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辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)

貨號:ECE0066M
包裝:100mg
    辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP, CAS#9003-99-0),來源于辣根,在臨床檢驗中有廣泛的作用。既可以用作生化反應中的指示劑,也可以用作免疫反應(尤其是ELISA)中標記試劑,是酶標抗體的關鍵原料。辣根過氧化物酶作為多個試劑盒顯色體系的關鍵成分,對試劑盒的質量有重要影響。

    *西寶提示:我司所銷售的化學試劑、原料等所有產品(包括但不限于抗生素類、蛋白質類、試劑盒類產品等)僅限用于科學研究用途,不得作用于人體。

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    辣根過氧化物酶
    辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP, CAS#9003-99-0),來源于辣根,在臨床檢驗中有廣泛的作用。既可以用作生化反應中的指示劑,也可以用作免疫反應(尤其是ELISA)中標記試劑,是酶標抗體的關鍵原料。辣根過氧化物酶作為多個試劑盒顯色體系的關鍵成分,對試劑盒的質量有重要影響。西寶生物提供優質的辣根過氧化物酶(HRP),純度高,穩定性好,咨詢熱線400-021-8158。
    HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結合而成的糖蛋白,糖含量18%,主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。HRP由多個同工酶組成,分子量為40,000,等電點為PH3~9,酶催化的較佳PH因供氫體不同而稍有差異,但多在PH5左右。
    Seebio 辣根過氧化物酶:
    【名稱】辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)
    【貨號】ECE0066M
    【外觀】凍干粉
    【CAS】9003-99-0
    【來源】Armoracia rusticana
    【保存條件】-20℃保存
    【有效期限】2 年
    西寶生物辣根過氧化物酶的質量指標
    項目 指標值
    RZ
    ≥3.0
    活性(U/mg, 固體 )
    290~330U/mg
    外觀
    棕褐色無定形粉末
    RZ值對于辣根過氧化物的意義:
    每一個HRP分子中含一個氯化血紅素IX作輔基,該輔基在403nm波長處有最大吸收峰,而去輔基的酶蛋白在275nm波長處有最大吸收。RZ(Reinheits Zahl)值即為HRP在403nm的OD值(血紅素引起的吸收率)與275nm的OD值(蛋白質引起的吸收率)之比。
    辣根過氧化物酶的用途:
    辣根過氧化物酶是目前使用廣泛的一種標記酶,用來標記抗體或其它蛋白質,既能用于定位檢測,也能用于定量測定。 辣根過氧化物酶(HRP)的從辣根根(Amoracia RUSTICANA)中分離。它是用于生物化學中的應用,如western印跡,ELISA和免疫組化。辣根過氧化物酶是用來放大弱信號,增加被探測的目標分子,如蛋白質。它通常被用于確定葡萄糖和溶液中的過氧化物的量。它也被用于在煙曲霉快速藥敏測定。
    產品類型 主要應用
    RZ>3 活性>250u/mg
    主要應用于免疫學上抗體的標記,是高純度的過氧化酶。采用特殊色譜純化技術以除去會影響免疫學反應的同工酶B ,可作為酶免類體外診斷試劑盒的開發原料。
    RZ>2 活性>180u/mg
    主要應用于臨床生化,例如總膽固醇檢測(TC)、HDL-C、LDL-C、甘油三酯(TG)檢測等,亦可用于實驗初期蛋白質、抗體等標記。
    RZ>1 活性>100u/mg
    主要應用于生化領域血糖試紙和尿液分析試紙。
    辣根過氧化物酶HRP是目前在ELISA中應用廣泛的標記用酶,主要原因一方面是其易于提取,價格相對低廉;另一方面性質穩定,耐熱及有機溶劑的作用,與抗原或抗體偶聯后,活性很少受損失。西寶生物隆重推出用于免疫標記的辣根過氧化物酶HRP(RZ≥3.0,活性≥290U/mg),詳情致電400-021-8158。以下就辣根過氧化物酶HRP標記抗體的過程做下詳細介紹。
    辣根過氧化物酶HRP標記抗體步驟
    1) 透析膜依次浸泡于50%乙醇1h,10mmol/L NaHCO3 1h, 1 mmol/L EDTA 1h,在蒸餾水中洗兩次并放于含0.01% (m/V)疊氮鈉的0.1mol/L磷酸鈉緩沖液,于4℃保存。
    2) ≥1mg/ml抗體溶液(A280=1.44mg IgG/ml)對2L 0.1mol/L pH6.8的磷酸鈉緩沖液透析,于4℃緩慢攪動下過夜。
    3) 10mgHRP溶解于1ml0.1mol/LpH9.2的碳酸鹽緩沖液,取0.25ml加入0.25ml新配制的1.71 mg/ml NaIO4溶液中,蓋緊混勻,于室溫下避光放置2h。
    4) 取1ml透析后的抗體溶液和0.25g SephadexG-25加至0.5mlHRP/NaIO4混合液中。用玻璃棉塞緊巴斯德吸管管尖并用Parafilm封口膜封好。將抗體/葡聚糖凝膠/HRP混合物加人巴斯德吸管,室溫下避光放置3h。
    5 )柱子用0.75ml碳酸鹽緩沖液洗脫偶聯物。加38μl 5mg/mlNaBH4溶液至洗脫物中,室溫下避光孵育30min。再加112μl 5mg/ml NaBH4溶液繼續孵育60min。
    6) 加0.9ml飽和硫酸銨溶液,于4℃下溫和攪拌30min。于4℃,10000g離心15min。
    7) 棄上清。沉淀重溶于0.75 ml TEN緩沖液中,裝人透析袋于4℃對2 L TEN緩沖液透析過夜。更換TEN緩沖液再繼續透析4h。
    8) 從透析袋中取出偶聯物,加BSA至20mg/ml。加等體積甘油,于-20℃保存。
    訂購信息:
    產品編號
    產品名稱
    等級
    包裝
    價格
    ECE0066M
    Peroxidase from horseradish
    辣根過氧化物酶HRP
    290-330U/mg,RZ≥3.0
    100mg
    1g
    850.00
    4500.00
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    產品名稱
    等級
    CAS號
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    辣根過氧化物酶HRP
    RZ>1.5,≥150U/mg
    9003-99-0
    100mg
    1g

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