組織型纖溶酶原激活物-纖溶酶原激活物抑制劑復合物（tPAI.C） - 磁微粒化學發光法（AE/AP）解決方案

來源：作者：人氣：-發表時間：2025-07-11 12:48:00【大中小】

1.項目背景

組織型纖溶酶原激活物-纖溶酶原激活抑制物-1復合物 (tissue plasminogen activator-plasminogen activator inhibitor-1 complex，tPAI.C):tPAI.C是血管內皮細胞損傷時，釋放t-PA與PAI-1共同入血形成的復合物。tPAI.C的正常值根據性別有不同，男性血漿正常值<17.0 ng/mL，女性<10.5 ng/mL。理論上tPAI.C是內皮損傷及纖溶系統激活的產物，臨床研究中發現tPAI.C對休克嚴重狀態特別是膿毒癥休克的診斷價值很高。

血液中t-PA?PAI-1抗原量反映了釋放于血液中的t-PA的量，因此針對t-PA增加的病態，就結果而言其t-PA?PAI-1復合物也會增加釋放于血液中的t-PA會將纖溶酶原激活為纖溶酶，因此可將t-PA?PAI-1復合物作為纖溶系統的分子標志物，PIC的增加代表著纖溶系統最終階段的纖溶酶的生成，相對于此，t-PA?PAI-1復合物的增加并不一定意味著纖溶亢進。

血管內皮細胞受損后，t-PA會與PAI-1一同釋放于血液中，因此可認為t-PA?PAI-1復合物的上升也反映了血管受損。動靜脈血栓的存在、炎性細胞因子和內毒素帶來的刺激，會引發大范圍血管病變的代謝性疾病等現象均易引起t-PA?PAI-1復合物上升。有報告指出，在并發有多器官功能衰竭的彌散性血管內凝血中，病程中血中t-PA?PAI-1復合物呈高值的病例絕大多數預后不佳。下圖是tPAI.C的作用機制。

2. 性能表現

針對tPAI.C的檢測，西寶生物推出5種單克隆抗體及1種抗原。具體性能如下（以下評估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗證，建議客戶根據自身工藝進行更為詳細的驗證）

2.1化學發光（AE）平臺

組合1：Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1204A）包被羧基磁珠+Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1205A）標記吖啶酯；

線性范圍：1 ng/mL-100 ng/mL；最低檢出限：1 ng/mL。

組合2：Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1204A）包被羧基磁珠+Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1204B）標記吖啶酯；

線性范圍：1 ng/mL-100 ng/mL；最低檢出限：1 ng/mL。

2.2化學發光（AP）平臺

組合3：Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1204C）包被羧基磁珠+Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1205C）標記堿性磷酸酶；

線性范圍：1 ng/mL-100 ng/mL；最低檢出限：1 ng/mL。

2.3穩定性評估

2.3.1 tPAI.C抗原穩定性

采用磁珠標記物稀釋液（貨號：DCD0532A）將tPAI.C抗原（貨號：EDD0796B）稀釋成5個梯度（液體型），進行37℃熱穩定性實驗。如表1所示，tPAI.C抗原稀釋梯度（液體型）37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發光值平均變化在±10%以內，表明tPAI.C抗原稀釋梯度（液體型）熱穩定性良好。

表1 tPAI.C抗原稀釋梯度（液體型）熱穩定性7天數據

序號	tPAI.C 抗原稀釋濃度濃度ng/mL	tPAI.C 抗原稀釋梯度（液體型）2℃-8℃儲存7天發光值均值	tPAI.C 抗原稀釋梯度（液體型）37℃熱加速7天發光值均值	tPAI.C 抗原稀釋梯度（液體型）37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發光值均值差異
S0	0	17053	17591	3.2%
S1	1	157554	149224	-5.3%
S2	5	640325	625343	-2.3%
S3	12.5	1536860	1473164	-4.1%
S4	50	6238834	5723227	-8.3%
S5	100	11871700	11114161	-6.4%
平均變化（不含S0）				-5.3%

2.3.2 AP體系試劑穩定性

采用磁珠標記物稀釋液（貨號：DCD0532A）將Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1204C）包被羧基磁珠濃縮液稀釋成工作液，進行37℃熱穩定性實驗；采用堿性磷酸酶（ALP）標記物稀釋液（貨號：DCD0533A）將Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1205C）標記堿性磷酸酶濃縮液稀釋成工作液，進行37℃熱穩定性實驗。如表2所示：

a.tPAI.C磁珠工作液單獨37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發光值平均變化為-1.6%，在±10%以內（不含S0），表明tPAI.C磁珠工作液熱穩定性良好；

b.tPAI.C堿性磷酸酶工作液單獨37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發光值平均變化為-9.1%，在±10%左右（不含S0），表明tPAI.C堿性磷酸酶工作液熱穩定性較好。

c.tPAI.C全試劑工作液單獨37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發光值平均變化為-13.6%，在±15%左右（不含S0），表明tPAI.C試劑熱穩定性較好。

表2 tPAI.C試劑熱穩定性7天數據

序號	tPAI.C 抗原稀釋梯度濃度（ng/mL）	磁珠工作液37℃熱加速7天偏差	堿磷酶工作液37℃熱加速7天偏差	全試劑工作液37℃熱加速7天偏差
S0	0	-8.2%	-5.9%	-9.4%
S1	1	-4.4%	-9.7%	-13.1%
S2	5	-2.5%	-10.9%	-13.4%
S3	12.5	-0.5%	-8.5%	-14.1%
S4	50	-0.4%	-9.1%	-14.2%
S5	100	-0.2%	-7.4%	-13.3%
平均變化（不含S0）		-1.6%	-9.1%	-13.6%

3.臨床相關性

3.1化學發光（AE）平臺

西寶tPAI.C抗體配對組合1（＜20 ng/mL）的發光值與希森美康 tPAI.C發光試劑臨床相關性R²>0.92。

西寶tPAI.C抗體配對組合1（＜100 ng/mL）的發光值與希森美康 tPAI.C發光試劑臨床相關性R²在0.95左右。

西寶tPAI.C抗體配對組合2（＜20 ng/mL）的發光值與希森美康 tPAI.C發光試劑臨床相關性R²>0.92。

西寶tPAI.C抗體配對組合2（＜100 ng/mL）的發光值與希森美康 tPAI.C發光試劑臨床相關性R²在0.95左右。

3.2化學發光（AP）平臺

西寶tPAI.C抗體配對組合3的發光值與希森美康 tPAI.C發光試劑臨床相關性R²在0.95左右。

4. 測試方案

4.1化學發光（AE）平臺抗體配對組合1

待測抗原：tPAI.C抗原（貨號：EDD0796B）

樣本/校準品:加樣量10ul；

試劑1：Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1204A）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；

試劑2：Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1205A）標記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；

反應條件：

第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入預激發液及激發液，進行測試。

測試使用發光儀器:科斯邁SMART 500S。

4.2化學發光（AE）平臺抗體配對組合2

樣本/校準品:加樣量50ul；

試劑1：Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1204A）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；

試劑2：Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1204B）標記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；

反應條件：

第一步：50ul樣本 + 50ul試劑1 + 50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入預激發液及激發液，進行測試。

測試使用發光儀器:科斯邁SMART 500S。

4.3化學發光（AP）平臺抗體配對組合3

待測抗原：tPAI.C抗原（貨號：EDD0796B）

樣本/校準品:加樣量5ul；

試劑1：Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1204C）包被-磁珠稀釋物，用量100ul/測試；

試劑2：Anti tPAI.C antibody（貨號：EKY1205C）標記-堿性磷酸酶稀釋物，用量100ul/測試；

反應條件：

第一步：5ul樣品 + 100ul試劑1，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入100ul試劑2，37℃孵育10min，清洗；

第三步：加入底物，進行測試。

測試使用發光儀器:迎凱Shine i2900。

5.產品信息

產品名稱	貨號	推薦配對
纖溶酶原激活物抑制劑-I(PAI)抗體	EKY1205A	組織型纖溶酶原激活物（t-PA）抗體（貨號：EKY1204A）包被羧基磁珠+纖溶酶原激活物抑制劑-I(PAI)抗體（貨號：EKY1205A）標記吖啶酯（發光兩試劑配對組合1）組織型纖溶酶原激活物（t-PA）抗體（貨號：EKY1204A）包被羧基磁珠+纖溶酶原激活物抑制劑-I(PAI)抗體（貨號：EKY1204B）標記吖啶酯（發光兩試劑配對組合2）
組織型纖溶酶原激活物（t-PA）抗體	EKY1204A
纖溶酶原激活物抑制劑-I(PAI)抗體	EKY1204B
抗纖溶酶原激活物抑制劑-1復合物（tPAI.C）抗體	EKY1204C	纖溶酶原激活物抑制劑-1復合物（tPAI.C）抗體（貨號：EKY1204C）包被羧基磁珠+纖溶酶原激活物抑制劑-1復合物（tPAI.C）抗體（貨號：EKY1204D）標記堿性磷酸酶（發光兩試劑配對組合3）
抗纖溶酶原激活物抑制劑-1復合物（tPAI.C）抗體	EKY1205C
組織纖溶酶原激活物-纖溶酶原激活物抑制劑-1復合物（tPAI.C）抗原	EDD0796B
組織型纖溶酶原激活物（t-PA）抗體（貨號：EKY1204A）-羧基磁珠濃縮液	DKY1328A
纖溶酶原激活物抑制劑-I(PAI)抗體（貨號：EKY1205A）-吖啶酯濃縮液	DKY1328B
纖溶酶原激活物抑制劑-I(PAI)抗體（貨號：EKY1204B）-吖啶酯濃縮液	DKY1328C
組織型纖溶酶原激活物抗體（貨號：）-羧基磁珠濃縮液	DKY1328D
組織型纖溶酶原激活物抗體（貨號：）-堿性磷酸酶濃縮液	DKY1328E
羧基磁性微球，1.2μm	DEG0800D
AMPPD 發光底物液（即用型）	DCD0517B
重組堿性磷酸酶（高活性）	DCE0108L
磁珠標記物稀釋液（化學發光）	DCD0532A
堿性磷酸酶（ALP）標記物稀釋液（化學發光）	DCD0533A