蛋白質結構序列分析用V8蛋白酶 * 蛋白內切酶Glu-C

來源：作者：人氣：-發表時間：2020-03-10 13:31:00【大中小】

◆ 產品介紹

酶切位點：V8蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶家族，能特異水解谷氨酸（Glutamic acid、E）或天冬氨酸（Aspartic acid、D）殘基羧基側肽鍵。在pH 7.8的NH4HCO3和pH 4.0的CH3COONH4緩沖液中識別并切割Glu羧基端肽鍵，在pH 7.8的磷酸鹽緩沖液中識別并切割Glu或Asp羧基端肽鍵，且對Glu的水解速率高于Asp。

別名：Endoproteinase Glu C，Staphylococcal Protease Protease V8，蛋白內切酶 Glu-C
CAS NO：66676-43-5
EC NO：3.4.21.19
分子量：約27000
外觀：白色的結晶或結晶性粉末

在溫和條件下進行蛋白多肽鏈的切斷，不會引起氨基酸殘基側鏈的修飾（氧化、鹵化、脫酰胺等）。而且，被修飾殘基（糖鏈、類脂體、磷酸、硫酸等的結合部位）的肽一般以完整形態被回收，而且具有良好的回收率。如果采用同樣的消化條件可以實現高再現性的分段。使用底物特異性高的酶進行蛋白質的結構分析，可預測氨基酸組成的大體片段數和平均大小，并且重要的是可以避免由于部分切斷（非特異性切斷），導致分離的復雜化。

◆ 產品應用

本品由Drapeau系列的Staphylococcus aureus（V8菌株）分離而成，是特異性切斷谷酰胺產的羧基側鏈的酶。分別切斷磷酸系列緩沖液中包含谷氨酸及天冬氨酸羧基側鏈、氨系列緩沖液中包含谷氨酸羧基側鏈的肽結合酯結合。因為其高底物特異性，本品被用于各種蛋白質結構序列分析時使用。在進行蛋白質酶切測序、肽圖譜分析和肽質量指紋圖譜分析中使用時，可以單獨使用或與其他蛋白酶混合使用。

◆ 特異性

切斷氨緩沖液中包含谷氨酸羧基側鏈的肽結合和酯結合。切斷磷酸緩沖液中包含谷氨酸及天冬氨酸羧基側鏈的肽結合和酯結合。

活性：20units/mg以上

單位的定義：以2-Phe-Leu-Glu-4-NA為底物，在pH7.8,25℃情況下，1分鐘生產1μmol 4-硝基苯胺所需酶的量為1unit。

反應：特異性切斷谷氨酸的羧基側鏈。

◆ 使用方法

僅切斷谷氨酸羧基

在0.01~0.1mol/L碳酸氫銨（pH7.8）或者在0.01~0.1mol/L醋酸銨（pH4.0）中，酵素：底物（mol/mol）=1：30~100，在30~37℃情況下，分解2~24小時。

同時切斷天冬氨酸羧基

在0.01~0.1mol/L磷酸緩沖液（pH7.8）中，以同樣條件分解。

用途：各種蛋白質的序列分析的肽分段。

較佳pH：在pH3.5~9.5范圍有蛋白酶活性。pH4.0及pH7.8時，活性極大（以血紅蛋白為底物）。

抑制情況：主要抑制劑：DFP

◆ 注意事項

穩定性: pH值為4~10時，物質穩定。冷凍干燥或冷凍，保存時間較長。在0.2%的SDS中，具有100%活性：在4mol/L尿素中，具有50%活性。

◆ 產品列表

產品編號	產品名稱	產品規格	儲存條件
164-13982	V8 Protease V8蛋白酶	2mg	2-10℃
050-05941	Endoproteinase Glu-C, Sequencing Grade 測序級谷氨酰蛋白內切酶Glu-C	50ug	2-10℃
056-05921	Endoproteinase Asp-N, Sequencing Grade 測序級天冬氨酰蛋白內切酶Asp-N	2ug	2-10℃

作為一家綜合性的服務商，西寶生物還可提供重組Glu-C蛋白酶

序列分析純胰蛋白酶：特異性高，穩定性好。
無動物源性：重組生產，無外源性的病毒污染，生產過程不使用任何動物源原料。
質量穩定：批量生產，可保證穩定連續的批次生產；產品批次間無差異，質量穩定。
純度高：比活高；宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
凍干粉：易于儲存和運輸。

◆ 重組V8蛋白酶產品應用

1.對于分析賴氨酸和精氨酸含量高的蛋白質，與胰蛋白酶聯用可顯著提高鑒定蛋白數目

2.適用于分離和富集磷酸化肽段

◆ 重組V8蛋白酶產品列表

產品編號	產品名稱	產品規格	儲存條件
AXJ4266D-20ug	Recombinant Glu-C Protease (activity＞7U/mg) 重組Glu-C蛋白酶（活性＞7U/mg）	2mg	短期2-8℃，長期-20℃
AXJ4266D-100ug		100ug
AXJ4266C-20ug	Recombinant Glu-C Protease,lyophilized (activity＞7U/mg) 重組Glu-C蛋白酶，凍干（活性＞7U/mg）	20ug
AXJ4266C-100ug		100ug