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重組蛋白純化檢測用 TARGET標簽系統

來源：作者：人氣：-發表時間：2025-04-16 12:34:00【大中小】

重組蛋白純化檢測用

TARGET標簽系統

◆特點

●　通過樹脂再生，降低運作成本

●　溫和洗脫、清洗，實現高純度

●　在動物細胞表達系（HEK293T細胞、CHO細胞等）中有效純化蛋白

TARGER標簽系統使用的是可識別肽標簽（21個氨基酸殘基）的單抗（P20.1），是日本開發的親和純化標簽系統。

TARGET標簽系統實踐證明，即使在傳統系統都難以進行高純度蛋白純化的動物細胞表達系中，也可有效地進行親和純化。

◆TARGET標簽系統

A rapid screening method for cell lines producing singly-tagged recombinant proteins using the“ TARGET tag”system. Tabata S. et al., J. Proteomics, 2010 Aug 5;73(9):1777-85.

◆TARGET 標簽表達載體示意圖

產品選擇

載體	表達模式	宿主細胞	MCS啟動子
pEBMulti	非整合型穩定表達	靈長類（人、猴）、狗細胞等貼壁細胞	CAG
pCAG	瞬時表達	靈長類（人、猴）、狗細胞等貼壁細胞、大/小鼠等動物細胞	CAG

富士膠片和光還推出除上述抗性基因載體外的其他載體。（請點擊查看）

測序用引物序列、其他載體序列的相關詳細信息，已附在產品隨貨說明書中。

另外可點擊富士膠片和光主頁/TARGET標簽，查看序列信息、多克隆位點(MCS)信息。

TARGET標簽融合蛋白的免疫沉淀

通過Transient 載體，

表達TARGET標簽融合重組蛋白

培養上清（培養第7天）

每10 mL中，分別添加0.1 mL（net 0.05 mL）的抗體磁珠（①抗TARGET標簽抗體瓊脂糖珠、②抗DYKDDDDK標簽抗體瓊脂糖珠，其他公司產品），4℃條件下，進行2小時免疫沉淀。

清洗后，在回收的各珠中分別添加0.5 mL 0.2 mg/mL

TARGET標簽肽/TBS和0.2 mg/mL DYKDDDDK肽/TBS，4℃條件下，平穩震動0.5小時。離心后回收上清。

再分別在各珠中添加0.5 mL 0.1 M Glycine-HCl (pH 2.7)，室溫下，平穩震動5分鐘。離心后，回收上清并用1M Tris-HCl (pH 9.0)中和。

上圖為SDS-PAGE處理后的銀染結果。

與傳統DYKDDDDK tag相比，背景更低

→高純度！

　M：M.W. Marker

　1.僅轉染載體的培養上清

　2.轉染了蛋白Y-TARGET 標簽表達質粒的細胞培養上清

　3.轉染了TARGET標簽-蛋白Y 表達質粒的細胞培養上清

　　也可使用市售的Transient載體

確認非整合型載體TARGET tag C端融合重組蛋白的表達

利用可編碼表達人源生理活性蛋白基因的質粒轉染 HEK293N 細胞后，從初期細胞數 3×10⁵cells/mL 開始培養，回收 0/3/7 日的培養上清。用 20 μL/lane 的培養上清進行 SDS-PAGE 處理，通過銀染和 Western blotting，檢測出蛋白的表達。
可確認到與市面售賣的 Tag 系統有相同的表達量和檢測靈敏度。

◆TARGET 標簽系列

產品名稱	子類克隆號		適用實驗	規格	產品編號	包裝
單抗
抗TARGET標簽，單抗 Anti TARGET tag，Monoclonal Antibody		小鼠 IgG₁ P20.1	IP, WB	免疫化學用	016-25481	200 μg
					012-25483	1 mg
HRP標簽單抗
抗 TARGET tag，單抗，過氧化酶結合 Anti TARGET tag, Monoclonal Antibody (P20.1) Peroxidase conjugated		小鼠 IgG₁ P20.1	WB	免疫化學用	015-25571	200 μL
					011-25573	1 mL

產品名稱	子類克隆號	規格	產品編號	包裝
抗體結合瓊脂糖珠
抗 TARGET 標簽抗體瓊脂糖珠 Anti TARGET tag Antibody Beads	小鼠 IgG₁ P20.1	免疫化學用	018-25561	2 mL (Net 1 mL)
			014-25563	10 mL (Net 5 mL)
			012-25564	50 mL (Net 25 mL)
識別 N 端、C 端的 TARGET 標簽使用載體：4% 瓊脂糖溶液組成：1×TBS (pH 7.5)，0.05 w/v%疊氮化鈉抗體結合量：2.0 mg/mL 結合容量：1 mL 本品可結合約 0.1-1.0 mg 的 TARGET 標簽融合蛋白

產品名稱	備注	規格	產品編號	包裝
肽
TARGET標簽肽 TARGET tag Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	200-19673	5 mg
TARGET標簽肽 TARGET tag Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	208-19674	25 mg
清洗液
TARGET標簽清洗液 TARGET tag Washing Solution	已過濾消毒即用型	基因研究用	208-19831	50 mL

產品名稱	可選 Marker		產品編號	包裝
	大腸桿菌	動物細胞
瞬時表達載體
C端插入TARGET標簽的pCAG-Ble載體 pCAG-Ble TARGET tag-C	博萊霉素		165-26381	20 μg
N端插入TARGET標簽的pCAG-Ble載體 pCAG-Ble TARGET tag-N	博萊霉素		162-26391	20 μg
C端插入TARGET標簽的pCAG-Bsd載體 pCAG-Bsd TARGET tag-C	殺稻瘟素S		165-26401	20 μg
N端插入TARGET標簽的pCAG-Bsd載體 pCAG-Bsd TARGET tag-N	殺稻瘟素S		162-26411	20 μg
C端插入TARGET標簽的pCAG-Hyg載體 pCAG-Hyg TARGET tag-C	潮霉素B		169-26421	20 μg
N端插入TARGET標簽的pCAG-Hyg載體 pCAG-Hyg TARGET tag-N	潮霉素B		166-26431	20 μg
C端插入TARGET標簽的pCAG-Neo載體 pCAG-Neo TARGET tag-C	卡那霉素	G418	163-26441	20 μg
N端插入TARGET標簽的pCAG-Neo載體 pCAG-Neo TARGET tag-N	卡那霉素	G418	160-26451	20 μg
游離載體
C段插入TARGET標簽的pEBMulti-Ble載體 pEBMulti-Ble TARGET tag-C	博來霉素		167-26461	20 μg
N段插入TARGET標簽的pEBMulti-Ble載體 pEBMulti-Ble TARGET tag-N	博來霉素		164-26471	20 μg
C段插入TARGET標簽的pEBMulti-Bsd載體 pEBMulti-Bsd TARGET tag-C	殺稻瘟素S		161-26481	20 μg
N段插入TARGET標簽的pEBMultI-Bsd載體 pEBMulti-Bsd TARGET tag-N	殺稻瘟素S		168-26491	20 μg
C段插入TARGET標簽的pEBMulti-Hyg載體 pEBMulti-Hyg TARGET tag-C	潮霉素B		161-26501	20 μg
N段插入TARGET標簽的pEBMulti-Hyg載體 pEBMulti-Hyg TARGET tag-N	潮霉素B		168-26511	20 μg
C段插入TARGET標簽的pEBMulti-Neo載體 pEBMulti-Neo TARGET tag-C	卡那霉素	G418	165-26521	20 μg
N段插入TARGET標簽的pEBMulti-Neo載體 pEBMulti-Neo TARGET tag-N	卡那霉素	G418	162-26531	20 μg
C段插入TARGET標簽的pEBMulti-Puro載體 pEBMulti-Puro TARGET tag-C	氨芐青霉素	嘌呤霉素	169-26541	20 μg
N段插入TARGET標簽的pEBMulti-Puro載體 pEBMulti-Puro TARGET tag-N	氨芐青霉素	嘌呤霉素	166-26551	20 μg

◆相關產品

內參照

下表為 Western Blot 實驗中參照用單抗一覽表。

產品名稱	規格	產品編號	包裝
抗β肌動蛋白單抗 Anti β-Actin，Monoclonal Antibody	免疫化學用	013-24553	200 μg
		011-24554	1 mg
		017-24556	5 mg
抗β肌動蛋白單抗,過氧化物酶標記 Anti β-Actin，Monoclonal Antibody，Peroxidase Conjugated	免疫化學用	017-24573	200 μL
抗α-微管蛋白，單抗 Anti α-Tubulin，Monoclonal Antibody	免疫化學用	011-25034	10 μg
		017-25031	200 μg
		013-25033	1 mg
Anti β-Tubulin，Monoclonal Antibody 抗β-微管蛋白，單抗	免疫化學用	018-25044	10 μg
		014-25041	200 μg
		010-25043	1 mg
Anti GAPDH，Monoclonal Antibody 抗GAPDH，單抗	免疫化學用	016-25523	200 μg
		014-25524	1 mg
		010-25526	5 mg
Anti GAPDH，Monoclonal Antibody，Peroxidase Conjugated 抗GAPDH，單抗，過氧化酶結合	免疫化學用	015-25473	200 μL

蛋白酶抑制劑系列

產品名稱	規格	產品編號	包裝
蛋白酶抑制劑混合物試劑盒 I，無動物源成分（通用型） Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized	通用型	165-26021	1 mL用
	通用型	161-26023	1 mL用×5
蛋白酶抑制劑混合物試劑盒III, DMSO溶液（不含EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution (EDTA free) (×100)	動物細胞	163-26061	1 mL
	動物細胞	169-26063	1 mL×5
蛋白酶抑制劑混合物試劑盒V （無EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized	2D電泳	162-26031	1 mL
	2D電泳	168-26033	1 mL×5
蛋白酶抑制劑混合物試劑盒 VI，DMSO溶液，用于植物（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)	植物細胞	164-26091	1 mL
	植物細胞	160-26093	1 mL×5
蛋白酶抑制劑混合物試劑盒VII，DMSO溶液，組氨酸標簽蛋白（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution (for Histidine-tagged Protein) (×100)	His Tag 純化^※	167-26101	1 mL
	His Tag 純化^※	163-26103	1 mL×5