讓IPSCs也瘋狂的雞尾酒CEPT Cocktail

來(lái)源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2023-09-19 15:39:00【大中小】

CEPT是美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院（NIH）開(kāi)發(fā)的小分子混合物。由4種成分組成，并取其組成成分（Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB）的開(kāi)頭字母命名為“CEPT”。

研究表明，CEPT可防止人ES/iPS細(xì)胞（人多能干細(xì)胞；hPSCs）在細(xì)胞傳代中的細(xì)胞應(yīng)激和DNA損傷。與強(qiáng)效ROCK抑制劑Y-27632相似，可提高細(xì)胞傳代和凍存時(shí)hPSCs的存活率。

此外，與基于hPSCs的胚狀體和類(lèi)器官形成、單細(xì)胞克隆和基因編輯等干細(xì)胞研究中所用的現(xiàn)有培養(yǎng)方法相比，CEPT還可改善細(xì)胞存活率。

FUJIFILMWako已上線(xiàn)經(jīng)無(wú)菌測(cè)試且無(wú)需制備的即用型CEPT Cocktail溶液。本產(chǎn)品為經(jīng)過(guò)濾器滅菌的溶液，可直接添加至培養(yǎng)基使用。有助于再生醫(yī)療研究。

◆ 特點(diǎn)

◆ 測(cè)試項(xiàng)目

◆ 使用方法

以1/1,000的量添加本品至培養(yǎng)基，充分混合后使用。

※使用注意

（沉淀于37°C下靜置1~2 h可能會(huì)溶解，請(qǐng)避免反復(fù)冷凍和加熱。）

◆ 適用范圍

樣品：人ES/iPS細(xì)胞
應(yīng)用：

◆ 性能數(shù)據(jù)

添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®hPSCΔ培養(yǎng)基，在37°C，5% CO2的條件下培養(yǎng)人iPS細(xì)胞201B7株（6孔板 1 well=9.5cm2）。

培養(yǎng)經(jīng)過(guò)16 h以后，更換不含CEPT或Y-27632的培養(yǎng)基，每2-3天更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。

培養(yǎng)第8天時(shí)，確認(rèn)細(xì)胞后，使用4%多聚甲醛固定細(xì)胞，ALP染色后，計(jì)數(shù)細(xì)胞集落。

單細(xì)胞克隆測(cè)試

添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®hPSCΔ培養(yǎng)基，在37°C，5% CO2的條件下培養(yǎng)人iPS細(xì)胞201B7株（96孔板）。

培養(yǎng)經(jīng)過(guò)16 h以后，更換不含CEPT或Y-27632的培養(yǎng)基，每2~3天更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。

培養(yǎng)第13天時(shí)，確認(rèn)細(xì)胞后，使用4%多聚甲醛固定細(xì)胞，ALP染色后，計(jì)數(shù)形成細(xì)胞集落的孔數(shù)與空孔數(shù)。

通過(guò)所有孔數(shù)與細(xì)胞集落形成孔數(shù)之比，計(jì)算細(xì)胞集落形成率。

【結(jié)果】

細(xì)胞接種數(shù)少時(shí)，添加CEPT的組比添加Y-27632的組形成的細(xì)胞集落更多。

未分化人iPS細(xì)胞的維持確認(rèn)

【細(xì)胞株】人iPS細(xì)胞201B7株

【培養(yǎng)基】StemSure®hPSC培養(yǎng)基Δ+35ng/mL bFGF

Red: rBC2LCN-635（人iPS細(xì)胞膜染色）

Blue:DAPI (細(xì)胞核染色)

※BC2LCN是一種對(duì)存在與人ES/iPS細(xì)胞的膜表面的糖鏈具有高親和性的重組凝集素

添加CEPT時(shí)

添加Y-27632時(shí)

【結(jié)果】

添加CEPT時(shí)與添加Y-27632時(shí)都未觀察到細(xì)胞形態(tài)的差異，均可確認(rèn)未分化維持狀態(tài)。

◆ 產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱(chēng)	產(chǎn)品等級(jí)	產(chǎn)品規(guī)格
033-26071	CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×) CultureSure™ CEPT混合物（1,000×）	細(xì)胞培養(yǎng)用	300 μL

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱(chēng)	產(chǎn)品等級(jí)	產(chǎn)品規(guī)格
197-17571	StemSure®hPSC Medium Δ StemSure®人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基	細(xì)胞培養(yǎng)用	100 mL
193-17573	StemSure®hPSC Medium Δ StemSure®人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基	細(xì)胞培養(yǎng)用	100 mL×4
062-06661	bFGF Solution, MF 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子溶液（堿性）	細(xì)胞培養(yǎng)用	50 μL
068-06663	bFGF Solution, MF 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子溶液（堿性）	細(xì)胞培養(yǎng)用	50 μL×4
195-16031	StemSure®Freezing Medium StemSure®細(xì)胞凍存液	細(xì)胞培養(yǎng)用	100 mL
192-19081	StemSure®hPSC Remover (rBC2LCN-PE38 ) StemSure®hPSC未分化干細(xì)胞清除劑	細(xì)胞培養(yǎng)用	100 μL
035-24593	CultureSure®10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free CultureSure®10mmol/l Y-27632 溶液，無(wú)動(dòng)物源	細(xì)胞培養(yǎng)用	1 mL
039-24591		細(xì)胞培養(yǎng)用	300 μL
259-00613	Y-27632, MF 選擇性強(qiáng)效ROCK抑制劑	細(xì)胞培養(yǎng)用	5 mg
257-00614	Y-27632, MF 選擇性強(qiáng)效ROCK抑制劑	細(xì)胞培養(yǎng)用	25 mg
030-24021	CultureSure®Y-27632 CultureSure®Y-27632（選擇性ROCK抑制劑）	細(xì)胞培養(yǎng)用	1 mg
036-24023			5 mg
034-24024			25 mg
030-24026			100 mg