藍(lán)膠親和介質(zhì)

來(lái)源：seebio.cn作者：西寶生物人氣：-發(fā)表時(shí)間：2012-07-18 11:18:00【大中小】

1、概述

瓊脂糖親和介質(zhì)（藍(lán)膠）通常簡(jiǎn)稱(chēng)為藍(lán)膠，它是一種染料親和介質(zhì)，其配基（藍(lán)色染料Cibacron Blue F3GA）是一種多芳香環(huán)的磺化物，具有與NAD+相似的空間結(jié)構(gòu)，能與各種激酶、脫氫酶、血清白蛋白、DNA聚合酶等產(chǎn)生親和吸附作用，從而達(dá)到分離純化的目的。

瓊脂糖親和介質(zhì)（藍(lán)膠）的光學(xué)顯微鏡照

瓊脂糖親和介質(zhì)（藍(lán)膠）以高交聯(lián)度瓊脂糖為基質(zhì)，具有高機(jī)械強(qiáng)度、高流速的特點(diǎn)，非特異性吸附少，配基泄漏低，可廣泛用于蛋白純化生產(chǎn)領(lǐng)域，如用于純化磷酸激酶、水解酶、DNA和RNA核酸酶或聚合酶、合成酶、羥化酶、糖分解酶、磷酸二酯酶、脫羧酶以及血清白蛋白、血清脂蛋白、鐵傳遞蛋白、干擾素等蛋白分子。

西寶提供的瓊脂糖親和介質(zhì)（藍(lán)膠）已被生化工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、中科院生物物理所等單位廣泛使用，應(yīng)用效果良好。

2、 瓊脂糖親和介質(zhì)（藍(lán)膠）介質(zhì)的應(yīng)用

純化百日咳疫苗

層析柱：4.2 cm ×1.0 cmI.D.，CV=3.3 ml
樣品：預(yù)處理的百日咳培養(yǎng)液上清（15ml）
平衡緩沖液（A）：20mM NaAC-HAC, pH4.5
洗脫緩沖液（B）：20mM Tris-HCl, pH 8.5
洗脫緩沖液（C）：20mM Tris-HCl +1MMgCl2, pH 8.5
流速：1ml/min

上圖為采用藍(lán)膠純化雙組分百日咳疫苗的層析譜圖。經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的層析分離后，目標(biāo)峰（P2）中的百日咳毒素（PT）和絲狀血凝素（FHA）的純度大于85%，純化倍數(shù)分別達(dá)到了9.2和13.6，純化效果良好。

3、規(guī)格

產(chǎn)品名稱(chēng)	藍(lán)膠親和介質(zhì)
配基密度
pH穩(wěn)定性	4 ~ 12
粒徑范圍(μm)	45 ~ 165
最大流速(cm/h)	400
應(yīng)用	用于白蛋白、需要核苷酸的酶、凝集因子等生物大分子的純化
規(guī)格	50mL
	250 mL
	1 L

西寶可以提供的親和層析列表如下：

產(chǎn)品名稱(chēng)	瓊脂糖親和介質(zhì)（鎳）	瓊脂糖親和介質(zhì)（谷胱甘肽）	瓊脂糖親和介質(zhì)（肝素）	瓊脂糖親和介質(zhì)（藍(lán)膠）	瓊脂糖親和介質(zhì)（蛋白A）
配基密度（ml介質(zhì)）	15~120mmol	20~30 mmol	5 mg	7-10 μmol	6 mg
載量（ml介質(zhì)）	20~30mg（LDH）	10mg GST	2mg抗凝血酶III	20mgBSA	35mgIgG（兔）
pH穩(wěn)定性	3-13	3-12	4-12	4-12	2-11
粒徑范圍(μm)	45-165	45-165	45-165	45-165	45-165
最大流速(cm/h)	500	450	500	500	450
應(yīng)用	用于含組氨酸標(biāo)簽蛋白的純化	用于含GST標(biāo)簽蛋白的純化	用于抗凝血酶III、凝血因子及干擾素等蛋白的純化	用于白蛋白、干擾素、脂蛋白、凝聚因子等蛋白的純化	用于多種抗體的純化