細菌、真菌高靈敏度檢測試劑 SLP-HS Single Reagent Set II

來源：作者：人氣：-發表時間：2020-12-22 15:21:00【大中小】

細菌、真菌高靈敏度檢測試劑

肽聚糖、β-葡聚糖檢測試劑盒

SLP-HS Single Reagent Set II

用于肽聚糖和(1→3)-β-D-葡聚糖的定量檢測，檢測敏感。

【原理】

蠶（Bombyx mori）的體液內存在著被稱為酚氧化酶前體（ProPO）級聯的生物防御機制，通過與肽聚糖（PG）以及（1→3）-β-D-葡聚糖（β-葡聚糖）反應，終使酚氧化酶前體（ProPO）活性化為酚氧化酶（PO）。目前已闡明的PO的活化機制是包含多種絲氨酸蛋白酶活化的級聯機制。目前認為該級聯機制在異物入侵昆蟲體內時所觀察到的黑色素形成現象起著重要的作用。

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本SLP試劑采用蠶的體液經無菌提取、制備而成的凍干試劑，包含酚氧化酶級聯中的因子。本試劑通過被肽聚糖以及β-葡聚糖所活化，從而氧化反應底物DOPA（L-3,4-二羥基苯丙氨酸），終生成黑色素。由于大多數細菌的細胞壁存在肽聚糖、β-葡聚糖也存在于多種真菌的細胞壁中，因此利用生成的黑色素作為指標，可檢測出細菌、真菌。

SLP試劑的活性化機制如圖1所示。肽聚糖或β-葡聚糖分別與其識別蛋白（PGRP與βGRP）結合，引發酚氧化酶級聯，終使PO活化。活性化后的PO可氧化底物中的DOPA，終生成黑色素。

圖1. 蠶血酚氧化酶前體級聯反應

肽聚糖不僅存在于革蘭氏陽性菌，也存在于革蘭氏陰性菌中。不管是陽性還是陰性的革蘭氏菌，SLP試劑對一般細菌均產生反應。此外，SLP試劑也會對真菌來源的β-葡聚糖起反應，因此SLP試劑可作用于細菌、真菌類的微生物。

SLP試劑雖然會對來源于各類細菌的肽聚糖和帶有β-1,3-糖苷鍵的β-葡聚糖產生強烈反應，但幾乎不與作為革蘭氏陰性菌細胞壁成分的脂多糖（內毒素）發生反應。能被LAL試劑（鱟試劑）檢測出的內毒素不會使SLP的級聯機制活化，而SLP試劑能檢測無法被鱟試劑檢測出的肽聚糖。因此聯合鱟試劑與SLP試劑一起使用，可對檢測材料中的微生物種類進行預測。

【特點】

●　配合內毒素檢測儀Toxinometer®，可準確、高靈敏度地定量肽聚糖和β-葡聚糖

【應用實例】

●　檢測醫藥制品、生物制劑、基因工程制品等中的細菌、真菌。
●　檢測人工透析液，防止被微生物污染
●　作為水質污染的指標
●　用于肽聚糖相關的構效關系、生物合成、代謝、病因生成的研究；
●　用于昆蟲生物防御反應機制的研究

【試劑盒組成】

1.SLP-HS Reagent II　靈敏度：10 pg/mL（肽聚糖），1 pg / mL（β-葡聚糖）	0.1 mL用×20瓶
2.SLP-Diluent（SLP溶解液）	5 mL×2瓶
3.Standard（標準溶液）	0.5 mL×1瓶

※　來源于Staphyrococcus aureus的可溶性肽聚糖標準品，用于細菌檢測。
如需進行真菌檢測，可另行購買凝膠多糖標準品（產品編號：030-09903）

【測定方法】

通過使用內毒素檢測儀Toxinometer®，可定量檢測肽聚糖以及β-葡聚糖。內毒素檢測儀Toxinometer® 可檢測由SLP試劑活化生成的色素所引發的吸光度的變化，當吸光度達到預設的閾值時的反應時間被稱為活化時間（Ta）。Ta可作為SLP活化物質（肽聚糖、β-葡聚糖）的定量指標。檢測原理請見圖2，使用內毒素檢測儀Toxinometer® 的測定示例請見圖3。