狂犬病疫苗的發展和現狀

來源：Seebio.cn作者：西寶生物人氣：-發表時間：2012-01-12 14:43:38【大中小】

1885年法國科學家巴斯德首次將狂犬病病毒在兔腦連續傳代和干燥減毒而制成的疫苗,奇跡般的救治了一名被瘋狼嚴重咬傷的9歲小孩,開辟了人用狂犬病疫苗的新紀元100多年以來,特別是近二三十年現代細胞培養技術和分子生物學的發展,狂犬病疫苗取得了重大進展。

1．國外發展現況

1．1　Semple氏腦組織滅活疫苗

1911年由在印度的英國人Semple首創,疫苗內為完全無感染性活病毒,該疫苗只用作暴露后注射。但這種疫苗免疫效果不十分滿意,全程免疫后仍有1‰的死亡病例,疫苗的局部和全身反應也比較重,特別是接種后引起的神經性麻痹病例較多,發生率一般為0. 5‰~2. 0‰,其原因與成熟動物腦組織中所含的髓磷酯有關。但限于經濟和技術條件,直至2005年前仍有不少國家使用這種疫苗,其中印度是主要的制造、應用和出口這種疫苗的國家。

1．2　新生動物腦組織疫苗

考慮到動物腦組織中髓磷酯的含量隨動物成熟而增加,為了減少神經性麻痹的反應, 1955年智利學者創用了以3~5日齡新生小白鼠腦組織制備的乳小白鼠腦疫苗,主要在拉丁美洲國家應用。前蘇聯于20世紀60年代研制成功乳大白鼠腦疫苗一直應用至20世紀70年代末。但于1960年在委內瑞拉發現11例與乳鼠腦疫苗相關的神經并發癥等表明乳鼠腦疫苗的反應性仍然較大。為減少腦脊髓炎物質,以后對這種疫苗作了改進,如生產用的乳鼠只用接種時不超過1日齡的乳鼠,腦懸液經17 000g沉淀去除腦組織。這種疫苗當前仍在拉丁美洲應用。

1．3　禽胚疫苗

1956年以后又研制成功用鴨胚制備的疫苗(DEV),多數用于感染前預防。據報告中和抗體水平不如腦組織疫苗。也出現過神經系統并發癥,其發生率為4/10萬。1981年起美國及其他國家不再生產和使用這種疫苗。1980年瑞士Berna廠用化學提取和區帶離心純化技術生產一種鴨胚純化疫苗(PDEV)。人體接種后產生的中和抗體水平與二倍體細胞疫苗相當,接種后不良反應很輕。是WHO推薦的4種疫苗之一,但產量很低,應用量很少。

1. 4　細胞培養疫苗

20世紀60年代以后用細胞培養為基質制備疫苗有很大發展,細胞培養人用狂犬病疫苗主要有以下幾種:

1. 4. 1　地鼠腎細胞培養疫苗(PHKCV)　

1958年Kissling最早開始研究原代地鼠腎細胞培養疫苗,以后Fenje等用SAD株適應PHKC制成PHKCV, 1968年由加拿大批準用于暴露前和加強免疫。1966年前蘇聯用第33代地鼠腎細胞培養Vnukovo32株制備PHKCV,在前蘇聯和東歐許多國家廣泛應用

1. 4. 2　純化雞胚細胞疫苗(PCECV)　

1965年日本Kondo將FluryHEP株病毒適應在雞胚細胞培養,制成滅活疫苗。疫苗經過濃縮純化后較乳鼠腦疫苗有更高的抗原效價。該疫苗已由日本制成凍干疫苗,批準應用。但在其他國家用量很少。1984年聯邦德國Behring廠用FluryLEP株適應雞胚細胞研制成功一種純化的雞胚細胞疫苗(PCECV)。1985年曾在南斯拉夫觀察47名被證實為瘋動物咬傷者,包括2名被瘋狼嚴重咬傷的64歲婦女和51歲男性以及1名被瘋狗嚴重咬傷頭部的3歲兒童,應用疫苗和HRIG后全部得到保護。效果與HDCV可比,而且由于生產工藝簡單,生產過程短,價格較HDCV便宜,是WHO推薦的疫苗之一,美國也已批準進口。

1. 4. 3　人二倍體細胞疫苗(HDCV)　

HDCV為美國W istar研究所首創,用人二倍體細胞WI-38株適應和培養病毒,以后法國Merieux研究所用MRC-5人二倍體細胞生產疫苗。疫苗經不同單位用腦組織疫苗和鴨胚疫苗進行過人體接種觀察比較,證實接種后的不良反應很輕。又經不同國家按5~6針暴露后免疫,表明HDCV有很好的保護效果,合并抗血清接種無明顯抑制作用。在伊朗1976年曾對45名被證實為狂犬病的狼和狗嚴重咬傷者,包括一處穿透咬傷或多處頭面部受傷者,注射1針抗血清(40 IU/kg)的同時再注射疫苗1mL,以后于3、7、14、30 d及90 d時各注射1針,開始治療的時間一般在咬傷后3 d,有的遲至14 d,結果經2年隨訪這些人全部得到保護。目前公認HDCV可以作為一種新發展疫苗的標準對照疫苗。

1. 4. 4　Vero細胞疫苗(PVRV)　

Vero細胞為非洲綠猴(Cerco-pithecus aethiopsmonkey)腎細胞的傳代細胞,是一種在一定代次內不致癌的異倍體細胞,經WHO批準可以用于人類疫苗的生產基質。早期由法國Merieux研究所用Vero細胞為基質研制成功一種純化的Vero細胞狂犬病疫苗(PVRV)。用微載體懸浮培養Vero細胞生產狂犬病疫苗,其優點為短時間內可以繁殖大量細胞并可進行工業化的大罐培養。所用毒種為與生產HDCV毒種相同的PM 1503-3M株。人體觀察不良反應輕效果好,抗體應答和暴露后免疫效果與HDCV可比。1983年曾在突尼斯對75名被可疑瘋動物咬傷者用PVRV進行免疫治療觀察,其中Ⅱ類受傷者占50%以上, 2 d內開始接種者占78. 5%。分注射4針(0、3、7和14 d)、5針(0、3、7、14和30 d)和6針(0、3、7、14、