(chǎn)物越聚越大,常超出單個細胞器的范圍(而DAB則被限制在其內(nèi)),故TMB反應(yīng)的檢測閾較低。
由于上述優(yōu)點,目前TMB常用于光鏡及超微結(jié)構(gòu)水平的HRP及HRP-WGA神經(jīng)投射的研究。