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抗微管蛋白(甘氨酰化),多克隆抗體(Gly-pep1)

來源:作者:人氣:-發表時間:2025-06-23 13:10:00【
抗微管蛋白(甘氨酰化),多克隆抗體(Gly-pep1)
anti-Tubulin (glycylated), pAb (Gly-pep1)
產品編號 產品名稱 包裝
AG-25B-0034-C100 抗微管蛋白(甘氨酰化),多克隆抗體(Gly-pep1)
    anti-Tubulin (glycylated), pAb (Gly-pep1)
100 μg
◆產品規格
產品詳情
產品類別   多克隆抗體
來源/宿主   兔
免疫原/抗原
  對應于人微管蛋白β-2A鏈的D431EQGEFE(G-COOH*)EEEG441-NH2
 (*從谷氨酸的γ-羧基分支的甘氨酸作為異肽鍵)的合成肽。
應用   Western Blot: (1:10,000)
  免疫組化: (1:5,000)
  免疫共沉淀: (1:200)
交叉反應   狗
  人
  小鼠
特異性
  該抗體識別單糖或雙糖化微管蛋白。培養細胞中的甘氨酰酶(TTLL3和TTLL8)的活性主要
  導致α-和β-微管蛋白的修飾,但也導致其他尚未鑒定的蛋白質底物被抗體Gly-pep1檢測
  到。在免疫熒光標記中,該抗體強烈標記甘氨酰化微管(Gadadhar等,2017)。
純度   ≥95% (SDS-PAGE)
純化詳情   表位親和純化
濃度   1 mg/mL
規格   液體。在含有0.02%疊氮化鈉的PBS中保存。
Accession Number   Q13885
運輸及儲存
運輸   藍冰
短期存儲   +4°C
長期存儲   -20°C
儲存建議   重新配制后,建議分裝并儲存于-20°C。
  避免反復凍融。
使用/穩定性   收到產品后可在-20℃穩定保存至少6個月。
◆產品描述
微管是在所有真核細胞中都能發現的關鍵細胞骨架元件。一般認為是通過“微管蛋白密碼”調控機制來生成不同特性的微管,從而使微管能實現多種不同功能。標記微管的一種機制是通過各種各樣的微管蛋白翻譯后修飾(PTM)。其中一種修飾方式是甘氨酰化,通過將二級甘氨酸鏈(支鏈)添加到蛋白質的主肽鏈產生。這些支鏈的長度可以從一個到二十個以上的甘氨酸殘基不等。甘氨酰化由來自微管蛋白酪氨酸連接酶樣(TTLL)家族的酶TTLL3,TTLL8和TTLL10催化。尤其是TTLL3和TTLL8對于甘氨酰化起始是必需的,因為它們產生初始的甘氨酸鏈。
Gly-pep1抗體是通過模擬β2-微管蛋白(TUBB2A)在E437位點上帶有單甘氨酸鏈的多肽而制備的抗體。本抗體可以特異性地檢測甘氨酰化的微管蛋白,以及在細胞以及組織中的其他未知的甘氨酰化底物。因微管的甘氨酰化主要在纖毛和鞭毛中發生,Gly-pep1還可以標記能動的纖毛以及原纖毛(Gadadhar等,2017)。
◆參考文獻
Tubulin glycylation controls primary cilia length: S. Gadadhar, et al.; J. Cell Biol. (Article in press) (2017)
◆實驗數據
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使用抗微管蛋白(甘氨酰化),多克隆抗體(Gly-pep1)(產品編號AG-25B-0034)進行蛋白質甘氨酰化的免疫印跡分析。實驗方法:在標準條件下培養HEK-293T細胞,轉染表達甘氨酰酶TTLL3和TTLL8的質粒,并在10%SDS-PAGE上進行電泳。使用小鼠睪丸的裂解液作為甘氨酰化微管蛋白的陽性對照。將蛋白轉至NC膜并進行免疫印跡檢測,以抗微管蛋白(甘氨酰化)多克隆抗體(Gly-pep1)(1:20,000)在含0.1%Tween-20的TBS(TBS-T)中進行洗滌,在含2.5%脫脂牛奶的TBS-T中進行抗體孵育。在未轉染的HEK-293T細胞提取物中,即使在高度曝光下也檢測不到微管蛋白。在TTLL3甘氨酰酶表達后,主要是β-微管蛋白被Gly-pep1檢測出來,同時,TTLL8表達產生了Gly-pep1陽性的 α-微管蛋白以及其他尚未鑒定的底物。睪丸裂解液也含有不同甘氨酰化蛋白的異質混合物,包括α和β-微管蛋白。圖片由巴黎居里研究所的Sudarshan Gadadhar和Carsten Janke提供。
2.png
使用抗微管蛋白(甘氨酰化)多克隆抗體(Gly-pep1)(產品編號AG-25B-0034)對多纖毛室管膜細胞和帶有初級纖毛的細胞進行免疫熒光染色。 實驗方法:從新生野生型小鼠分離的放射狀神經膠質細胞和血清饑餓誘導MDCK細胞系的纖毛發生。用微管穩定化方法固定細胞并用抗微管蛋白(甘氨酰化)多克隆抗體(Gly-pep1)(1:5,000;紅色),抗α-微管蛋白(乙酰化)多克隆抗體(TEU318)(AG-20B -0068)(綠色)和DAPI(藍色)染色。在纖毛上觀察到Gly-pep1特異性染色。圖片由巴黎居里研究所的Sudarshan Gadadhar和Carsten Janke提供。
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※ 本頁面產品僅供研究用,研究以外不可使用。

 

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