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高靈敏度的脂滴活細胞成像熒光染料 LipiDye(R)

來源：作者：人氣：-發表時間：2023-08-29 14:05:00【大中小】

高靈敏度的脂滴活細胞成像熒光染料

LipiDye^® <Lipid Droplet Green>

LipiDye^® 是一種可以對脂滴進行高靈敏染色的新型熒光素。與以往的脂滴檢測色素Nile Red相比顯示出高S/N比。活細胞和固定細胞均可使用。

※本產品用于研究，不可用于臨床。

※本產品由名古屋大學轉化生命分子研究所（ITbM）的研究成果商品化而來

Yamaguchi E., et al., Angew. Chem. Int. Ed., 54:4539～4543 (2015).

◆脂滴（Lipid droplet）的含義

脂滴（Lipid droplet）是在脂肪細胞（Adipocyte）中發現的巨大的中性脂質的結塊，主要成分是甘油三酯（Triglyceride）和甾醇酯（Sterol Ester）的單分子層結構體。脂滴被認為是儲存細胞內中性脂質的細胞器，并且有較多肥胖和疾病相關的報道。最近，除了脂肪細胞，還在肝細胞、平滑肌細胞、神經膠質細胞等各種細胞中發現了脂滴。這些發現明確了其不僅僅是作為中性脂質的儲存場所，還有抑制代謝和基因表達調節等各種功能。非脂肪細胞的脂滴在1μm以下，與脂肪細胞中的10~100μm的脂滴相比較小。目漸多評論認為，脂滴是每個細胞中都存在的普遍的小型細胞器。實際上，近年來與脂滴研究相關的研究報告數量顯著增加（據Pubmed的調查）。

◆脂類自噬（Lipophagy）：脂滴的自噬

自2009年Nature初次報道自噬是脂滴分解的過程之后*，脂類自噬（Lipophagy）作為自噬抑制的脂質代謝引起人們的關注。脂類自噬的形成以及活性化機制作為基于脂滴分解的脂質代謝的新過程，期待它可以有效地預防脂質異常的疾病。

＊Singh, et al., Nature., 458: 1131-1135．（2009）．


脂滴的模擬圖	脂滴研究的時間推移

◆特點

●　LipiDye^® 是依存溶劑的分子極性發光的熒光素，選擇性地吸收脂滴，使其在中性脂質中發出綠色的熒光。

●　由于其在水溶液中沒有熒光，所以細胞質中的非特異性發光被明顯抑制，與以往的色素相比具有高S/N比。

●　也可用于脂滴的實時成像和固定細胞中的觀察。

●　具有很高的光穩定性，是實時成像的理想選擇。

●　低濃度的使用量（1 μM）就可獲得足夠地靈敏度，工作濃度（1 μM）幾乎不顯示細胞毒性。

◆化合物信息

●　IUPAC name: 1,3-Diphenyl-2-[4-(N,N-diphenylamino)phenyl]benzo[b]phosphole-P-oxide

●　化學式 : C₃₈H₂₈NOP

●　分子量 : 545.58 g/mol

●　溶解度 : 可溶于DMSO

◆波長

Excitation/ Emission: 405 nm / 521～530 nm

※LipiDye^® 用一般的綠色熒光色素使用的濾鏡（FITC和GFP等）無法檢測。請使用合適的濾鏡。

檢測試劑	活細胞	固定細胞	延時拍攝	多重染色	S/N比
LipiDye（本產品）	○	○	○	○	高
Nile Red	○	○	○	×	低
熒光色素B	○	○	×	○	中
脂肪染色試劑T	×	○	×	○	高
Oil Red O	×	○	×	×	低

◆使用案例

與Nile Red比較

脂肪細胞的脂滴用LipiDye^®或者Nile Red染色，檢測箭頭（左圖）指示范圍的熒光強度（右圖）。無論是靈敏度還是S/N比LipiDye^®都比Nile Red高。脂滴中的熒光強度LipiDye^® 較強（distance 0～10 μm），細胞質中的非特異性熒光信號Nile Red較強（distance 10～20 μm）。

脂肪前驅細胞3T3-L1細胞的分化

用LipiDye^®觀察脂肪前驅細胞3T3-L1的分化過程。可以看出，分化過程中脂滴不斷變大。

比較固定細胞

比較培養脂肪細胞用多聚甲醛固定后染色的情況（左圖）和活細胞染色后用多聚甲醛固定的情況（右圖），無論哪一種情況都可以高靈敏度地檢測出脂滴。

※甲醇固定可能會影響到脂滴的構造，不建議使用。請使用多聚甲醛等的交聯型固定試劑。

驗證光穩定性

評價了LipiDye^® 和BODIPY493/503、Fluorescein、Prodan隨著照射時間的光穩定性。LipiDye^® 與其他的熒光素相比顯示出了較高的光穩定性。

驗證細胞毒性

用MTT法評價LipiDye^®的細胞毒性。LipiDye^® 幾乎不影響細胞存活率。

產品編號	生產廠家	產品名稱	包裝
FDV-0010	FNA	LipiDye <Lipid Droplet Green>	0.1mg

◆相關產品

功能類別	品牌	產品編號	產品名稱	包裝	用途
細胞凋亡	Wako	016-16831	Anti PARP, Monoclonal Antibody, Affinity Purified 聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶親和純化抗體	100 μg	細胞凋亡相關抗體
細胞自噬	Wako	030-23703	Carbamazepine 卡馬西平	50 g	Na⁺通道抑制劑，細胞自噬相關化合物
	Wako	047-18863	Dexamethasone 地塞米松	1 g	干細胞分化相關物質，細胞自噬相關化合物
	Wako	079-03811	GF 109203X, 90.0+ % (HPLC) 雙吲哚馬來酰亞胺 I （GF 109203X）	1 mg	蛋白激酶C選擇性抑制劑，細胞自噬相關化合物
	Wako	148-09431	NF 449 Octasodium Salt	10 mg	嘌呤受體拮抗劑，對P2X1具有高選擇性
	Wako	146-08533	Nocodazole 諾考達唑	50 mg	微管抑制劑。它具有抑制有絲分裂的作用。
	Wako	163-18614	Paclitaxel 紫杉醇	100 mg	微管抑制劑。它具有抑制有絲分裂的作用。
	Wako	011-22533	AICAR	1 g	AMPK激活劑，細胞自噬相關化合物
	Wako	058-06841	Epoxomicin	100 μg	蛋白酶抑制劑，細胞自噬相關化合物
	Wako	131-17671	3-Methyladenine 3-甲基腺嘌呤	1 g	細胞自噬抑制劑
	Wako	227-00753	Vinblastine Sulfate 硫酸長春堿	50 mg	細胞自噬抑制劑
	Wako	230-02341	(+)-Wortmannin, 97.0+ % (HPLC) 渥曼青霉素	2 mg	細胞自噬抑制劑
	Wako	092-05581	Itraconazole 伊曲康唑	5 g	細胞自噬誘導劑
	Wako	130-15485	Metformin Hydrochloride 鹽酸二甲雙胍	500 g	細胞自噬誘導劑
	Biomol	BML-PI102-0025	MG-132	25 mg	-
	Wako	188-02534	Rapamycin 雷帕霉素	50 mg	細胞自噬誘導劑
	Wako	205-17283	Thapsigargin 毒胡蘿卜素	5 mg	細胞自噬誘導劑
	Wako	208-08243	Tunicamycin 衣霉素	50 mg	細胞自噬誘導劑
	ENZO	ENZ-KIT175-0050	CYTO-ID^® Autophagy detection kit 2.0 Cyto-ID細胞自噬檢測試劑盒 2.0	50 tests	細胞自噬熒光檢測
LC3 研究	Wako	034-17973	Chloroquine Diphosphate 磷酸氯喹	100 g	自噬抑制劑，LC3研究相關相關化合物
	Wako	164-17181	Plumbagin	1 g	誘導G2/ M細胞周期停滯，LC3研究相關相關化合物
	Wako	246-00921	Xanthohumol	5 mg	VCP抑制劑， LC3研究相關相關化合物
	Wako	013-22831	Anti Human Atg7, Rabbit	50 μL	LC3研究相關抗體

用途	產品編號	產品名稱	規格	包裝
脂滴染色	144-08811	Nile Red	病理研究用	25 mg
	140-08813	Nile Red	病理研究用	100 mg
	141-06822	Nile Blue Hydrogensulfate	病理研究用	25 g
	154-02072	Oil Red O 油紅O	病理研究用	25 g
	192-04392	Sudan Ⅲ 蘇丹Ⅲ	和光特級	25 g
	194-07652	Sudan Ⅳ 蘇丹紅IV	和光一級	25 g
	192-04412	Sudan Black B 蘇丹黑B	和光一級	25 g