測序級重組賴氨酰內肽酶/胰蛋白酶預混裝

來源：作者：人氣：-發表時間：2025-06-16 10:02:00【大中小】

測序級重組賴氨酰內肽酶/胰蛋白酶預混裝

◆概述

本品選用A. Lyticus 來源氨基酸序列，利用獨特大腸桿菌重組表達技術制備的Lys-C，能夠特異性識別并酶切肽鏈中Lys羧基端肽鍵；其與重組表達并經甲基化修飾的測序級胰蛋白酶，經研究和方法驗證，按照特定比例混合后，能夠在一次酶切或分步酶切中，保證特異性的前提下，酶切效率更高，便于進行序列分析。

◆優勢

1）采用甲基化修飾重組表達胰蛋白酶，其賴氨酸殘基經甲基化修飾有效防止酶切緩沖中胰酶自切或被Lys-C降解造成胰酶活性的降低。

2）獨有的Lys-C重組表達制備技術，保證高純度與高酶活性的同時，無任何雜酶活性，確保酶切反應的特異性。

◆純度·來源

選用A. Lyticus 來源氨基酸序列，利用獨特大腸桿菌重組表達技術制備的Lys-C

選用豬的胰腺來源陽離子型胰蛋白酶基因，利用畢赤酵母菌株重組表達技術制備的胰蛋白酶

◆使用方法

溶解緩沖：用無菌水或者50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5；溶解后分裝，-15℃以下保存。

酶切緩沖：50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5

推薦條件：蛋白酶:融合蛋白質量比1:25~1:100（蛋白組學或肽圖）37℃反應。

針對疏水性強、溶解性較差的蛋白，可添加變性劑或者封閉二硫鍵（烷基化）使其空間結構被打開，從而提高酶切效率或者提高肽圖覆蓋率。

可以參考以下方法：

兩步溶出法消化：可以添加終濃度為5 mmol/L的DTT 在室溫反應30 min ；再加入終濃度為10 mmol/L 的碘乙酰胺，在室溫避光反應30 min。蛋白溶液中補入終濃度6~8 mol/L 尿素，胰蛋白酶/Lys-C 與蛋白質或蛋白質混合物以1：25 的蛋白質∶蛋白酶比(w/w)混合并在37℃下孵育3~4 h，用酶切緩沖稀釋尿酸降至1 mol/L 以下，在37℃反應過夜。

終止反應：加入終濃度0.5-1%三氟乙酸，14000-16000×g，離心10 min 去除沉淀顆粒。

◆保存條件

儲存穩定性：凍干粉存于-15℃以下，24 個月穩定；50 mmol/L Tris-HCl pH 8.0~8.5 溶解后儲存于-15℃以下，反復凍融5次，無活性損失。

運輸穩定性：冰袋保溫運輸，活性穩定。

◆應用實例

Lys-C/Trypsin Mix 與Trypsin 特異性酶切抗體對比圖

蛋白酶：單抗質量比1:25，37℃酶切反應過夜。

(更多范疇應用實例，請與我們聯系)

◆產品列表

產品編號	產品名稱	規格
RME0101	RLys-C/MTP Mix 重組賴氨酰肽鏈內肽酶/重組胰蛋白酶混合裝	20 μg/支
RME0102	RLys-C/MTP Mix 重組賴氨酰肽鏈內肽酶/重組胰蛋白酶混合裝	20 μg/支，5 支