重組蛋白和鏈酶親和素(Streptavidin, SA)
蛋白A、蛋白G和蛋白L是微生物來源的天然或重組蛋白質,可以和哺乳動物的免疫球蛋白結合。將這些蛋白偶聯于支持物上,利用親和層析來純化抗體,也可用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。不同的抗體結合蛋白與不同的免疫球蛋白的結合能力并不一樣,它們受到后者的來源及亞類的影響,因此對于不同的抗體需要選擇不同的抗體結合蛋白。
蛋白A是葡萄球菌細胞壁的組成成分,42kD,能特異性的結合免疫分子的Fc區,特別是IgG. 有4個親和結合位點,耐熱和耐變性劑(4M尿素,6M鹽酸胍);用途:可以廣泛用于分離不同種屬來源的哺乳動物IgG分子。
蛋白G是G型鏈球菌細胞壁的組成成分,主要與大多數哺乳動物的免疫球蛋白的Fc區結合,結合能力大于蛋白A;用途:主要用來純化不能與蛋白A很好結合的單抗和多抗。不能結合人IgM,D,A。
蛋白L源于細菌Peptostreptococcus,是一種能和廣泛的免疫球蛋白相結合的蛋白質,該蛋白只與抗體的k鏈結合而不會影響抗體的抗原結合位點,這一特性使其與蛋白A或蛋白G相比,能更廣泛地結合各種來源及亞類的抗體。用途:它不結合牛、山羊或綿羊來源的免疫球蛋白,可以用于從添加BSA或FCS的培養液中純化單克隆抗體。
鏈霉親和素(Streptavidin,SA),是鏈霉菌在培養過程中分泌的一種蛋白質產物。SA的分子量為60Kda,內4條序列相同的肽鏈組成。如同親合素一樣,一個SA分子也能結合4個生物素分子,二者親和常數亦為1015/mol。SA的每條肽鏈含159個氨基酸殘基,其中賴氨酸、精氨酸等堿性氨基酸的含量比親合素少,因此SA是一種稍偏酸性的蛋白質,其pI為5.5,并且不帶糖基。
1.蛋白類產品和鏈酶親和素
貨號
|
英文名稱
|
中文名稱
|
液體 |
凍干粉 |
重組產品來源
|
188230
|
Recombinant Protein A
|
重組蛋白A
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1mg/10mg/100mg
|
E. coli
|
|
應用:結合兔,豬,狗和貓的 IgG,結合抗體Fc區, 液體濃度:5mg/ml
|
|||||
188241
|
Recombinant Protein G
|
重組蛋白G
|
1mg/10mg/100mg
|
E. coli
|
|
應用:結合小鼠,人的IgG 亞型(IgG1, IgG2, etc.), 結合抗體Fc區,液體濃度6mg/ml
|
|||||
188250
|
Recombinant Protein A/G
|
重組蛋白A/G
|
5mg
|
|
E. coli
|
應用:結合來自于兔,小鼠,人或其他哺乳動物IgG, 結合抗體Fc區
|
|||||
188261
|
Recombinant Protein L
|
重組蛋白L
|
1mg/10mg
|
E. coli
|
|
應用:結合IgG, IgM, IgA, IgE and IgD, 結合抗體kappa輕鏈, 液體濃度:5mg/ml
|
|||||
188272
|
Strepavidin
|
鏈酶親和素
|
1mg/10mg
|
|
|
應用:與親和素連接,用于親和層析, 液體濃度7-12mg/ml
|
免疫球結合蛋白的一般特性
重組蛋白A |
重組蛋白G |
重組蛋白 A/G |
重組蛋白 L |
|
天然來源 |
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) |
鏈球菌(Streptococcus) |
N/A |
大消化鏈球菌(Peptostreptococcus magnus) |
重組產品來源 |
E. coli |
E. coli |
E. coli |
E. coli |
分子量 |
44,600 |
21,600 |
50,460 |
35,800 |
SDS-PAGE |
45 kDa |
32 kDa |
40-45 kDa |
36 kDa |
免疫球蛋白Ig結合位點數 |
4 |
2 |
6 |
4 |
白蛋白結合位點 |
No |
No |
No |
No |
適合結合pH值 |
8.2 |
5 |
5~8.2 |
7.5 |
Ig目標結合區 |
Fc |
Fc |
Fc |
kappa輕鏈 |
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