核酸清除劑 DNA Cleaner
核酸清除劑, 本品使用不需要分離管, 即可去除低分子DNA片斷(≤50bp)
DNA Cleaner 本品不需要使用有機溶劑或離心管,35分鐘內即可高效清除50bp 以下DNA 片斷。另外,本品還可用于dsRNA 的純化。適合用于PCR 后的引物、引物對、dNTP、DNA 聚合酶的清除和限制性內切酶處理后的酶消除。
同時,利用乙醇沉淀法將ABI 公司BigDye Cycle Sequencing kit 擴增序列的DNA 樣品純化時,使用本品能得到清晰的序列結果。
特點
· 不需要使用分離管柱,也可純化PCR擴增產物
· 高效濃縮500 ~ 2,500ng 的DNA
· 快35分鐘即可完成PCR后的核酸純化
DNA Cleaner 使用用途
去除底物
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去除底物二聚體
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去除dNTP
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DNA 純化
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測序用
標記反應后純化 |
酶去除
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操作時間
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處理容量
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◎
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◎
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○
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○
100~10,000 bp |
○
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○
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短35分鐘
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與初樣品相同容量
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與柱色譜法相比
DNA Cleaner
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Q公司柱色譜法
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Step 1
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添加與DNA溶液等量的DNA Cleaner。
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向PCR樣品中添加5倍容量的結合液。此時,若混合物的顏色不為黃色,請添加3M醋酸鈉。
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Step 2
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在室溫下靜置10分鐘。
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向離心管中添加Step 1.的樣品。
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Step 3
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在室溫下離心分離10分鐘。
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在室溫下離心分離1分鐘。
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Step 4
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除去上清液。添加70%乙醇。
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除去濾液。添加洗滌液。
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Step 5
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在室溫下離心分離1分鐘。
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在室溫下離心分離1分鐘。
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Step 6
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上清除去。干燥5分鐘。
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除去濾液。
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Step 7
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TE Buffer、滅菌水溶解
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在室溫下離心分離10分鐘。
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Step 8
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FINISH
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添加50μL析出液。靜置1分鐘。
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Step 9
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-
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直接向分離管膜中添加析出液。
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Step 10
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-
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在室溫下離心分離10分鐘。
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Step 11
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-
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FINISH
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所需時間
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約35分鐘
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約10分鐘
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離心分離次數
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2次
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4次
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DNA Cleaner 使用例
1)低分子DNA(50bp 以下)的除去
條帶1.:DNA Step Ladder (25-500bp)
條帶2.:DNA Step Ladder (25-500bp)(DNA Cleaner 處理)
條帶3.:DNA Step Ladder (25-500bp)(T 公司Kit)
條帶4.:DNA Step Ladder (25-500bp)(Q 公司Kit)
條帶2.:DNA Step Ladder (25-500bp)(DNA Cleaner 處理)
條帶3.:DNA Step Ladder (25-500bp)(T 公司Kit)
條帶4.:DNA Step Ladder (25-500bp)(Q 公司Kit)
圖1 利用DNA Cleaner 去除50bp 以下的DNA 片斷
使用本品可去除50bp及25bp的DNA 片斷,可回收75bp 以上的DNA片斷。與Q 公司Kit一樣,可高效去除50bp 以下的DNA片斷。
使用本品可去除50bp及25bp的DNA 片斷,可回收75bp 以上的DNA片斷。與Q 公司Kit一樣,可高效去除50bp 以下的DNA片斷。
2)高分子DNA(200bp 以上)的回收
條帶1.:DNA Ladder
條帶2.:DNA Ladder (DNA Cleaner 處理)
條帶3.:DNA Ladder (T 公司Kit)
條帶4.:DNA Ladder (Q 公司Kit)
條帶2.:DNA Ladder (DNA Cleaner 處理)
條帶3.:DNA Ladder (T 公司Kit)
條帶4.:DNA Ladder (Q 公司Kit)
圖2 利用DNA Cleaner 純化高分子量DNA 片斷
使用本品可高效回收200bp 以上的DNA片斷。
使用本品可高效回收200bp 以上的DNA片斷。
3)少量DNA 的回收率比較
[使用DNA]3kb 質粒
[DNA 量檢測法]檢測OD260/OD280吸光度,估算已回收DNA的量。
[DNA 量檢測法]檢測OD260/OD280吸光度,估算已回收DNA的量。
(圖3)利用DNA Cleaner 進行質粒DNA 添加回收實驗
使用本品進行100 ~ 2,500ng 的DNA 回收實驗,其結果比Q 公司Kit 更高效去除DNA,對500ng 以上的DNA 回収率達90% 以上。.
使用本品進行100 ~ 2,500ng 的DNA 回收實驗,其結果比Q 公司Kit 更高效去除DNA,對500ng 以上的DNA 回収率達90% 以上。.
產品編號
|
品 名
|
包裝
|
045-30741
|
DNA Cleaner
|
5mL
|
044-30711
|
25bp DNA Step Ladder (25-500bp)
|
500μL(100色帶)
|
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