異丙基硫代半乳糖苷, IPTG

來源：作者：人氣：-發表時間：2014-07-02 09:44:00【大中小】

異丙基硫代半乳糖苷, IPTG, ISOPROPYL-β-D-THIOGALACTOPYRANOSIDE, DIOXANE FREE

異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用極強的誘導劑，不被細菌代謝而十分穩定，因此被實驗室廣泛應用。

基礎信息

英文名	Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside
別名	IPTG; Isopropyl-beta-D-thiogalactoside
產品名稱	異丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷; 異丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖甙; 異丙基-beta-D-硫代半乳糖苷
分子結構
分子式	C₉H₁₈O₅S
分子量	238.30
CAS 登錄號	367-93-1
EINECS 登錄號	206-703-0

IPTG是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質。基于這個特性，當pUC系列的載體DNA（或其他帶有lacZ 基因載體DNA）以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時，如果在平板培養基中加入X–gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互補性，可以根據是否呈現白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。此外，它還可以作為具有lac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。

異丙基–β- D-半乳糖苷（IPTG）是一種有效的乳糖操縱子誘導試劑，不可逆結合乳糖阻遏物。乳糖操縱子是一種常用的遺傳物質，用于檢測轉錄時的基因內插。IPTG結合阻遏物特定位點，引起構象變化，從而導致其自乳糖操縱子脫離。IPTG與生理誘導劑1,6-allolactose在結構上相似，IPTG克服了β-異乳糖對β-半乳糖苷酶降解的敏感性。由于IPTG不被代謝，使其乳糖作為碳源的生理功能，與乳糖基因表達調控功能相分離。這些特性使得IPTG成為大規模工業生產表達化合物的理想選擇。

IPTG通常連接一個β-半乳糖苷酶底物,例如X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-半乳糖吡喃糖苷CAS：7240-90-6）或bluo-gal (5-溴-3-吲哚基-beta-D-半乳糖吡喃糖苷 CAS：97753-82-7）, 用于測定重組有機體的乳糖表型。

使用方法

首先把IPTG配制成23.83 mg/ml（100 mM）的水溶液，并進行過濾除菌后保存。然后在100 ml的瓊脂培養基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養基。當DNA片段插入至pUC系列載體（或其他帶有lacZ、Amp基因載體），然后轉化至lacZ缺失細胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養基，可根據長出菌體的藍白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。

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