質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶
Lysyl Endopeptidase
Lysyl Endopeptidase
賴氨酰肽鏈內切酶（Lysyl Endopeptidase）初期由Masaki等人從土壤細菌中分離得到。該酶可以特異性剪切除賴氨酸殘基C末端和S-氨乙基半胱氨酸殘基的肽鍵，用于蛋白測序和Lys-X 化合物的酶催化合成。作為Wako官方授權分銷商，西寶生物專業提供Wako多種級別賴氨酰肽鏈內切酶，該酶穩定性高，在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30℃孵育6小時之后，仍然擁有完整的生物活性。訂購熱線：400-021-8158
質譜級賴氨酰肽鏈內切酶是質譜分析前處理時常用的蛋白分解酶。若同時使用賴氨酰肽鏈內切酶和胰酶，可更好地切斷賴氨酸基團的多肽，增加多肽的數量。產品已按照使用習慣做成小包裝，是方便使用的冷凍干燥品。
質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 理化特性
Lysyl Endopeptidase
Lysyl Endopeptidase
表1賴氨酰肽鏈內切酶理化特性表
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外觀
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凍干粉（包含2 mmol/L Tris-HCl buffer，pH 8）
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活性
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0.03~0.07AU/vial
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分子量
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27,000（凝膠過濾）；30,000 (SDS-PAGE)
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溶解性
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易溶于水或緩沖液
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較佳pH
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9.0-9.5（酰胺酶的較佳活性pH）
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等電點
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6.9-7.0
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抑制劑
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DFP、PMSF、TLCK
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來源
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細菌
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穩定性
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溶于pH 值5.0-12.0 的Tris緩沖液中，可于4℃穩定保存2年。溶于pH 值6.0-11.0 的緩沖液中，可于30℃穩定保存，但是50℃及以上不穩定。
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單位定義
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一單位酰胺酶(AU) 指在30℃ pH 9.5 時每分鐘產生1 μmol 對硝基苯胺所需的酶量。
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底物特異性
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水解底物：Tos-Lys-Ome、Bz-Lys-NH2、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA
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非水解底物：Bz-Arg-NH2、Bz-Arg-pNa、Arg-pNA
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質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 產品特點
Lysyl Endopeptidase
Lysyl Endopeptidase
- 高特異性、高蛋白質消化率、適用于蛋白質譜分析
- 提高裂解效率、增加肽段數量
- 根據使用量特意制備小包裝，方便使用
質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 應用實例
Lysyl Endopeptidase
Lysyl Endopeptidase
分別采用胰蛋白酶(Tp)、賴氨酰肽鏈內切酶(Lep) 和Tp 與Lep聯用進行膠內酶切的效果比較：牛血清蛋白BSA 的條帶(100ng) 通過SDS-PAGE 獲得，然后分別用Tp、Lep 和Lep+Tp 進行酶切，再用MALDI-TOFMS 法進行分析。蛋白酶的實驗效果如下表：
表2 Tp、Lep 和 Lep+Tp 的蛋白酶酶切結果對照
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Tp
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Lep
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Lep +Tp
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裂解位點
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精氨酸和賴氨酸的C端
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賴氨酸的C端
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精氨酸和賴氨酸的C端
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錯誤裂解率
(錯誤裂解所占比例) |
多(8%)
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很少(0%)
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少(3%)
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鑒定出的多肽數量
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17
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19
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22
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結果表明 Lep 酶解的錯誤裂解率低，Tp酶解時加入Lep后，錯誤裂解率有所降低，同時，可以鑒定出更多的多肽。
圖1 胰蛋白酶 (Tp)(圖 a) 和賴氨酰肽鏈內切酶 (Lep)+Tp (圖 b) 酶切后的質譜結果對照圖。
Lep+Tp酶切后，可以在m/z=2000時得到吸收峰，而單獨的Tp酶切在m/z=2000時沒有吸收峰。該結果表明Lep可以提高測序覆蓋度。
( 數據由大阪醫療中心和婦嬰健康研究所Y. Wada博士提供 )
質譜級 賴氨酰肽鏈內切酶 產品列表
Lysyl Endopeptidase
Lysyl Endopeptidase
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產品編號
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產品描述
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產品規格
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Lysyl Endopeptidase, MS Grade
賴氨酰肽鏈內切酶，MS級 for Proteome Research |
20μgx5
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Lysyl Endopeptidase (R)
賴氨酰肽鏈內切酶 for Biochemistry |
1vial(2AU)
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Lysyl Endopeptidase (R)
賴氨酰肽鏈內切酶 for Biochemistry |
1vial(10AU)
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