LBIS牛血清白蛋白ELSIA試劑盒 LBIS Bovine Albumin ELISA Kit

來源：作者：人氣：-發(fā)表時間：2024-08-09 10:53:00【大中小】

LBIS牛血清白蛋白ELSIA試劑盒

LBIS Bovine Albumin ELISA Kit

白蛋白存在于細胞和體液中，主要類型為高水溶性的蛋白，同時也存在糖基化的白蛋白。血清白蛋白分子量約為69 kDa，占血漿蛋白56-60%，等電點為4.9，在肝細胞中合成。

血清白蛋白是血清蛋白的主要組成部分，在維持滲透壓中起重要作用，在生理上與脂肪酸、膽紅素和甲狀腺素等難溶于水的物質(zhì)結(jié)合，并協(xié)助其運輸。血清白蛋白濃度的降低，通常是由于肝硬化等引發(fā)的白蛋白生物合成減少、營養(yǎng)不良或熱性病損耗的體蛋白所導(dǎo)致的血液中白蛋白的消耗，以及腎障礙引起的尿液滲出等原因所致。

在健康人的尿液中，血清白蛋白的排泄量每天僅在30 mg以下，但由于患腎臟疾病時滲出至尿液的白蛋白會增多，因此患腎小球腎炎、腎病綜合征、糖尿病性腎病等腎臟疾病時的尿白蛋白水平會升高。另外，發(fā)燒、高血壓、充血性心力衰竭、尿路感染等情況下，尿白蛋白水平也有可能會升高。即使是健康人，在經(jīng)過劇烈運動或肌肉勞動后、熱水沐浴后、精神興奮、壓力和攝入大量蛋白后以及月經(jīng)前，尿白蛋白會短暫性增加，這種現(xiàn)象也被稱為生理性或功能性蛋白尿或運動性蛋白尿。此外，僅在站立時才出現(xiàn)的蛋白尿主要發(fā)現(xiàn)于年輕人中。

人類中有一種罕見的先天性疾病，稱為低白蛋白血癥，也稱為無白蛋白血癥，但正確來說是含有極少量白蛋白，臨床癥狀為輕度水腫和中度低血壓，尚未觀察到肝功能異常或蛋白尿。動物中大鼠有無白蛋白血癥analbuminemia的模型，是由佐佐木研究所的Sumi Nagase老師以SD大鼠建立的，被稱為NAR（Nagase analbuminemia rat)。

血清白蛋白的檢測，使用TIA檢測系統(tǒng)宏觀上效果不錯，F(xiàn)UJIFILM Wako Shibayagi也可以提供大鼠和小鼠的自動檢測儀器用TIA試劑盒，然如果要實現(xiàn)高靈敏度和微量檢測則需用到ELISA。富士膠片和光Shibayagi的LBIS Albumin ELISA Kit除了可定量檢測血液中、尿液中與疾病相關(guān)的白蛋白外，還可應(yīng)用于體外白蛋白生物合成實驗系統(tǒng)、從培養(yǎng)體系中純化得到的生物藥中FBS等的殘留污染檢測，NAR中肝細胞和肝組織移植后白蛋白產(chǎn)生的標記成功與否的研究等等。

◆試劑盒特點

●　可快速檢測（總反應(yīng)時間：2.5 h）

●　檢測范圍：0.78~50 ng/mL

●　所需樣品量：100 μL/well

●　使用環(huán)保的防腐劑

●　所有試劑均為即開即用的溶液

●　高檢測準確性和可重復(fù)性

使用目的

●　檢測培養(yǎng)基來源的牛血清白蛋白（BSA/FBS）

●　細胞和組織加工產(chǎn)品

●　單克隆抗體生產(chǎn)工藝

●　重組蛋白生產(chǎn)工藝

◆試劑盒的組成能

組成內(nèi)容	狀態(tài)	包裝
（A）抗體固定96孔板（干板型）	清洗后使用	96 wells（8×12）/1支
（B）標準白蛋白溶液（500 ng/mL）	稀釋后使用	200 μL/1支
（C）緩沖液	直接使用	60 mL/1支
（D）過氧化物酶結(jié)合抗白蛋白抗體	稀釋后使用	200 μL/1支
（F）顯色液（TMB）	直接使用	12 mL/1支
（H) 反應(yīng)停止液（1M H2SO4） ※ 使用注意	直接使用	12 mL/1支
（I）濃縮清洗液（10×）	稀釋后使用	100 mL/1支
封板膜	——	3張
使用說明書	——	1份

◆交叉反應(yīng)性

物種	交叉反應(yīng)率（%）
牛	100%
小鼠	小于0.05%
大鼠	小于0.05%
人	小于0.05%

※ 交叉反應(yīng)率為1000 ng/mL濃度下檢測的數(shù)據(jù)。

◆樣品信息

檢測樣品中牛白蛋白殘留污染

※ 檢測時，制備合適倍率的緩沖液，用作檢測用的稀釋樣品。

※ 請注意本試劑盒對于檢測牛血清·血漿樣品十分敏感。需稀釋約一百萬倍。

◆檢測范圍

0.78～50 ng/mL（標準曲線范圍）

◆Validation data

準確度測試（實驗組內(nèi)差異）

樣品	A	B	C	D
1	46	23.9	11.7	1.72
2	45.3	23.5	11.8	1.84
3	43.9	24.2	11.5	1.7
4	44.8	22.5	11.4	1.76
5	48	24.7	12.3	1.75
mean	45.6	23.8	11.7	1.75
SD	1.561	0.825	0.353	0.053
CV（%）	3.4	3.5	3	3

單位：ng/mL

可重復(fù)性測試（實驗組間差異）

檢測日/樣品	E	F	G
第0日	1.48	5.7	24.3
第1日	1.55	6.2	25.6
第2日	1.5	6.35	25
第3日	1.56	6.25	25
mean	1.52	6.12	25
SD	0.042	0.288	0.545
CV（%）	2.8	4.7	2.2

單位：ng/mL n=3

加標回收測試

樣品 H

添加量	實測值	回收量	回收率
0	3.06	-	-
1.5	4.58	1.52	101
3	5.8	2.74	91.3
3.75	6.79	3.73	99.5

單位：ng/mL n=3

樣品 H

添加量	實測值	回收量	回收率
0	10.6	-	-
3.95	14.7	4.1	104
11.9	22.3	11.7	98.3
19.8	29.4	18.8	94.9

單位：ng/mL n=3

◆稀釋直線性測試

使用連續(xù)性稀釋緩沖液分4個階段梯度稀釋2個血清樣品，并進行檢測，結(jié)果顯示直線回歸的R2從0.9996變?yōu)榱?.9997。

◆操作方法

抗體包被96孔板（干板型）

↓ 清洗4次

樣品或標準溶液 100 μL

↓ 攪拌，室溫(20～25 ℃)，靜置反應(yīng)1 h

↓ 清洗4次

過氧化物酶結(jié)合抗白蛋白抗體 100 μL

↓ 攪拌，室溫(20～25 ℃)，靜置反應(yīng)1 h

↓ 清洗4次

顯色液（TMB） 100 μL

↓ 攪拌，室溫(20～25 ℃)，靜置反應(yīng)30 min

反應(yīng)終止液（1M H2SO4）

↓ 攪拌

吸光度檢測（主波長450 nm、副波長620 nm：600～650 nm）

◆FBS/FCS，液體培養(yǎng)基檢測示例

樣品	白蛋白檢測值(mg/mL)
FBS-1	17.3
FBS-2	17.3
FCS-1	10.5
FCS-2	12.5
RPMI-1(10 %FBS)	1.39
RPMI-2(10 %FBS)	1.73

◆牛血清白蛋白（BSA）檢測用試劑

牛血清白蛋白（BSA：Bovine Serum Albumin）

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	標準曲線范圍	樣品量（稀釋樣品）
635-07099	LBIS Bovine Albumin ELISA kit LBIS牛白蛋白 ELISA試劑盒	0.78～50 ng/mL	100 μL