【新品速遞】Cisbio 藥物靶標胞外激酶（Kinase）活性檢測整體解決方案
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什么是激酶？
激酶(kinase)是一種特殊的酶，可以將磷酸基團從高能量供體分子（如ATP）轉移到特定靶分子（底物），這一過程稱為磷酸化。許多腫瘤的發生是由某些與生長相關的“激酶”發生突變導致異常活化引起的，因而激酶抑制劑如能有效抑制突變激酶的活性，就能達到抑制癌細胞增長的目的。
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激酶研究的意義：
激酶（Kinase）是重要和超大的家族藥物靶標，包含518個成員，是制藥工業和學術研究的主要研究領域。激酶信號傳導途徑在調節細胞增殖、代謝和死亡中起著重要作用，因此激酶活性的變化可能會導致包括癌癥在內的各種疾病形態。因而，激酶的上述重要特征使其成為藥物篩選和發現中重要的目標家族之一。在過去幾年中，科研人員不斷地增加激酶作為重要藥物的識別靶標。截至目前，FDA已經批準了超過30種激酶抑制劑。現代新藥研發的關鍵首先是尋找、確定和制備藥物作用靶點。在500多個已發現的藥物靶點里中，GPCR，Ion Channel，Kinase的使用廣泛。
為了支持激酶類藥物的篩選、發現與開發，西寶生物攜手Cisbio為您提供多種激酶類型，從檢測方法優選、高通量篩選到選擇性分析等一系列激酶研究解決方案。咨詢訂購熱線：400-021-8158！
Cisbio 激酶檢測，是基于抗體的檢測產物生成的解決方案，其特異性各不相同。包括基于 ADP 定 量的適用于所有激酶的 ADP Transcreener 檢測試劑盒；利用通用底物的經過兩百多種激酶驗證 的 KinEASE 試劑盒；利用特定底物、特異抗體的 HTRF 工具箱解決方案。
Cisbio激酶檢測原理：
Cisbio 激酶檢測，是基于抗體的檢測產物生成的解決方案，其特異性各不相同。包括基于ADP定量的適用于所有激酶的 ADP Transcreener 檢測試劑盒；利用通用底物的經過兩百多種激酶驗證的 KinEASE 試劑盒；利用特定底物、特異抗體的HTRF工具箱解決方案。關于HTRF技術的介紹請參閱
圖1：HTRF磷酸化蛋白測量的實驗過程
所有這些檢測方案，操作步驟都是一致的。
（1）激酶反應：加入激酶、底物、ATP，室溫進行激 酶反應；
（2）檢測步驟：激酶反應完畢，加入能量供體 Eu 和能量受體 XL665/d2 標記試劑，室溫孵育1小時，讀數。
（1）激酶反應：加入激酶、底物、ATP，室溫進行激 酶反應；
（2）檢測步驟：激酶反應完畢，加入能量供體 Eu 和能量受體 XL665/d2 標記試劑，室溫孵育1小時，讀數。
激酶檢測試驗步驟：
所有的檢測方案，操作步驟都是一致的。
（1）激酶反應：加入激酶、底物、ATP，室溫進行激 酶反應；
（2）檢測步驟：激酶反應完畢，加入能量供體Eu和能量受體XL665/d2標記試劑，室溫孵育1小時，讀數。
（1）激酶反應：加入激酶、底物、ATP，室溫進行激 酶反應；
（2）檢測步驟：激酶反應完畢，加入能量供體Eu和能量受體XL665/d2標記試劑，室溫孵育1小時，讀數。
KinEASE TK 試劑盒：
KinEASE TK試劑盒適用于所有酪氨酸激酶的檢測。試劑盒提供生物素標記的底物、Eu標記的磷 酸化位點特異性抗體、XL665標記的親和素以及緩沖液。激酶將底物磷酸化，Eu-Ab識別磷酸化底物，XL665-SA與底物上的生物素結合。Eu與XL665接近，產生HTRF信號。
經過驗證的激酶列表：
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Ab1
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ABL2
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Arg
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BIK
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BInx
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BRK
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BTK
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c-kit
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CSF1R
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CSK
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C-SRC
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DDR2
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EGFR
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EphA3
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EphA4
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EphA5
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EphA8
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EphB1
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EphB2
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EphB3
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EphB4
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ErbB4
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FAK
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Fer
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Fes
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FGFR1
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FGFR2
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FGFR3
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FGFR4
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Fgr
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FIt1
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FIt3
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FIt4
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Fms
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Fps
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FRK
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Fyn
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Hck
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IGF-1R
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INSRR
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InsulinR
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IRR
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ITK
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JAK2
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JAK3
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KDR
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Kit
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LCK
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Lyn
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Mer
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Met
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MAT1R
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Musk
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NTRK1
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NTRK2
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PDGFRβ
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PYK2
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PYK2
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PTK5
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PTK6
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Ret
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Ron
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Ros
|
Rse
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Src
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TEK
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Tie2
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TRKA
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TRKB
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TYRO3
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VEGFR1
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VEGFR2
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VEGFR3
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Yes
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ZAP-70
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咨詢訂購熱線：400-021-8158！
產品訂購信息：|
產品名稱
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產品規格
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產品 貨 號
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HTRF KinEASE-TK kit
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1,000 tests
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62TK0PEB
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20,000 tests
|
62TK0PEC
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TK Substrate-biotin
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50ug
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61TK0BLE
|
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500ug
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61TK0BLC
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KinEASE STK 試劑盒：
KinEASE STK試劑盒是用來進行絲氨酸/蘇氨酸激酶檢測的試劑盒。根據激酶的不同，該試劑盒有三個通用底物可供選擇，分別為S1、S2和S3，經過驗證的激酶有一百多種。對于沒有經過驗證的激酶，可以用Discovery 試劑盒確定合適的底物，其中包括了三種底物。試劑盒的檢測原理與實驗步驟與KinEASE TK試劑盒相同。
經過驗證的激酶列表：
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HTRF KinEASE STK S1
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AMPK
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BrSKF2
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CaMKI
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CaMKIIa
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CaMKIIβ
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CaMKIIσ
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CaMKIIγ
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CaMKIV
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CHEK1
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CHEK2
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CHK1
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CHK2
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DAPK1
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DAPK2
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DAPK3
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DCAMKL2
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DRAK1
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LKB1
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MAPKAP-K1α
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MAPKAP-K1β
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MAPKAP-K2
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MAPKAP-K3
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MAPKAPK5
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MELK
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MLCK
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Mnk2
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PASK
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PHK γ2
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PKC α
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PKC βI
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PKC βII
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PKC σ
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PKC ε
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PKC γ
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PKC ι
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PKC μ
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PKC τ
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PKC ζ
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PKD2
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PRAK
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PRK2
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PRKA
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PRKD2
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PRKG2
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PRS6KA2
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RsK1
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RsK2
|
STK22B
|
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STK22D
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ZIRK
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HTRF KinEASE STK S2
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Aurora A
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Aurora B
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MARK2
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NEK11
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PAK2
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PAK3
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PAK4
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PAK5
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PAK6
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PAR-1Bα
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PKA
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PKG1α
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PKG1β
|
PRKACA
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ROCK-I
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ROCK-II
|
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ROKα
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RPS6KA6
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Rsk4
|
STK6
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TBK1
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|
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|
HTRF KinEASE STK S3
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AKT1
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AKT2
|
AKT3
|
AKT5
|
ASK1
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Aurora C
|
BRSK1
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CDC42BPA
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CDC42BPB
|
Clk 3
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COT
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DMPK
|
DYRK2
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GRK5
|
GRK6
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GSK3α
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|
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GSK3β
|
HIPK2
|
HIPK3
|
IKKα
|
IKKβ
|
LOK
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MAP3K8
|
MARK1
|
|
|
MINK
|
MINK1
|
MRCKα
|
MRCKβ
|
MSK1
|
MSK2
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MSSK1
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MST1
|
|
|
MST2
|
NEK2
|
NEK3
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NEK6
|
NEK7
|
NLK
|
P70S6K
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Pim-1
|
|
|
Pim-2
|
PKBα
|
PKBβ
|
PKBγ
|
PLK 3
|
RPS6KA4
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RPS6KA5
|
RPS6KB1
|
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SAD1
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SGK1
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SGK2
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SGK3
|
SGKL
|
SIK
|
Snk
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STK23
|
|
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STK3
|
STK33
|
STK4
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WNK2
|
WNK3
|
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咨詢訂購熱線：400-021-8158！
產品訂購信息：|
產品名稱
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產品規格
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產品貨號
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|
HTRF KinEASE -STK S1 kit
|
1,000 tests
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62ST1PEB
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|
20,000 tests
|
62ST1PEC
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|
|
HTRF KinEASE -STK S2 kit
|
1,000 tests
|
62ST2PEB
|
|
20,000 tests
|
62ST2PEC
|
|
|
HTRF KinEASE -STK S3 kit
|
1,000 tests
|
62ST3PEB
|
|
20,000 tests
|
62ST3PEC
|
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|
HTRF KinEASE STK Discovery kit
|
1,000 tests
|
62ST0PEB
|
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其他產品
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HTRF KinEASE detection buffer
|
40ml
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62SDBRDD
|
|
200ml
|
62SDBRDF
|
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STK-Substrate 1-biotin
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50ug
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61ST1BLE
|
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500ug
|
61ST1BLC
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|
STK-Substrate 2-biotin
|
50ug
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61ST2BLE
|
|
500ug
|
61ST2BLC
|
|
|
STK-Substrate 3-biotin
|
50ug
|
61ST3BLE
|
|
500ug
|
61ST3BLC
|
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|
Enzymatic buffer kinase 5X
|
10ml
|
62EZBFDC
|
|
50ml
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62EZBFDD
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HTRF 工具箱特定激酶解決方案：
如果您希望用特定的底物、特異的抗體進行激酶檢測，HTRF工具箱試劑為您提供了多種選擇。我們提供二十多種Eu標記的特異性抗體和與之配合使用的能量受體，包括XL665或者d2標記的鏈霉親和素，抗6HIS抗體，抗GST抗體等。實驗檢測的是磷酸化產物的生成，實驗信號跟底物磷酸化的程度成正比。
HTRF 工具箱方案實例
進行COT激酶的檢測，其底物為MEK1，產物為磷酸化MEK1。我們選擇Biotin-MEK1蛋白作底物,利用標記了Eu3+的抗磷酸化MEK1抗體和標記了XL665 ad 的鏈霉親和素組成一個反應體系，如右圖所示。該反應體系與KinEASE試劑盒是相似的，只是底物與Eu標記抗體是針對COT激酶的，比較特異。
圖為：用工具箱進行COT激酶檢測
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