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無血清培養(yǎng)基重要添加劑 - 胰島素-轉鐵蛋白-硒(ITS)

來源:作者:人氣:-發(fā)表時間:2024-11-28 10:08:00【
由于血清在細胞培養(yǎng)應用中的缺點使得近些年在科學研究和工業(yè)生產(chǎn)領域,人們對無血清培養(yǎng)基的需求日益增大。近年來無血清培養(yǎng)基在生物制品的生產(chǎn),如疫苗、單克隆抗體和重組蛋白等,同時也在細胞生物學、藥理學、腫瘤學研究中應用越來越廣。
無血清培養(yǎng)基除了能夠克服血清的缺點還具有兩個突出的優(yōu)點,即可針對特定的細胞類型配制專用的培養(yǎng)基,以及可精確地控制細胞的增殖和分化過程。
基礎的無血清培養(yǎng)基雖然營養(yǎng)豐富、可足量提供細胞所必須的營養(yǎng)成分,但通常還需要進一步添加特定的組分,如生長因子、脂肪酸、維生素和微量元素等。多年的實踐表明,對于大多數(shù)細胞的無血清及低血清培養(yǎng)基,在基礎培養(yǎng)基(多為DMEM/F12)中必須額外添加ITS(胰島素-轉鐵蛋白-硒)。
ITS補劑
ITS得名于其組成型營養(yǎng)成分,即胰島素(insulin)、轉鐵蛋白(transferrin)和硒(selenium)。這種營養(yǎng)成分混合物的變體形式包括SITE(硒、胰島素、轉鐵蛋白、乙醇胺)和還添加了亞油酸、油酸和/或牛血清白蛋白(BSA)的增強型制劑。
胰島素 (Insulin)
可促進細胞生長,調節(jié)細胞對葡萄糖、氨基酸和脂類的攝取和利用。胰島素也具有抵抗細胞凋亡的作用。在哺乳動物細胞的無血清培養(yǎng)時,重組胰島素的添加濃度遠高于其生理濃度,這樣胰島素除能與胰島素受體(Insulin Receptor, IR)結合,發(fā)揮代謝調節(jié)和抗凋亡作用外,還可通過激活胰島素樣生長因子(IGF-I)的受體,發(fā)揮促有絲分裂和抗凋亡作用,產(chǎn)生生長因子效應。
轉鐵蛋白 (Transferrin)
是血清中富含的一種糖蛋白,能與三價鐵離子可逆性結合。其在鐵離子的轉運和代謝中發(fā)揮著至關重要的作用,同時也是一種重要的胞外抗氧化劑。因此,轉鐵蛋白是無血清培養(yǎng)基必不可少的添加物。轉鐵蛋白最初是從血清中分離出來的,然而由于批間差大和安全性差等問題,重組的轉鐵蛋白被越來越廣泛地應用。從各種表達系統(tǒng),包括植物中獲得的重組轉鐵蛋白均具有相似的活性。
硒 (Selenium)
是一種微量元素,它是谷胱甘肽過氧化物酶、硫氧還蛋白還原酶和其他抗氧化物酶的關鍵組分。硒已被確認是無血清培養(yǎng)基的必須添加物。
乙醇胺 (Ethanolamine)
是一種有機化合物,它既是伯胺也是伯醇,可作為磷脂合成的前體。乙醇胺在雜交瘤細胞的增殖中發(fā)揮著重要的作用,因而經(jīng)常添加到雜交瘤細胞的無血培養(yǎng)基中。乙醇胺也用于其它類型細胞的無血清培養(yǎng)。
Seebio提供三種不同的ITS,即:常規(guī)通用的ITS-G、用于貼壁細胞培養(yǎng)的ITS-A,以及適用于需要氨基乙醇的細胞(如支氣管上皮細胞)類型培養(yǎng)的ITS-X。本產(chǎn)品經(jīng)過濾滅菌,即開即用,使用時將所需量直接加入到液體培養(yǎng)基即可。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱
ITS-G Supplement(×100)
ITS-A Supplement(×100)
ITS-X Supplement(×100)
產(chǎn)品編號
090-06741
097-06751
094-06761
組分 (mg/L)
胰島素
1,000
1,000
1,000
轉鐵蛋白(Apo)
550
550
550
Na2SeO3
0.67
0.67
0.67
丙酮酸鈉
-
11,000
-
乙醇胺
-
-
200
KCl
400
400
400
NaCl
6,800
6,800
6,800
NaHCO3
2,200
2,200
2,200
NaH2PO4
121.73
121.73
121.73
D–葡萄糖
1,000
1,000
1,000
內毒素含量
≤ 0.6 EU/mL
產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品規(guī)格
090-06741
ITS-G Supplement(×100)
10mL
097-06751
ITS-A Supplement(×100)
10mL
094-06761
ITS-X Supplement(×100)
10mL

 

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此文關鍵字:胰島素-轉鐵蛋白-硒 ITS