免疫技術新視界：層析、印跡、吸附與比濁的前沿碰撞

來源：作者：人氣：-發表時間：2025-03-10 16:57:00【大中小】

免疫技術已形成從基礎研究到產業轉化的完整鏈條，在精準醫療時代，其與基因編輯、人工智能等技術的融合（如AI指導的疫苗設計），正在重塑疾病防治體系。當前化學發光免疫分析市場年復合增長率達12%，單抗藥物全球市場規模突破2000億美元，印證了該領域巨大的臨床價值與商業潛力。

經典的免疫檢測技術可以分為以下四類：

一、酶聯免疫層析技術（Immunochromatography）

酶聯免疫層析技術是一種快速、便捷的免疫檢測技術，根據標記物的不同，可以分為多種類型。其中，膠體金免疫層析是應用最廣泛的一種，如COVID-19快速檢測試紙條，其通過膠體金標記抗體，實現病毒的快速篩查。此外，熒光免疫層析，如量子點標記和時間分辨熒光，以及酶促化學發光免疫層析，如HRP標記結合底物發光檢測，也都在不同領域發揮著重要作用。

該技術的核心原理是樣本通過毛細作用在層析膜上流動，標記抗體與目標物結合后形成可見或可檢測的復合物，如顯色線。其關鍵組件包括樣品墊、結合墊（標記抗體）、硝酸纖維素膜（檢測線/質控線）和吸水墊。酶聯免疫層析技術的優勢在于快速、便攜，且無需復雜設備。

核心應用領域

臨床快速診斷（POCT）

病原體檢測：膠體金免疫層析法（GICA）被廣泛用于快速檢測病原體抗原/抗體。例如，針對口蹄疫病毒（FMDV）的定型檢測試劑盒，可在60分鐘內完成O、A、AsiaⅠ型病毒分型，靈敏度達7.8×10⁴ LD₅₀，對田間樣本的符合率超過92% 。金黃色葡萄球菌檢測試紙條靈敏度為1×10⁶ CFU/mL，且特異性良好。

疾病標志物檢測：時間分辨熒光免疫層析技術結合銪（Eu³⁺）標記，可定量檢測血清中低濃度蛋白（如心臟標志物），靈敏度達ng/mL級，線性范圍覆蓋5~10³ ng/mL，RSD<3% 。

食品安全與環境監測

熒光微球標記的免疫層析技術用于食品中霉菌毒素（如黃曲霉毒素B）的快速篩查，靈敏度比膠體金法提升10~100倍，實現痕量污染物檢測。

產品方面，膠體金試紙條如雅培BinaxNOW的COVID-19抗原檢測試紙和Clearblue的妊娠試紙，熒光層析如羅氏cobas h232的心肌標志物檢測試劑，以及化學發光層析如西門子CLINITEST的腫瘤標志物檢測試劑，都在臨床上得到了廣泛應用。

二、免疫印跡技術（Western Blot）

免疫印跡技術是一種基于抗原-抗體特異性結合的蛋白質檢測技術。傳統Western Blot通過SDS-PAGE電泳分離蛋白，然后轉膜后用抗體進行檢測。隨著技術的發展，自動化Western Blot如微流控芯片電泳和毛細管電泳聯用技術，以及多重檢測技術如多色熒光標記抗體等新型技術應運而生。

免疫印跡技術的核心步驟包括蛋白提取與定量、SDS-PAGE電泳分離、轉膜、封閉與抗體孵育。存在一些關鍵挑戰，如轉膜效率、抗體交叉反應和定量準確性等。

在研究進展方面，高通量自動化技術的出現，如全自動Western系統，實現了“樣品進-結果出”的快速檢測流程。超敏檢測技術如單分子檢測技術，提升了低豐度蛋白的檢出能力。同時，無標記技術的應用，如表面等離子共振或質譜聯用，減少了對抗體的依賴。

產品方面，Western試劑如西寶生物科技的預制膠和抗體，以及多重檢測試劑盒如Cell Signaling Technology Phospho抗體panel，都在研發及生產領域發揮著重要作用。

三、免疫吸附技術

免疫吸附技術是一種基于抗原-抗體特異性結合的分離和檢測技術。根據操作方式的不同，可以分為固相免疫吸附和液相免疫吸附。固相免疫吸附如ELISA技術，通過酶聯免疫吸附實現目標物的檢測；免疫磁珠吸附則利用磁性顆粒表面偶聯抗體，實現目標物的快速分離與富集。液相免疫吸附如均相免疫檢測技術，也在特定領域有著廣泛應用。

ELISA技術的核心是抗原-抗體在固相載體（如微孔板）上的特異性結合，通過酶標抗體催化顯色來實現目標物的檢測。免疫磁珠技術則利用磁性顆粒的特性，實現目標物的快速分離和富集。

按檢測模式分類，酶聯免疫吸附技術又可分為競爭法和夾心法。競爭法主要用于小分子物質的檢測，如農藥殘留和毒品等；而夾心法則適用于大分子物質的檢測，如抗原和抗體等。

核心應用領域

抗體與抗原純化：金屬螯合親和層析介質（如Ni-NTA）通過組氨酸標簽特異性結合重組蛋白，純化效率>95%，用于單克隆抗體的大規模生產。

疫苗開發：擴張柱床吸附層析（EBA）直接從發酵液中捕獲病毒顆粒（如乙肝表面抗原），減少預處理步驟，成本降低30% 。

四、免疫比濁技術

免疫比濁技術是一種通過測量抗原抗體復合物形成后溶液透光度的降低（濁度增加）來定量目標物的技術。該技術廣泛應用于全自動生化分析儀上，如CRP（C-反應蛋白）和免疫球蛋白的檢測。

免疫比濁技術的核心原理是抗原與抗體在液相中特異性結合形成復合物，導致溶液濁度發生變化。濁度變化與目標物濃度相關，通過校準曲線可以實現定量分析。然而，該技術也受到一些關鍵因素的影響，如抗原抗體比例需優化至等價帶以避免前帶或后帶現象，反應條件如pH、離子強度和溫度需嚴格控制以維持復合物穩定性等。

在干擾因素方面，脂血、溶血樣本可能干擾光信號，類風濕因子（RF）可能導致假陽性結果。因此，在實際應用中需要特別注意這些因素的干擾。

隨著技術的發展，免疫比濁技術也實現了自動化集成。多數現代生化分析儀如羅氏Cobas和西門子ADVIA等內置免疫比濁模塊，支持高通量檢測。同時，納米材料的應用如金納米顆粒和二氧化硅包被膠乳顆粒等增強了信號強度，提高了檢測的靈敏度。新型標記策略如熒光標記膠乳微粒聯用散射檢測實現了多波長信號放大。多重檢測技術如多參數聯檢通過不同粒徑/顏色的膠乳顆粒標記不同抗體，實現了單樣本同時檢測多個指標。

技術	基本原理	優勢	應用領域
免疫層析	毛細管作用和免疫反應，標記抗體顯色	快速簡便，無需復雜儀器，成本低	臨床診斷（傳染病、腫瘤標志物），食品安全，環境監測
免疫印跡	電泳分離蛋白質，抗體結合檢測	高特異性，半定量/定量分析，應用廣泛	蛋白質研究
免疫吸附	抗原抗體特異性結合，目標物質分離	高特異性，應用廣泛，可重復性好	病原標志物抗體，如Tau蛋白抗體
免疫比濁	抗原抗體復合物引起濁度變化，測量濁度定量分析	快速自動化，定量準確	血清蛋白、免疫球蛋白檢測

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物料列表

物料編碼	名稱	規格型號
EKN0438A-0.5mg	β淀粉樣蛋白1-42（Aβ1-42）抗體（包被）	0.5mg
EKN0438A-1mg	β淀粉樣蛋白1-42（Aβ1-42）抗體（包被）	1mg
EKN0438A-5mg	β淀粉樣蛋白1-42（Aβ1-42）抗體（包被）	5mg
EKN0447A-0.5mg	β淀粉樣蛋白1-40（Aβ1-40）抗體（標記）	0.5mg
EKN0448A-0.5mg	β淀粉樣蛋白1-40（Aβ1-40）抗體（包被）	0.5mg
EKN0456C-1mg	磷酸化TAU181蛋白 (p-TAU 181 Protein) 抗體	1mg
EKN0468C-0.5mg	磷酸化Tau217蛋白 (p-Tau 217) 抗體	0.5mg
EKN0468C-1mg	磷酸化Tau217蛋白 (p-Tau 217) 抗體	1mg
DCL0602A-100mg	人免疫球蛋白G IgG	100mg
DCL0602A-10MG	人免疫球蛋白G IgG	10MG
DCL0602A-500MG	人免疫球蛋白G IgG	500MG
DCL0604A-100KU	免疫球蛋白E	100KU
DCL0604A-10KU	免疫球蛋白E	10KU
DCL0604A-50KU	免疫球蛋白E	50KU
DCL0604A-560KU	免疫球蛋白E	560KU
(C)DCL0001L	BSA；Bovine Serum Albumin	0.96
(C)DCL0001D	BSA；Bovine Serum Albumin(low free fatty acid)	0.98
(C)DCL0001C	BSA；Bovine Serum Albumin	0.99
(C)DCL0001B	BSA；Bovine Serum Albumin(None protease)	0.98
DJL1142M-1g	主動型阻斷劑	1g
DJL1142M-5mg	主動型阻斷劑	5mg
DJL1142N-100mg	主動型阻斷劑	100mg
DJL1142P-10mg	異嗜性抗體阻斷劑	10mg
DJL1142P-5mg	異嗜性抗體阻斷劑	5mg
KVH0064A-3M	免疫層析NC膜（樣品）	3米/卷
KVH0064A-5M	免疫層析NC膜（樣品）	5米/卷
KVH0064A-6M	免疫層析NC膜（樣品）	6米/卷
KVH0064A-9M	免疫層析NC膜（樣品）	9米/卷