Ludger唾液酸-- NeuAc（唾液酸）和NeuGc（神經(jīng)氨酸）的定量分析

來源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2018-10-25 13:30:00【大中小】

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眾所周知，唾液酸是糖鏈的重要組成成分，是維持EPO體內(nèi)生物效應(yīng)所必需的。唾液酸含量影響凈負(fù)電荷從而改善了糖蛋白藥物(如促紅細(xì)胞生成素EPO)的代謝動力學(xué),糖基化對穩(wěn)定EPO的體內(nèi)活性具有重要作用，若缺乏糖鏈，則EPO在體內(nèi)迅速被水解而失活.

西寶生物作為Ludger官方代理，為您提供專業(yè)的唾液酸分析服務(wù)！咨詢熱線：400-021-8158

NeuAc（唾液酸）和NeuGc（神經(jīng)氨酸）的定量分析是監(jiān)管機(jī)構(gòu)在生物制藥表征的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格指南中提出的一個(gè)要求。特別是，人類和非人類的唾液酸 (NeuAc / NANA和NeuGc / NGNA分別)相對水平測定是很重要的，因?yàn)橛行┎∪擞懈咚降目股窠?jīng)氨酸（anti-NeuGc）抗體，這可導(dǎo)致中和反應(yīng)和快速清除含有神經(jīng)氨酸（NeuGc）的生物藥品 (Nguyen等,2005)。由于唾液酸（NeuAc）和神經(jīng)氨酸（NeuGc）在分析糖蛋白中具有重要意義，它通常被認(rèn)為是生物治療藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性(CQA)。
較廣泛的唾液酸（NeuAc）和神經(jīng)氨酸（NeuGc）比例確定方法是如下：

• 通過輕度酸水解放糖蛋白上的唾液酸殘基。

• 用1-1,2 - 二氨基-4,5 - 亞甲基苯酚（DMB）熒光標(biāo)記釋放的唾液酸。

• 通過高效液相色譜法（HPLC）或超高效液相色譜法（UHPLC）對DMB標(biāo)記的唾液酸進(jìn)行相對定量分析。

Ludger的DMB標(biāo)記試劑盒（貨號：LT-KDMB-A1），提供從糖蛋白釋放唾液酸并用DMB標(biāo)記的所有功能。該試劑盒包含可以檢測高達(dá)22個(gè)糖蛋白樣品（每樣品含50-100 μg糖蛋白）的試劑和材料。每個(gè)標(biāo)記可標(biāo)記每個(gè)樣品中大約10 pmol到2.5 nmol的唾液酸。

試劑盒中包含一系列唾液酸的參考標(biāo)準(zhǔn)品(含Neu5Ac，Neu5Gc，Neu5，7Ac2，Neu5，Gc9Ac，Neu5，9Ac2，Neu 5,7,(8)，9Ac3Gc)，以及NeuAc和NeuGc的定量標(biāo)準(zhǔn)品。這三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品可以隨著釋放的唾液酸樣品進(jìn)行DMB標(biāo)記。

系列稀釋液制備后的NeuAc和NeuGc定量標(biāo)準(zhǔn)品可用于定量分析。LudgerTag™DMB試劑盒中有提供關(guān)于如何制備的說明。如有需要NeuAc和NeuGc定量標(biāo)準(zhǔn)品也可在另行購買，請跟我們聯(lián)系。

作為陽性對照，我們建議使用包含NeuAc和NeuGc唾液酸的胎球糖蛋白，我們同樣建議使用最純化的LudgerBioQuant^TM糖肽標(biāo)準(zhǔn)品來作為陽性對照。這個(gè)糖肽標(biāo)準(zhǔn)品（貨號: BQ-GPEP-A2G2S2-10U）是一個(gè)復(fù)雜的N-連接雙觸角聚糖，終止于兩個(gè)N-乙酰神經(jīng)氨酸。

使用此標(biāo)準(zhǔn)品可以檢查聚糖釋放、標(biāo)記和回收的有效性，并可增強(qiáng)您的唾液酸測量準(zhǔn)確性。Ludger還銷售可用于識別Neu5，9Ac2的標(biāo)準(zhǔn)品。水可以作陰性對照。

圖1：由LS-UR2 UHPLC色譜柱（貨號LS-UR2-2.1x100）分析出來的DMB-標(biāo)記唾液酸對照品。

為了檢測聚糖的分離該對照品也可以作為跑樣之前的系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)品。

唾液酸分析相關(guān)產(chǎn)品		咨詢/訂購熱線：400-021-8158
商品型號	英文品名	中文品名	包裝
LT-KDMB-A1	DMB Sialic Acid Labeling Kit	DMB 唾液酸釋放標(biāo)記試劑盒	1Reaction Set
LS-R1-4.6x150	Ludger Sep R1 HPLC Column	R1 HPLC 色譜柱-唾液酸	4.6 x150 mm
LS-UR2-2.1x100	Ludger Sep UR2 UHPLC Column–sialic acids	UR2 UHPLC 色譜柱-唾液酸	2.1 x 100 mm
CM-NEU-AC-01	N-acetylneuraminic acid quantitative standard	N-乙酰神經(jīng)氨酸定量標(biāo)準(zhǔn)品	1 nmol
CM-NEU-GC-01	N-glycolyneuraminic acid quantitative standard	N-羥乙酰神經(jīng)氨酸定量標(biāo)準(zhǔn)品	1 nmol
CM-NEU5,9,AC-01	N-acetylneuraminic acid qualitative standard	N-乙酰神經(jīng)氨酸定性標(biāo)準(zhǔn)品	1 nmol
BQ-GPEP-A2G2S2	A2G2S2 glycopeptide standard	A2G2S2 糖肽標(biāo)準(zhǔn)品（用于唾液酸釋放和標(biāo)記過程）	10 μg
GCP-FET-50U-X4	Fetuin Glycoprotein (4 x 50 ug)	胎球糖蛋白（4×50微克）（唾液酸化陽性對照）	4 x 50 μg

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我們的優(yōu)勢：

1、擁有強(qiáng)大的研發(fā)技術(shù)團(tuán)隊(duì)
西寶生物技術(shù)力量雄厚，研發(fā)技術(shù)成熟，技術(shù)人員均為領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人才，并與國內(nèi)著名大學(xué)、研發(fā)機(jī)構(gòu)合作。
2、完善的售后技術(shù)服務(wù)
公司專門設(shè)立了優(yōu)質(zhì)完善的客戶服務(wù)中心，可在第一時(shí)間解決客戶技術(shù)支持、產(chǎn)品跟蹤及售后等問題。

西寶生物科技（上海）股份有限公司（以下簡稱西寶生物）成立于2003年，位于上海張江高科技園區(qū)，是中國生命科學(xué)領(lǐng)域領(lǐng)先的綜合服務(wù)商，旗下有seebio、canmedo等自有品牌，并獨(dú)家或一級代理眾多世界著名品牌，例如WAKO，Jackson ImmunoResearch、Ludger、Miragen、Lumiprobe、Aalto，MP，Roche，Merck，Dow等。我們的客戶包括學(xué)術(shù)界、工業(yè)界和政府的研究和開發(fā)實(shí)驗(yàn)室以及制藥、生物技術(shù)、分析化學(xué)、檢測機(jī)構(gòu)、環(huán)境監(jiān)測、食品工業(yè)、化工/石化行業(yè)等企業(yè)。可提供定制、海外代購出口推廣服務(wù)。我們歷經(jīng)11年積累和錘煉，致力通過質(zhì)量和服務(wù)贏得客戶的信賴。我們期待您的合作與推薦！