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酵母(S.cerevisiae )直接轉化試劑盒

來源:Seebio.cn作者:西寶生物人氣:-發表時間:2012-02-09 14:51:00【
酵母(S.cerevisiae )直接轉化試劑盒
本品為出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)轉化試劑盒。無需預先進行菌體離心、洗凈操作,可直接向酵母培養液加入目標質粒和專用試劑,是一步即可完成轉化的試劑。值得一提的 是利用96孔板可導入多種檢體,簡單加入4850種重組體也成為可能,因而可進行染色體的篩選。
[特點]
·加入了目標質粒和專用試劑的一步完成型。
·感受態細胞無需調制。
·使用96孔板可進行多檢體處理。
·適應HT的低粘性試劑。
[轉化效率]
向BY4737株導入pRS316時的轉化效率。
 
形質轉化效率 (cfu/μg)
軟管法
≥5,000
96孔感光板法
≥500
[試劑盒內容]   
 
20次用
100次用
500次用
Sc Transformation Reagent
500μl
2.5ml
12.5ml
Carrier DNA(5μg/μl)
50μl
250μl
1.25ml
[操作方法]
■ 軟管法
<酵母的培養>
2ml YPD培養基
↓←菌種接入,調制至OD600:0.01
↓←取1ml至14ml的試管中
↓←在28~30℃振蕩培養,至OD600:3.5~5.0
培養酵母液……(A)
<轉化>
1.5ml的離心管
↓←將25μl質粒和試劑混合液混合
↓←加入25μl培養酵母液(A)在42℃恒溫箱中放置2小時
↓←加入150μl滅菌水
預處理
↓在28~30℃的恒溫箱中放置2~3天
轉化后的酵母
■  96孔板法
96孔板             
↓←加入25μl YPD培養基
菌種接入
↓在28~30℃情況下靜置培養18~24
菌體懸濁
↓←將25μl質粒和試劑混合液混合
在37℃的恒溫箱中放置2小時
5~10μl  spotting
↓在28~30℃的恒溫箱中放置2~3日
轉化的酵母
*質粒·試劑混合液 (25μl /管, 25μl/孔)
·Sc Transformation Reagent…20μl
·質粒DNA………………………1μg
·Carrier DNA……………………2μl
 調制25μl滅菌水
[保存條件]
-20℃保存
[產品資料]
產品編號
品名
規格
容量
296-62701
S.Cerevisiae Direct Transformation Kit, Wako 酵母(S.cerevisiae )直接轉化試劑盒
基因研究用
20次用
292-62703
100次用
290-62704
500次用
 
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