【名稱】鏈霉親和素 (streptavidin，SA)
【分子大小】60 kDa
【來源】大腸桿菌重組表達
【保存條件】-20℃保存
【有效期限】2 年
【概述】
鏈霉親和素 (Streptavidin，簡稱SA)，是鏈霉菌在培養過程中分泌的一種蛋白質產物。具有與生物素特異結合的能力，結合常數高達1015M。同時，由于鏈霉親和素等電點比親和素低，且不含糖基鏈，故在檢測中的靈敏度和特異性都高于親和素，建立在此基礎上的生物素-鏈霉親和素系統的應用比生物素-親和素系統有更大優勢。
【結構】
鏈霉親和素是四聚體蛋白，大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結合，兩者之間的親和力極為強烈，鏈霉親和素-生物素復合物的解離常數處于10 mol/L數量級，這一性質常用于分子生物學用途。其中一條完整的SA肽鏈中有159個氨基酸殘基，分子量為16450。
【用途】
鏈霉親和素可偶聯HRP、AP、生物素及磁珠等，參與免疫學中檢測信號的放大，廣泛應用于ELISA、IHC、WB等實驗及親和色譜填料的制備、生物傳感器、生物芯片的制作。
【注意事項】
1、凍干粉溶解后應避免反復凍融，建議分裝成小包裝后分別凍存;
2、溶解后立即使用效果好，不能4°C長期存放;
【實驗舉例&操作步驟】
一、微孔板包被
1、用碳酸鈉緩沖溶液（pH 9.6）溶解凍干粉，將濃度稀釋成3-10ug/ml（客戶可設定梯度進行實驗）
注意：由于SA等電點是7.4，包被不建議使用中性緩沖液
2、用移液器吸取100ul/孔，4℃過夜包被或者37℃包被2h；
3、洗滌：倒盡板孔中液體，加200ul洗滌液，靜放三分鐘，反復三次，然后將反應板倒置在吸水紙上，使孔中洗滌液流盡，扣干
4、后續進入封閉、洗滌、抗原抗體結合流程
若不立即進入下游實驗，包被板需要進行烘干保存時。包被前，將包被液中加入20%蔗糖作為活性保護劑。

二、SA偶聯磁珠
2.1 NHS 活化
1、充分混勻磁珠后，取100μl PangoBeads COOH 磁珠到1.5 ml 離心管中，置于磁性分離上，待固液分離后去除上清液；
2、取200μl MES溶液（25mM，pH 5.0）加入到離心管中，置于磁性分離上，待固液分離后去除上清液。重復該步驟1 次；
3、迅速加入新配制的50μl EDC 溶液和50μl NHS 溶液 （均為50mg/ml， 以上述MES 配制）到裝有磁珠的離心管中，漩渦混勻使磁珠充分懸浮，室溫下垂直混合30min；
4、反應結束后，加入100μl 上述 MES 溶液洗滌 2 次；（活化狀態不宜長時間保存，
建議立即進行偶聯）
2.2 蛋白偶聯
1、將離心管置于磁性上，分離去除上清液，加入100μl蛋白溶液（25 mM MES，pH 5.0）
輕柔地混勻；（蛋白濃度在0.1-2.0mg/ml）
2、在室溫下垂直混合反應2h，或在4℃條件下垂直混合過夜；
3、反應結束后將離心管置于磁分離架上，磁性分離去除上清液，加入1ml乙醇胺溶液
（3M，pH9.0）洗滌磁珠 2 次；
4、加1ml乙醇胺溶液（3M, pH 9.0）于離心管中，渦旋30s，將離心管置于垂直混合
儀中室溫反應1-2h；
5、反應結束后，將離心管置于磁力架上，待固液分離后移除上清液，然后加入100μl
純化水輕柔渦旋 30s，磁吸分離，重復該步驟 1 次；
6、加入適量的保存液（可根據需要來確定保存溶液的加入量，以調整偶聯配體磁珠的加入適量的保存液（可根據需要來確定保存溶液的加入量，以調整偶聯配體磁珠的濃度）保存于4°，如果固定的生物配體穩定，可以在保存溶液中加入0.02%（W/V）疊氮化鈉作為抑菌劑。