氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）-磁微粒化學(xué)法學(xué)發(fā)光（吖啶酯）/熒光免疫層析解決方案

來源：作者：人氣：-發(fā)表時間：2023-06-26 09:25:00【大中小】

1.項(xiàng)目背景

摘自《腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》

腦利鈉肽（BNP）是一種與心房鈉尿肽（ANP）功能類似的神經(jīng)激素類物質(zhì)，具有促尿排鈉并抵制交感神經(jīng)活性的作用，與心房鈉尿肽組織在學(xué)分布及氨基酸組成等方面卻存在著較大差異，故被作為另一種物質(zhì)，命名為BNP。

一系列研究發(fā)現(xiàn)：人體內(nèi)的 BNP 是由 BNP 氨基酸前體蛋白（proBNP）的 C 端裂解得到，而其N端則裂解形成僅有76個氨基酸的NT-proBNP即氨基末端腦利鈉肽前體。

BNP及NT-proBNP的基因差異很大，主要表現(xiàn)在兩者在體內(nèi)的清除途徑、半衰期等存在明顯的差異。

BNP及NT-proBNP在體內(nèi)主要通過肝腎清除。BNP的消除主要通過三種方式：一是與利鈉肽受體C在受體介導(dǎo)下相互結(jié)合后被清除；二是被中性肽鏈內(nèi)切酶切割而清除；三是通過被動排泄被體內(nèi)的腎臟排泄清除。而相對于BNP來說NT-proBNP 在體內(nèi)并無上述前兩種主動清除機(jī)制，僅能被限制在高血流量的器官內(nèi)，通過腎小球?yàn)V過的形式被動清除，因此在體內(nèi)存留時間更長，更易于檢測。

BNP及NT-proBNP 生物活性也不同。BNP 因具有一個特征性的氨基酸環(huán)，具有重要的生物活性，但在體內(nèi)的半衰期較短，僅有18—22分鐘；而 NT-proBNP 為直線形結(jié)構(gòu)，無生物活性，在體內(nèi)半衰期較長，約120分鐘，且存在量不受體位及日常活動等因素的影響，含量穩(wěn)定。

由于BNP和NT-proBNP 主要是由左心室心肌細(xì)胞合成，在體內(nèi)等摩爾數(shù)產(chǎn)生后分泌進(jìn)入血液，兩者都可以作為一種有效的心衰標(biāo)志物，可單獨(dú)地預(yù)示心室壓力增高狀況，對于充血性心力衰竭及其引發(fā)的呼吸困難并發(fā)癥，原發(fā)性高血壓及其評價左心室功能障礙等心血管相關(guān)疾病的輔助診斷及治療評估監(jiān)測具有重要價值。

2.性能表現(xiàn)

2.1 化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺：

2.1.1 組合1：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號：EKY0090L-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：EKY0090M-1mg）標(biāo)記吖啶酯；

a. 線性范圍10pg/ml-35000pg/ml；

b. 試劑37℃熱加速7天穩(wěn)定性：發(fā)光值變化在±13%左右；

c. 企業(yè)工作校準(zhǔn)品（液態(tài)）37℃熱加速7天穩(wěn)定性：發(fā)光值變化在±15%左右。

2.1.2 組合2：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號：EKY0090P-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：EKY0090Q-1mg）標(biāo)記吖啶酯；

a.線性范圍10pg/ml-35000pg/ml；

2.2 組合：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：DKY0090N-1mg）標(biāo)記熒光微球+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號：DKY0090O-1mg）劃膜；

線性范圍：50pg/ml-35000pg/ml。

3. 臨床相關(guān)性

3.1 化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺：

與R品牌NT-proBNP試劑臨床相關(guān)性R²>0.96

低值部分（≤800pg/mL）與R品牌NT-proBNP試劑相關(guān)性R²>0.97。

3.2 熒光免疫層析（鑭系元素Eu螯合物填充）平臺：

高值部分與R品牌 NT-proBNP試劑臨床相關(guān)性R²>0.94；

低值部分（≤2500pg/ml）與R品牌 NT-proBNP試劑相關(guān)性R²>0.94。

4. 測試方案

4.1.1 化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺：

4.1.1組合1

待測抗原:NT-proBNP抗原（貨號：EKY0089E）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul；

試劑1：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號：EKY0090L-1mg）-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；

試劑2：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：EKY0090M-1mg）-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；

4.1.2組合2

待測抗原:NT-proBNP抗原（貨號：EKY0089F）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul；

試劑1：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號：EKY0090P-1mg）-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；

試劑2：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：EKY0090Q-1mg）-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；

反應(yīng)條件：孵育溫度37℃，樣本+試劑1+試劑2（10min）；

測試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S；可使用于各類吖啶酯體系的化學(xué)發(fā)光儀器（如四川邁克、深圳亞輝龍、山東康華生物、基蛋生物、南京諾爾曼等）

4.2 熒光免疫層析（鑭系元素Eu螯合物填充）平臺：

待測抗原:NT-proBNP抗原（貨號：EKY0089E/EKY0089F）,加樣量10ul

反應(yīng)條件：樣本+熒光液混勻，上樣，反應(yīng)時間（10min-15min）；

測試使用熒光儀器:和邁 FIC-S100；可適用于各類熒光體系（激發(fā)波長365nm，發(fā)射波長615nm）的儀器（如廣州藍(lán)勃等）

5.產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱	貨號	推薦配對
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被	EKY0090L-1mg	氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號：EKY0090L-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：EKY0090M-1mg）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對組合1）
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記	EKY0090M-1mg
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被	EKY0090P-1mg	氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號：EKY0090P-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：EKY0090Q-1mg）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對組合2）
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記	EKY0090Q-1mg
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被	DKY0090O-1mg	氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：DKY0090N-1mg）標(biāo)記熒光微球+ 氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號：DKY0090O-1mg）劃膜（熒光層析配對組合）
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記	DKY0090N-1mg
NT-proBNP抗原	EKY0089E	Calibrator or Quality Control
NT-proBNP抗原	EKY0089F	Calibrator or Quality Control
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）包被（貨號：EKY0090L-1mg）-羧基磁珠濃縮液	DKY1309A
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：EKY0090M-1mg）-吖啶酯濃縮液	DKY1309B
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）包被（貨號：EKY0090P-1mg）-羧基磁珠濃縮液	DKY1309D
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：EKY0090Q-1mg）-吖啶酯濃縮液	DKY1309E
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號：DKY0090N-1mg）-羧基熒光微球濃縮液	DKY1309C
羧基磁珠(超順磁)，1um	DEG0091B-1-100mg
羧基磁珠(超順磁)，3um	DEG0091A-3-100mg
時間分辨熒光微球，羧基（200nm）	AEG0786B