Antonia Red™是一種新型紅移染料，最大吸收在583nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)在602 nm。Antonia Red-Antonia Red™標(biāo)記賴(lài)氨酸-葡聚糖, 可以簡(jiǎn)便地與生物分子和表面結(jié)合，有效固定在細(xì)胞和組織上。

嚴(yán)格控制每個(gè)批次的分子量，外觀，溶解度，取代度，熒光和游離染料。TdB生產(chǎn)分子量4kDa到150kDa Antonia Red™標(biāo)記賴(lài)氨酸-葡聚糖。 Antonia Red™標(biāo)記賴(lài)氨酸-葡聚糖是一種紫色粉末。

活體/固定

賴(lài)氨酸-葡聚糖是由來(lái)源于腸系膜白串珠菌的特定葡聚糖片段通過(guò)賴(lài)氨酸標(biāo)記而來(lái)，然后在溫和的條件下用Antonia Red染料標(biāo)記制得Antonia Red™ 標(biāo)記賴(lài)氨酸-葡聚糖。經(jīng)過(guò)純化，嚴(yán)格控制每個(gè)批次的分子量，外觀，溶解度，取代度，PH和游離賴(lài)氨酸和游離染料。 產(chǎn)品是由所采用的葡聚糖片段的相近分子量來(lái)標(biāo)識(shí)。例如，Antonia Red Lysine dextran 4 的分子量大約是 4000 Da。實(shí)際分子量通過(guò)GPC檢測(cè)確定。來(lái)自腸系膜白串珠菌B-512F 的葡聚糖本質(zhì)上是一種線(xiàn)性α-(1 - 6)鏈接葡萄糖，不過(guò)含有較低比例 (2-5%)沿著主鏈分布的 α-(1-3)側(cè)鏈。通過(guò)GPC, 旋光性，吸光度和其他控制參數(shù)來(lái)嚴(yán)格控制獲得分子量范圍4000到500000Da的葡聚糖片段。

Fig. 1. Antonia Red-lysine-dextran的結(jié)構(gòu)式

Antonia Red™標(biāo)記賴(lài)氨酸-葡聚糖在pH9.0硼酸緩沖液中最大吸收波長(zhǎng)為583 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為602 nm。

Antonia Red-標(biāo)記賴(lài)氨酸-葡聚糖是由TdB開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)的，類(lèi)似Texas Red的紅移染料。 Antonia Red-標(biāo)記賴(lài)氨酸-葡聚糖為紫色粉末，極易溶于水和電解質(zhì)溶液，不溶于大多數(shù)有機(jī)溶劑，例如乙醇，甲醇，丙酮，氯仿，乙酸乙酯等。取代度 (DS)介于0.01-0.02 (mol賴(lài)氨酸/mol葡萄糖)和0.001-0.01 (mol Antonia Red/mol葡萄糖)。

Fig. 2. 在 pH 9的0.025M 硼酸緩沖液中的Antonia Red Lysine Dextran 70熒光圖譜。激發(fā)波長(zhǎng) 583nm, 發(fā)射波長(zhǎng)602nm

雖然對(duì)于Antonia Red-標(biāo)記賴(lài)氨酸-葡聚糖穩(wěn)定性的前瞻性研究未見(jiàn)報(bào)道，但根據(jù)賴(lài)氨酸與葡聚糖鏈的酰胺化學(xué)鍵，以及賴(lài)氨酸與Antonia Red間的共價(jià)鍵的結(jié)構(gòu)性質(zhì)判斷，該物質(zhì)具有較好的穩(wěn)定性。若容器密封完好，室溫干燥條件下，Antonia Red(TM)標(biāo)記葡聚糖可以穩(wěn)定保持6年。

攜帶氨基基團(tuán)的葡聚糖，作為生物結(jié)合和活體固定的工具，對(duì)于科學(xué)界而言?xún)r(jià)值非凡。賴(lài)氨酸結(jié)構(gòu)中的游離氨基可以與激活的基團(tuán)以共價(jià)鍵結(jié)合，例如NHS酯或異氰酸酯，或者，與羧酸通過(guò)常規(guī)的肽偶聯(lián)劑偶聯(lián)，例如DCC，HOBt 以及HATU。 細(xì)胞和組織固定，使組分保持“類(lèi)活體態(tài)”，并保持細(xì)胞滲透性，允許抗體可以進(jìn)入細(xì)胞結(jié)構(gòu)內(nèi)，應(yīng)用舉例，用于顯微研究和免疫轉(zhuǎn)染。賴(lài)氨酸結(jié)合葡聚糖通過(guò)與固定劑反應(yīng)（本文使用的是甲醛或戊二醛），與類(lèi)似蛋白質(zhì)和脂質(zhì)體的生物大分子形成共價(jià)交聯(lián)，使整個(gè)體系和葡聚糖固定。這個(gè)在分子成像定性或定量評(píng)估生物事件時(shí)，具有十分獨(dú)特的重要意義。如果沒(méi)有固定，在活體系統(tǒng)內(nèi)的這些結(jié)構(gòu)將迅速分散和分解。Antonia Red是一種熒光染料，最大激發(fā)波長(zhǎng)為583nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為602 nm, 與通用的Texas Red染料十分類(lèi)似（圖3）。Antonia Red(TM)標(biāo)記賴(lài)氨酸-葡聚糖很容易與生物分子結(jié)合，可使細(xì)胞保持“類(lèi)活體”。 Antonia Red具有明亮的熒光，擁有良好的光/化學(xué)穩(wěn)定性，對(duì)pH條件沒(méi)有依賴(lài)性。

圖3 尼康TE2000-U顯微鏡下的巨噬細(xì)胞RAW264.7圖示，來(lái)自Antonia Red標(biāo)記賴(lài)氨酸-葡聚糖(左)的信號(hào)優(yōu)于賴(lài)氨酸固定的Texas Red標(biāo)記葡聚糖(右)。Antonia Red-dextran具有較好的熒光信號(hào)，較少聚集，較少游離染料和良好的細(xì)胞吸收。

產(chǎn)品編號(hào)	品名	分子量(kDa)	包裝
ARLD4-50mg	Antonia Red™-lysine-dextran 4	4	50 mg
ARLD20-10mg	Antonia Red™-lysine-dextran 20	20	10 mg
ARLD20-50mg			50 mg
ARLD40-10mg	Antonia Red™-lysine-dextran 40	40	10 mg
ARLD40-50mg			50 mg
ARLD70-10mg	Antonia Red™-lysine-dextran 40	70	10 mg
ARLD70-50mg			50 mg
ARLD150-10mg	Antonia Red™-lysine-dextran 150	150	10 mg
ARLD150-50mg			50 mg

(a) Henley JR, Krueger EW, Oswald BJ, McNiven MA, J Cell Biol (1998) 141:85-99;

(b) Fritzsch B, Christensen MA, Nichols DH; J Neurobiol. 1993 Nov;24(11):1481-99;

(c) Fritzsch B., J Neurosci Methods (1993) 50:95-103

(d) Gustafsson, S. et al. Blood-brain barrier integrity in a mouse model of Alzheimer’s disease with or without acute 3D6 immunotherapy. Neuropharmacology 143, 1-9 (2018).

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