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泛素化試劑盒 Ubiquitinylation kit

來(lái)源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2025-05-16 10:14:00【大中小】

Ubiquitinylation kit

泛素化試劑盒

◆用于合成泛素-E2硫酯的多功能工具

●　能合成一系列由硫酯連接的泛素綴合酶E2的理想方法

●　生物素化的泛素能對(duì)連接了鏈霉親和素的酶進(jìn)行靈敏檢測(cè)

●　試劑盒供50次50 μL的反應(yīng)使用

泛素化試劑盒是一套在泛素化實(shí)驗(yàn)中用于合成泛素-E2硫酯的試劑。該試劑盒利用泛素級(jí)聯(lián)反應(yīng)中前兩個(gè)步驟來(lái)產(chǎn)生一系列由硫酯連接的泛素綴合酶（E2s）；用于將泛素轉(zhuǎn)移至E3泛素連接酶；然后對(duì)靶蛋白進(jìn)行泛素化。生物素化的泛素能有助硫酯的形成，并能對(duì)泛素綴合物進(jìn)行高靈敏度檢測(cè)。

建議用法

1.　合成用于泛素化實(shí)驗(yàn)的泛素-E2硫酯；

2.　在專用的E3泛素連接酶的參與下對(duì)靶蛋白進(jìn)行泛素化；

3.　對(duì)用于與新型E2酶通過(guò)硫酯連接的泛素進(jìn)行活化；

4.　使用細(xì)胞裂解液或粗提物/制備劑為來(lái)源的E3泛素連接酶來(lái)促進(jìn)泛素化；

5.　不依賴底物（目標(biāo)蛋白）的體外泛素化反應(yīng)。

圖1.

酯測(cè)試Western Blotting能夠適用于所有E2綴合酶。操作步驟按照“Assay Protocol”部分所述的進(jìn)行。

生物素化-泛素-酶共聚物通過(guò)蛋白質(zhì)印跡法的硫酯測(cè)試來(lái)檢測(cè)，其中分別包括：

A：UbcH1（Prod. No. BML-UW9020）

B：UbcH2（Prod. No. BML-UW9025）

C：UbcH3（Prod. No. BML-UW8730）

D：UbcH5a（Prod. No. BML-UW9050）

E：UbcH5b（Prod. No. BML-UW9060）

F：UbcH5c（Prod. No. BML-UW9070）

G：UbcH6（Prod. No. BML-UW8710）

H：UbcH7（Prod. No. BML-UW9080）

I：UbcH8（Prod. No. BML-UW9135）

J：UbcH10（Prod. No. BML-UW0960）

K：Ubc13/MMS2（Prod. No. BML-UW9565）

而使用“Analysis by Western Blotting”部分所述的鏈霉親和素-辣根過(guò)氧化物酶檢測(cè)系統(tǒng)的有M：生物素化SDS分子量標(biāo)記（Sigma, SDS-6B）從下到上：20.1, 29.0, 39.8, 58.1 kDa。

◆產(chǎn)品規(guī)格

應(yīng)用注釋	用法： 1. 在專用的E3泛素連接酶參與下對(duì)靶蛋白進(jìn)行泛素化。E2的家族能夠產(chǎn)生E2-Ub硫酯綴合物以用于測(cè)試，以及與特定E3/靶蛋白的結(jié)合。例如：p53在mdm2（E3）和UbcH5b（E2）10的參與下進(jìn)行泛素化。 2. 活化用于將硫酯與新型E2酶綴合的泛素。（在直接可比的條件下，可使用試劑盒中的E2s作為替代） 3. 使用細(xì)胞裂解液或粗提物/制備液作為E3泛素連接酶的來(lái)源，在泛素化試劑盒組分的參與下，促進(jìn)已純化的靶蛋白的泛素化。 4. 不依賴底物（目標(biāo)蛋白）的體外泛素化反應(yīng)。確定E3酶的泛素連接活性/特異性以及它們的催化結(jié)構(gòu)域/片段11。注：應(yīng)用1和2提供的方案可以通過(guò)包含、省略或替代特定的酶組分來(lái)修改，從而應(yīng)用于其他實(shí)驗(yàn)。
質(zhì)量	試劑盒包含了足夠進(jìn)行4次含有E2酶反應(yīng)的材料。
使用/穩(wěn)定性	試劑盒的所有組分應(yīng)在-80°C下儲(chǔ)存以確保穩(wěn)定性和活性。
儲(chǔ)存	避免反復(fù)凍融
運(yùn)輸	干冰運(yùn)輸
長(zhǎng)期儲(chǔ)存	-80℃
組分	20×泛素活化酶溶液人，重組 E1（His6-tagged），125 µL，產(chǎn)品編號(hào)BML-UW9410 10×泛素綴合酶溶液（E2）每種E2酶有20 µL UbcH1（His6-tagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW9020 UbcH2（His6-tagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW9025 UbcH3（His6-tagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW8730 UbcH5a（His6-tagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW9050 UbcH5b（His6-tagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW9060 UbcH5c（His6-tagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW9070 UbcH6（His6-tagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW8710 UbcH7（His6-tagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW9080 UbcH8（His6-tagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW9135 UbcH10（untagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW0960 UbcH13/Mms2（His6-tagged），產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW9565 20×生物素化泛素溶液（Bt-Ub）, 125 µL，產(chǎn)品編號(hào)：BML-UW8705 20×Mg-ATP溶液，125 µL，產(chǎn)品編號(hào)：BML-EW9805 2×非還原性凝膠上樣緩沖液，2.5 mL，產(chǎn)品編號(hào)：BML-KW9880 10×泛素化緩沖液，250 µL，產(chǎn)品編號(hào)：BML-KW9885

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格
BML-UW9920-0001	Ubiquitinylation kit 泛素化試劑盒	1 kit

◆相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格
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