β-Amyloid ELISA 試劑盒 β-Amyloid ELISA kit

來源：作者：人氣：-發(fā)表時間：2024-12-13 15:10:00【大中小】

β-Amyloid ELISA 試劑盒

β-Amyloid ELISA kit

阿爾茨海默癥（Alzheimer's Disease, AD），俗稱老年癡呆癥，其特征是在大腦神經(jīng)細胞中存在老年斑（Senile Plaques，SPs）和神經(jīng)元纖維纏結(jié)（Neuro Fibrillary Tangles，NFT），老年斑的主要組成蛋白是 β- 淀粉樣多肽（Amyloid Peptide，Aβ）40 和 42（43），Aβ42 比 Aβ40 更容易發(fā)生聚集。因此，蛋白樣多肽的聚集開始于 Aβ42 而不是 Aβ40。出現(xiàn)了 Aβ42 而沒有出現(xiàn) Aβ40 是阿爾茨海默癥的早期特征；出現(xiàn)了 Aβ40，尤其是在成熟老年斑的中心部分出現(xiàn)則代表進入阿爾茨海默癥的晚期階段。

本產(chǎn)品可檢測與阿爾茨海默病相關(guān)的淀粉樣蛋白β 蛋白質(zhì)（1-40）以及淀粉樣蛋白β 蛋白質(zhì)（1-42）的高靈敏度 ELISA 試劑盒。與以往試劑盒相比較，檢測靈敏度提高約 10 倍，檢測范圍在 0.1~20.0（pmol/L）。

另外，因為以往產(chǎn)品同樣標(biāo)志抗體Fab’化，非特異性結(jié)合降低。由于運用的是武田藥品工業(yè)株式會社開發(fā)的特異性非常高的單克隆抗體，不僅是組織提取液、培養(yǎng)上清液、腦脊髓液，而且以前檢測較困難的血漿中 Aβ40 以及 Aβ42 亦可高靈敏度檢測。

◆特點

● 可檢測多種樣品類型：腦組織樣品，培養(yǎng)基上清樣品，腦脊髓液樣品，血漿樣品等

● 特異性極強的抗體，避免非特異性結(jié)合

BAN50：Ａβ肽Ｎ末端１-16 特異性

BNT77：Aβ11-28特異性

BA27：Aβ40 Ｃ末端特異性

BC05：Aβ42 Ｃ末端特異性

● 極高的靈敏度，可檢測至 pmol 級含量

● 使用此產(chǎn)品的文章已在 Science、Biochemistry、Neuron 等多家國際頂尖刊物發(fā)表

產(chǎn)品	Wako 產(chǎn)品	A 產(chǎn)品	對比優(yōu)勢
產(chǎn)品名稱	Human/Rat beta (40) ELISA Kit Wako	Human 40 ELISA Kit
檢測原理	夾心法 ELISA	夾心法 ELISA
使用的抗體	包被的抗體，HRP標(biāo)記的檢測抗體	包被的抗體，檢測抗體，HRP標(biāo)記的識別檢測抗體的抗體	Wako產(chǎn)品檢測需２個抗體，而A產(chǎn)品需３個抗體
檢測物種	人，小鼠，大鼠	人	Wako產(chǎn)品可檢測物種多于A產(chǎn)品
檢測范圍	1.0~100 pmol/L	<100 pmol/L
檢測靈敏度	0.25 pmol/L	1.25 pmol/L	Wako 產(chǎn)品靈敏度更高
檢測樣品	腦組織樣品，培養(yǎng)基上清樣品，腦脊髓液樣品，血漿樣品	培養(yǎng)基上清，組織勻漿液，腦脊髓液

◆檢測原理

試劑盒組成

抗體包被的微孔板	1 塊
標(biāo)準(zhǔn)溶液	2mL×2支
標(biāo)準(zhǔn)稀釋液	2 mL×2支
清洗液（20x）	50 mL×1支
HRP標(biāo)記抗體溶液	12 mL×1支
TMB溶液	12 mL×1支
終止液	12 mL×1支
密封件	3支

◆實驗流程

① 加入100 μL 的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品，在４度冰箱中密封過夜。

↓

② 加入 HRP 標(biāo)記的抗體溶液，在４度冰箱中孵育。

↓

③ 加入100 μL TMB 溶液室溫孵育 30 分鐘，避光，密封蓋子，進行顯色反應(yīng)。

↓

④ 加入100 μL 終止液，測 OD 450 nm值。

◆案例

案例1. 人、小鼠血漿的測定

使用 EDTA2K 真空采血管采血，置于 5000 g、4℃、離心15分鐘，分離血漿，使用之前存放于-80℃。

用試劑盒附帶的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液，４倍樣本稀釋后測定。

（*Aβ（1-40）以及Aβ（x-40）的測定使用人β淀粉樣蛋白（1-40）ELISA試劑盒 WakoⅡ（產(chǎn)品編號：298-64601）以及人/大鼠β淀粉樣蛋白（40）ELISA試劑盒 WakoⅡ（產(chǎn)品編號：294-64701）。

案例2. 小鼠腦組織的測定

用 2 mL 的 Tris 鹽水提取12月齡 APP 轉(zhuǎn)基因小鼠（J20）的腦半球，使用之前置于-20℃保存。

用試劑盒附帶的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液，２倍樣本稀釋后測定。

除了轉(zhuǎn)基因（tg）小鼠，也可測定野生型（wt）小鼠的微量 Aβ 。

（數(shù)據(jù)提供：東京大學(xué)大學(xué)院藥學(xué)研究科臨床藥學(xué)教室巖坪教授橋本助手）

標(biāo)準(zhǔn)曲線

用試劑盒附帶的標(biāo)準(zhǔn)溶液制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果顯示，在 0.1~20.0（pmol/L）范圍內(nèi)，接近于直線。

加標(biāo)回收測試

向血漿中分別加入５、10、20（pmol/L），４倍稀釋后記錄測定時的回收率（％）（測定值/理論值）。基本顯示較高的回收率。

稀釋實驗

將Ａ、Ｃ、Ｅ的正常人血漿稀釋２~16 倍后求稀釋曲線。結(jié)果顯示，特別是人/大鼠系列獲得了良好的稀釋曲線。

◆Aβ相關(guān)ELISA試劑盒選擇指南

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	抗體克隆編號		可檢測的Aβ								檢測范圍（pmol/L）
產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	捕獲	檢測	人Aβ (1-40)	人Aβ (1-42)	大鼠（小鼠） Aβ(1-40)	大鼠（小鼠） Aβ(1-42)	Aβ (x-40)^※1	Aβ (x-42)^※1	人Aβ 寡聚 (≦8 mer)	人Aβ 寡聚 (≧9 mer)	1.0-100
292-62301	人β淀粉樣蛋白(1-40)ELISA 試劑盒 Wako	BAN50	BA27(Fab')	+	-	-	-	-	-	※4	※4	1.0-100
298-64601	人β淀粉樣蛋白(1-40)ELISA 試劑盒 Wako II^※2	BAN50	BA27(F[ab']₂)	+	-	-	-	-	-	※4	※4	1.0-100
298-62401	人β淀粉樣蛋白(1-42)ELISA 試劑盒 Wako	BAN50	BC05(Fab')	-	+	-	-	-	-	※4	※4	1.0 - 100
296-64401	人β淀粉樣蛋白(1-42)ELISA 試劑盒Wako，高靈敏度	BAN50	BC05(Fab')	-	+	-	-	-	-	※4	※4	0.1- 20
294-62501	人/鼠β淀粉樣蛋白(40)ELISA 試劑盒Wako	BNT77	BA27(Fab')	+	-	+	-	+	-	※4	※4	1.0 - 100
294-64701	人/鼠β淀粉樣蛋白(40)ELISA 試劑盒Wako II^※3	BNT77	BA27(F[ab']₂)	+	-	+	-	+	-	※4	※4	1.0 - 100
290-62601	人/鼠β淀粉樣蛋白(42)ELISA 試劑盒 Wako	BNT77	BC05(Fab')	-	+	-	+	-	+	※4	※4	1.0 - 100
292-64501	人/鼠β淀粉樣蛋白(42)ELISA試劑盒Wako，高靈敏度	BNT77	BC05(Fab')	-	+	-	+	-	+	※4	※4	0.1 - 20
290-82001	高分子β淀粉樣蛋白寡聚體 ELISA試劑盒Wako Ver.2	BAN50	BAN50	-	-	-	-	-	-	-	+	0.16-40 (血漿·血清) ^※50.41-100 （腦脊液）^※5

※1 Aβ(x-40)、Aβ(x-42)為N末端被切斷或修飾的Aβ肽。

※2 與292-62301比較抗原抗體反應(yīng)相對穩(wěn)定

※3 與294-62501比較抗原抗體反應(yīng)相對穩(wěn)定

※4 未驗證

※5 換算為MAP16肽

◆適用樣品

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	腦脊液	腦組織提取液	血清	血漿	細胞培養(yǎng)上清
292-62301	人β淀粉樣蛋白(1-40)ELISA試劑盒Wako	+	+	+	+	+
298-64601	人β淀粉樣蛋白(1-40)ELISA試劑盒Wako II^※2	+	+	+	+	+
298-62401	人β淀粉樣蛋白(1-42)ELISA試劑盒Wako	+	+	+^※6	+	+
296-64401	人β淀粉樣蛋白(1-42)ELISA試劑盒Wako，高靈敏度	+	+	+^※6	+	+
294-62501	人/鼠β淀粉樣蛋白(40)ELISA試劑盒Wako	+	+	+	+	+
294-64701	人/鼠β淀粉樣蛋白(40)ELISA試劑盒Wako II^※3	+	+	+	+	+
290-62601	人/鼠β淀粉樣蛋白(42)ELISA試劑盒Wako	+	+	+^※6	+	+
292-64501	人/鼠β淀粉樣蛋白(42)ELISA試劑盒Wako，高靈敏度	+	+	+^※6	+	+
290-82001	高分子β淀粉樣蛋白寡聚體ELISA試劑盒Wako Ver.2	+	+	+	+	※4

※2 與292-62301比較抗原抗體反應(yīng)相對穩(wěn)定

※3 與294-62501比較抗原抗體反應(yīng)相對穩(wěn)定

※4 未驗證

※6 可檢測，但與血漿相比檢測數(shù)值容易隨時間降低

產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品等級
292-62301	Human β Amyloid(1-40) ELISA Kit Wako 人β 淀粉樣蛋白(1-40)ELISA試劑盒 Wako	96 tests	for Immunochemistry
298-62401	Human β Amyloid(1-42) ELISA Kit Wako 人 β淀粉樣蛋白(1-42)ELISA試劑盒 Wako	96 tests	for Immunochemistry
296-64401	Human β Amyloid(1-42) ELISA Kit Wako, High Sensitive 人 β淀粉樣蛋白(1-42)ELISA試劑盒 Wako ，高靈敏度	96 tests	for Immunochemistry
298-64601	Human β Amyloid(1-40)ELISA Kit Wako Ⅱ 人 β淀粉樣蛋白(1-40)ELISA試劑盒Wako II	96 tests	for Immunochemistry
294-62501	Human/Rat β Amyloid(40)ELISA Kit Wako 人/ β淀粉樣蛋白(40)ELISA試劑盒 Wako	96 tests	for Immunochemistry
290-62601	Human/Rat β Amyloid(42)ELISA Kit Wako 人/鼠β淀粉樣蛋白(42)ELISA試劑盒 Wako	96 tests	for Immunochemistry
292-64501	Human/Rat β Amyloid(42) ELISA Kit Wako, High Sensitive 人/鼠β淀粉樣蛋白(42)ELISA試劑盒 Wako ，高靈敏度	96 tests	for Immunochemistry
294-64701	Human/Rat β Amyloid(40) ELISA Kit Wako II 人/鼠β淀粉樣蛋白(40)ELISA試劑盒Wako II	96 tests	for Immunochemistry
290-82001	High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2 高分子β淀粉樣蛋白寡聚體ELISA試劑盒Wako Ver.2	96 tests	for Immunochemistry