LBIS(R) 胰高血糖素樣肽-1（GLP-1)（活性） ELISA 試劑盒

來源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2024-08-22 09:49:00【大中小】

LBIS® GLP-1(active) ELISA KIT

LBIS® 胰高血糖素樣肽-1（GLP-1)（活性） ELISA 試劑盒

胰高血糖素樣肽-1（Glucagon-like peptide-1，GLP-1）是胰高血糖素前驅(qū)體的一部分。胰高血糖素前驅(qū)體于胰臟、小腸下部以及下丘腦中表達(dá)。該前驅(qū)體的構(gòu)造中含有與糖代謝有關(guān)的各種各樣的生理活性物質(zhì)（胰高血糖素，腸高血糖素，胃泌酸調(diào)節(jié)素，GLP-1，GLP-2）的氨基酸序列。根據(jù)表達(dá)部位加工酶的特異性，胰臟主要分泌胰高血糖素，而小腸下部主要分泌腸高血糖素和胃泌酸調(diào)節(jié)素。GLP-1 和 GLP-2 則存在于胰高血糖素前驅(qū)體后半的結(jié)構(gòu)中。GLP-1由37個(gè)氨基酸組成，有２種生物活性形式，分別為 GLP-1（7-37）和GLP-1（7-36）酰胺。兩者都存在于小腸下部、胰臟和下丘腦中，GLP-1（7-36）酰胺在下丘腦中占免疫反應(yīng) GLP-1（IR-GLP-1）總量的 55-94%，在小腸中占 27-73%。但在胰臟中只有極少量存在。大部分哺乳類（如人類、大鼠、小鼠、牛、豬、狗等）的 GLP-1 結(jié)構(gòu)相似。

GLP-1: hdeferhaegtftsdvssylegqaakefiawlvkgrg

GLP 1(7-37): haegtftsdvssylegqaakefiawlvkgrg

GLP 1(7-36) amide: haegtftsdvssylegqaakefiawlvkgr-NH2

GLP-1 與小腸上部分泌的 GIP 統(tǒng)稱為腸促胰素。該類激素是葡萄糖濃度依賴性方式促進(jìn)胰島素分泌。同時(shí)具有抑制胃腸道蠕動(dòng)和胃液分泌、抑制胰高血糖素的釋放、促進(jìn)生長(zhǎng)抑素的分泌、使食欲減退，促進(jìn)腸上皮細(xì)胞生長(zhǎng)、以及外周組織促進(jìn)非胰島素依賴性的葡萄糖的消耗，并促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)的作用。有報(bào)告指出該類激素與垂體激素的分泌也有關(guān)系。

GLP-1（7-36）酰胺在生物體內(nèi)代謝迅速，DPP-IV（dipeptidyl peptidase IV）會(huì)使其失去N-末端的兩個(gè)氨基酸變?yōu)?GLP-1（9-36）酰胺，GLP-1（7-37）變?yōu)?GLP-1（9-37）后會(huì)失去活性。有報(bào)告指出，體外實(shí)驗(yàn)中，在犬的血漿中 GLP-1（7-36）酰胺的半衰期是為 61±9 分，GLP-1（7-37）為 132±16 分。因此 GLP-1 的測(cè)定，取樣的時(shí)候有必要使用 DPP-IV 抑制劑。

此外，腸促胰素中的 GIP 則是有力促進(jìn) GLP-1 分泌的激素。回腸中 GLP-1 的分泌不是食物直接刺激腸道而產(chǎn)生的，而是由于膽堿能和肽類的刺激所產(chǎn)生的。

◆特點(diǎn)

●　短時(shí)間測(cè)定（完全反應(yīng)時(shí)間：５小時(shí)）

●　微量樣品（標(biāo)準(zhǔn)操作用量：10 μL）可測(cè)

●　使用對(duì)環(huán)境無害的防腐劑

●　全部試劑均為液體，可直接使用

●　精密的測(cè)定精度和高再現(xiàn)性

構(gòu)成

組成	狀態(tài)	容量
(A) 抗體固相化 96 孔板	洗凈后使用	96 wells（8×12）/1 塊
(B) GLP-1標(biāo)準(zhǔn)溶液（500 pg/mL）	稀釋后使用	200 μL/1 瓶
(C) 緩沖液	即用	60 mL/1 瓶
(D)生物素結(jié)合抗GLP-1抗體	稀釋后使用	100 μL/1 瓶
(E) 過氧化物?抗生物素蛋白結(jié)合物	稀釋后使用	100 μL/1 瓶
(F) 顯色液（TMB）	即用	12 mL/1 瓶
(H) 反應(yīng)終止液（1M H2SO4）※小心輕放	即用	12 mL/1 瓶
( I ) 濃縮洗凈液（10×）	稀釋后使用	100 mL/1 瓶
封板膜		4 張
使用說明書		1 份

◆交叉反應(yīng)性

※交差率是 1,000 pg/mL 濃度時(shí)的數(shù)據(jù)

動(dòng)物類型	對(duì)象物質(zhì)	反應(yīng)性和反應(yīng)率（％）
Mouse/Rat	GLP-1(7-36)amide	100
	GLP-1(7-37)	< 0.1
	GLP-1(1-37)	―
	GLP-1(9-36)amide	―
	GLP-2	―
	Glucagon(1-29)	―
	Insulin	―
	Secretin	―
	GIP	―
	VIP	―
	GRF	―
Bovine	Glucagon(1-29)	―
Bovine	VIP	―
Porcine	Glucagon(1-29)	―
Porcine	VIP	―

―：不存在交叉反應(yīng)

◆樣品信息

小鼠和大鼠的血清及血漿

10 μL/well（標(biāo)準(zhǔn)操作方法）

※測(cè)量中由于酶（DPP-IV 等）的影響，采血時(shí)請(qǐng)注意防止 GLP-1（7-36）酰胺的分解，再使用。

◆檢測(cè)范圍

1.56～50.0 pg/mL 【0.47～15.16 pmol/L(分子量3298）】（標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍）

7.8～250 pg/mL（樣品量 10 μL）

3.9～125 pg/mL（樣品量 20 μL）

◆Validation data

精度測(cè)試（組內(nèi)變異）

樣品	A	B
1	23.7	6.44
2	23.2	5.97
3	23.4	6.39
4	24.0	5.87
5	24.1	6.44
mean	23.7	6.22
SD	0.35	0.28
CV(%)	1.5	4.5

單位：ng/mL

重復(fù)性測(cè)試（組間變異）

測(cè)量日/樣品	E	F
第０天	25.1	6.31
第１天	25.1	6.16
第２天	25.0	6.24
第３天	25.0	6.37
mean	25.0	6.27
SD	0.03	0.09
CV(%)	0.13	1.4

單位：ng/mL n=4

加標(biāo)回收測(cè)試

樣品 C

添加量	實(shí)測(cè)值	回收量	回收率(%)
0.00	3.93	–	–
3.26	7.28	3.35	103
6.51	10.3	6.37	97.8
8.14	12.1	8.17	100

樣品 D

添加量	實(shí)測(cè)值	回收量	回收率(%)
0.00	11.8	–	–
7.16	19.1	7.30	102
14.3	25.5	13.7	95.8
21.5	32.4	20.6	95.8

◆稀釋直線性測(cè)試

用稀釋緩沖液分三次連續(xù)稀釋2個(gè)血清樣品的結(jié)果，直線回歸方程的R2在0.997~0.9999之間。

◆產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
637-15129	（AKMAN-011） LBIS® GLP-1(Active) ELISA Kit LBIS® 胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）（活性） ELISA試劑盒	96 tests