不一樣的細(xì)胞治療解決方案——新寵 CAR-NK

來(lái)源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2023-09-01 10:52:00【大中小】

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一免疫系統(tǒng)中的“天然屏障”

NK細(xì)胞（Natural Killer Cell,NK）又稱自然殺傷細(xì)胞，是機(jī)體內(nèi)重要的免疫細(xì)胞，形態(tài)上屬于大顆粒淋巴細(xì)胞，來(lái)源于骨髓，是除T細(xì)胞、B細(xì)胞之外的第三大類淋巴細(xì)胞，約占血液中所有免疫細(xì)胞（白細(xì)胞數(shù)量）的15%，屬于天然免疫系統(tǒng)的核心細(xì)胞，主要分布于外周血、肝臟和脾臟。

不同于T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫識(shí)別，NK細(xì)胞不需要T細(xì)胞表面受體去識(shí)別特異的腫瘤抗原，而是可以非特異性的殺死腫瘤細(xì)胞。NK細(xì)胞不僅能殺死惡性疾病的細(xì)胞，還能分泌細(xì)胞因子IFN-γ和TNF-α來(lái)參與固有免疫的調(diào)節(jié)，在腫瘤免疫中扮演重要的角色。

二、冉冉新星——CAR-NK細(xì)胞療法

CAR-NK是通過(guò)基因工程手段修飾使其表達(dá)CAR，將識(shí)別靶細(xì)胞（如病毒感染的細(xì)胞、癌細(xì)胞）表面抗原的抗體（或受體）與激活免疫細(xì)胞所需要的信號(hào)分子連接，可以突破抑制性受體的限制而激活NK細(xì)胞，以此增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的特異性殺傷。

CAR-T和CAR-NK之間有很明顯的區(qū)別：NK細(xì)胞活化不需要抗原遞呈細(xì)胞（APCs）的幫助，而是直接偵測(cè)癌細(xì)胞表面MHC-I分子數(shù)目，或是利用自然細(xì)胞毒性受體（NCRs）與靶細(xì)胞的配體結(jié)合而活化自身，所以效果比T細(xì)胞更為快速直接。

相較于CAR-T，CAR-NK具有很多優(yōu)勢(shì)：

1、CAR-NK具備更多的腫瘤殺傷途徑，如執(zhí)行細(xì)胞脫粒、激活凋亡途徑和介導(dǎo)抗體依賴性細(xì)胞毒性作用(ADCC)；

2、異體CAR-NK不會(huì)引起移植物抗宿主病；

3、CAR-NK因不分泌IL-1、IL-6等炎癥因子，不會(huì)誘發(fā)細(xì)胞因子風(fēng)暴效應(yīng)；

4、CAR-NK在體內(nèi)存活周期短，不易產(chǎn)生長(zhǎng)期的不良反應(yīng)；

5、CAR-NK對(duì)細(xì)菌、真菌以及其他病毒等病原體也有防御作用，有助于防治并發(fā)和繼發(fā)感染；

6、CAR-NK對(duì)適應(yīng)性免疫具有調(diào)節(jié)作用，如通過(guò)高表達(dá)CD16等膜受體和分泌細(xì)胞因子（如IL-15），調(diào)節(jié)B細(xì)胞、NKT和CD8+T的功能。

7、CAR-NK對(duì)實(shí)體瘤治療具有明顯優(yōu)勢(shì)，因?yàn)閷?shí)體瘤對(duì)未修飾的NK細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)出不同程度的耐受性，但對(duì)抗原依賴型CAR-NK較敏感。雖然CAR-NK識(shí)別的某種（些）特異靶點(diǎn)丟失，但因其還表達(dá)其他活化型受體（如NCRs、NKG2C、NKG2D、DNAM-1等），所以仍可殺滅腫瘤。

總之，CAR-NK抗腫瘤活性好，安全性高，可規(guī)模化生產(chǎn)，為通用、即用型產(chǎn)品。

三、CAR-NK細(xì)胞的來(lái)源

目前，CAR-NK細(xì)胞主要來(lái)源包括外周血、臍血、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)和NK92細(xì)胞系。經(jīng)常使用的是捐贈(zèng)者外周血提取的NK細(xì)胞，但不同捐贈(zèng)者外周血擴(kuò)增的NK細(xì)胞可能存在差異。因此，對(duì)純化要求較高。

誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)，是指將終末分化的體細(xì)胞通過(guò)導(dǎo)入特定的轉(zhuǎn)錄因子重編程為多能干細(xì)胞。iPSC的優(yōu)點(diǎn)較多，包括制備需少量供體細(xì)胞，可進(jìn)行無(wú)限培養(yǎng)，成本較低，可實(shí)現(xiàn)自體供給，免疫原性較低。臨床數(shù)據(jù)顯示，在外周血來(lái)源的NK細(xì)胞和iPSCs誘導(dǎo)的NK細(xì)胞上表達(dá)特異性識(shí)別腫瘤抗原的CAR基因后，CAR-NK細(xì)胞表現(xiàn)出比沒(méi)有經(jīng)過(guò)CAR基因修飾的NK細(xì)胞更強(qiáng)的抗腫瘤活性。

四 CAR-NK細(xì)胞治療的臨床應(yīng)用與挑戰(zhàn)

CAR-NK細(xì)胞治療的臨床應(yīng)用

CAR-NK是一個(gè)很有前途的臨床研究領(lǐng)域，對(duì)某些癌癥患者具有良好的安全性和初步療效，但仍面臨一些重要挑戰(zhàn)。一是如何選擇合適的轉(zhuǎn)導(dǎo)CAR方法是CAR-NK療法的關(guān)鍵。雖然逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的轉(zhuǎn)染效率很高，但它可能會(huì)引起插入突變進(jìn)而引發(fā)癌變和其他不良反應(yīng)。盡管慢病毒載體顯示出較低的插入突變發(fā)生率，但其對(duì)外周血NK細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率低至10%。二是如何在體外擴(kuò)增到更多的CAR-NK，這對(duì)NK細(xì)胞的有效激活以及殺傷作用尤為重要。綜上所述，基于NK細(xì)胞優(yōu)秀的抗腫瘤特性，CAR-NK有望為腫瘤治療帶來(lái)新的突破。

Seebio代理品牌WAKO NK細(xì)胞解決方案

NK細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)

WAKO BINKIT?NK 細(xì)胞擴(kuò)增套裝（外周血單核細(xì)胞來(lái)源）

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格
BIJ-N501-1	BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs BINKIT®NK細(xì)胞增殖套裝（外周血單核細(xì)胞來(lái)源）	1kit
BIJ-N501-2	BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs BINKIT®NK細(xì)胞增殖套裝（外周血單核細(xì)胞來(lái)源）	2kits
BIJ-N501-4	BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs BINKIT®NK細(xì)胞增殖套裝（外周血單核細(xì)胞來(lái)源）	4kits
BIJ-N501-8	BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs BINKIT®NK細(xì)胞增殖套裝（外周血單核細(xì)胞來(lái)源）	8kits

NK細(xì)胞激活劑

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格
KRN7000	alpha-Galactosylceramide α-半乳糖神經(jīng)酰胺	1mg
7DW8-5	7DW8-5(Derivative of α-Gal-Cer) 增強(qiáng)型NKT細(xì)胞激活劑	1mg

CD40 的刺激性單克隆抗體

間接激活自然殺傷性細(xì)胞（NK）

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格
AG-20B-0036-C100	anti-CD40(mouse),mAb(FGK45) 抗小鼠CD40單克隆抗體（FGK45）	100μg
AG-20B-0036-C500	anti-CD40?(mouse),mAb(FGK45) 抗小鼠CD40單克隆抗體（FGK45）	500μg

NK細(xì)胞抑制劑

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格
014-09801(986-10001)	Anti asialo GM1 (Rabbit) NK細(xì)胞抑制劑>	1 mL

NK細(xì)胞相關(guān)因子

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格
097-03951 093-03963	Interleukin-2 (IL-2), Human, recombinant 白介素-2（IL-2），人，重組體	50ug 1mg
032-22381	C10(CCL6), Mouse, recombinant C10(CCL6)，小鼠，重組體	10ug
095-07031 091-07033	Interleukin-15, Human, recombinant,Animal-derived-free 白細(xì)胞介素-15，人，重組，無(wú)動(dòng)物源	10ug 1mg
017-24671	α1-Acid Glycoprotein, from Human Plasma α1-酸性糖蛋白，人血漿來(lái)源	10mg
099-06113	Interferon-γ, Human, recombinant,Animal-derived-free IFN-γ，人，重組體，無(wú)動(dòng)物源	1mg
093-05734	Interleukin-4, Human, recombinant, Animal-derived-free 白細(xì)胞介素-4，人，重組，無(wú)動(dòng)物源	1mg
090-04703	Interferon-γ, Mouse, recombinant IFN-γ，小鼠，重組體	1mg
099-05633	Interferon-γ, Human, recombinant IFN-γ，人，重組	1mg

細(xì)胞重編程試劑盒

使用cGMP質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制備的RNA，從皮膚、血液和尿液獲得穩(wěn)定的人iPS細(xì)胞。

干細(xì)胞新型基質(zhì)iMatrix -511

高純度重組人類Laminin511-E8片段，具有和全長(zhǎng)Laminin 511具有一樣的整合素蛋白結(jié)合活性，可取代全長(zhǎng)Laminin用于ES/iPS/MSC 維持&擴(kuò)增培養(yǎng)，同時(shí)支持向神經(jīng)、視網(wǎng)膜、角膜分化。

無(wú)需飼養(yǎng)層
低密度接種、單細(xì)胞傳代
高擴(kuò)增效率
包被法、懸浮法通用

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
00-0076	StemRNA3rd Gen Reprogramming Kit (1 kitStemgent RNA"-NM重編程試劑盒	1kit
385-07361 381-07363	iMatrix-511 solution(0.5mg/mL) 重組層粘連蛋白511-E8片段溶液 (0.5mg/mL)	175μg×2 175μg×6

凍存產(chǎn)品

BAMBANKER 無(wú)血清細(xì)胞凍存液用戶文獻(xiàn)眾多

產(chǎn)品編號(hào)	英文名稱	應(yīng)用	規(guī)格
302-14681	BAMBANKER	常規(guī)工具細(xì)胞，干細(xì)胞，PBMCs,免疫細(xì)胞，類器官等	120mL
306-14684	BAMBANKER	常規(guī)工具細(xì)胞，干細(xì)胞，PBMCs,免疫細(xì)胞，類器官等	20mL×5

PRIME-XV 無(wú)DMSO 凍存液無(wú)動(dòng)物源成分，化學(xué)成分限定，已取得美國(guó)FDA DMF

產(chǎn)品編號(hào)	英文名稱	應(yīng)用	規(guī)格
91140-10ml	PRIME-XVFreezISDMSO free	干細(xì)胞	10mL
91140-100ml	PRIME-XVFreezISDMSO free	干細(xì)胞	100mL

iStock 無(wú)血清細(xì)胞凍存液無(wú)異源，已取得日本《再生醫(yī)療等制品材料適格性確認(rèn)書(shū)》

產(chǎn)品編號(hào)	英文名稱	應(yīng)用	規(guī)格
385-19451	iStockXeno-Free Freezing medium	人免疫細(xì)胞，PBMCs,MSCs,iPS等	120mL

五其它細(xì)胞治療相關(guān)產(chǎn)品

CAR-T細(xì)胞

MSC干細(xì)胞

CiMS 人間充質(zhì)干細(xì)胞用無(wú)血清培養(yǎng)基

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
87-070	CiMS-BM 人間充質(zhì)干細(xì)胞用基礎(chǔ)培養(yǎng)基	500mL
87-071	CiMS-sXF 人間充質(zhì)干細(xì)胞用基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加劑（Xeno-Free）	10mL
87-072	CiMS-sAF人間充質(zhì)干細(xì)胞用基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加劑（Animal-Free）	10mL

干細(xì)胞解離

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
386-02271	DISPASE® I 分散酶®	1g（10,000PU x6Vial培養(yǎng)用）
383-02281	DISPASE® II 分散酶®Ⅱ	1g（10,000PU x6Vial培養(yǎng)用
160-27051	hPSC Dissociation Solution	100ml

干細(xì)胞用小分子化合物

已取得日本DMF

產(chǎn)品編號(hào)	英文名稱	應(yīng)用	規(guī)格
259-00613	Y-27632,MF	強(qiáng)效ROCK抑制劑，用于無(wú)飼養(yǎng)層人iPS/ES細(xì)胞的培養(yǎng)，凍存，復(fù)蘇等。	5mg
257-00614	Y-27632,MF		25 mg
010-26741	A-83-01,MF	ALK4,ALK5,ALK7的選擇性抑制劑，可用于大鼠iPS細(xì)胞等未分化培養(yǎng)。	5mg
018-26742	A-83-01,MF	ALK4,ALK5,ALK7的選擇性抑制劑，可用于大鼠iPS細(xì)胞等未分化培養(yǎng)。	25 mg
068-06663	bFGF Solution,MF	人ES/iPS細(xì)胞維持和培養(yǎng)必須的因子，可誘導(dǎo)向心肌細(xì)胞等的分化。	50μL×4
062-06661	bFGF Solution,MF	人ES/iPS細(xì)胞維持和培養(yǎng)必須的因子，可誘導(dǎo)向心肌細(xì)胞等的分化。	50μL
032-25441	CHIR99021,MF	GSK-3β高選擇性抑制劑，可高效抑制和調(diào)節(jié)ES細(xì)胞的分化。	5mg
038-25443	CHIR99021,MF	GSK-3β高選擇性抑制劑，可高效抑制和調(diào)節(jié)ES細(xì)胞的分化。	25mg

細(xì)胞治療相關(guān)因子

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
093-05631	Interferon-γ, Human, recombinant γ-干擾素，人，重組體（IFN-γ）	100μg
133-13231	MDC, Human, recombinant MDC，人，重組體（MDC/CCL22）	20μg
135-16731	MDC, Mouse, recombinant MDC,小鼠，重組體（MDC/CCL22）	20μg
067-05751	Fractalkine, Human, recombinant 分形趨化因子，人，重組體（Fractalkine/CX3CL1）	20μg
138-13041	MIP-1α, Human, recombinant MIP-1α，人，重組體（MIP-1α/CCL3）	20μg
131-16711	MCP-2, Mouse, recombinant MCP-2，小鼠，重組體（MCP-2/CCL8）	20μg
138-16721	MCP-4, Human, recombinant MCP-4，人，重組體（MCP-4/CCL13）	20μg
098-03964 090-03963	Interleukin-4, Human, recombinant 白細(xì)胞介素-4，人，重組體（IL-4）	20μg 1mg
096-05361	Interleukin-12, Human, recombinant 白細(xì)胞介素-12，人，重組體（IL-12）	10μg
133-13611 139-13613 137-13614	Macrophage Colony-Stimulating Factor, Human, recombinant 巨噬細(xì)胞集落-刺激因子，人，重組體（M-CSF）	10ug 50ug 1mg

總結(jié)：異體的NK細(xì)胞的擴(kuò)增培養(yǎng)和基因修飾會(huì)提高NK細(xì)胞的腫瘤殺傷能力。CAR-NK細(xì)胞治療將會(huì)在未來(lái)的抗腫瘤治療策略中扮演至關(guān)重要的角色。Seebio 生物將助力細(xì)胞治療解決工藝上的挑戰(zhàn)，加速臨床轉(zhuǎn)化并最終服務(wù)于更多的病人。我們將持續(xù)為大家分享新的細(xì)胞治療工藝創(chuàng)新解決方案。敬請(qǐng)期待。

※ 本頁(yè)面產(chǎn)品僅供研究用，研究以外不可使用。

參考資料：1.Critical care management of chimeric antigen receptor T-cell therapy recipients

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