CD4+ T細胞通過激活庫普弗細胞分泌IL-27逆轉HBV誘導的CD8+ T細胞功能障礙的機制研究

來源：作者：人氣：-發表時間：2025-07-01 10:58:00【大中小】

摘要：研究揭示了慢性HBV感染中CD4+ Teff細胞通過CD40-CD40L軸激活肝臟庫普弗細胞(KCs)，促使其分泌IL-12和IL-27，從而逆轉HBV特異性CD8+ T細胞功能衰竭的新機制。

慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染影響著全球近3億人，其中相當比例會發展為肝硬化和肝癌。病毒清除主要依賴CD8+細胞毒性T細胞的功能，但在慢性感染中，這些細胞往往陷入"功能衰竭"(exhaustion)狀態。尤其令人困惑的是，即使病毒抗原持續存在，為何有些患者能自發清除病毒？先前研究提示CD4+ T細胞的輔助功能可能至關重要，但其具體機制，特別是在肝臟這個特殊免疫微環境中的作用，始終是未解之謎。

意大利圣拉斐爾科學研究所在《Nature Immunology》發表的研究，通過構建HBV特異性CD4+ TCR轉基因小鼠(Env126品系)，結合多光子活體成像等先進技術，首次揭示了肝臟局部CD4+ T細胞與庫普弗細胞(KCs)的三元互動機制。研究發現，效應性CD4+ T細胞(CD4+ Teff)通過CD40-CD40L分子直接激活KCs，促使后者分泌IL-12和IL-27。其中IL-12主要擴增CD4+ T細胞池，而IL-27則是挽救CD8+ T細胞功能的關鍵因子。這一發現不僅解釋了肝臟局部免疫調控的特殊性，還為慢性乙肝的免疫治療提供了新思路。

圖1 CD4+ T細胞允許庫普弗細胞逆轉肝細胞啟動誘導的CD8+ T細胞功能障礙

關鍵技術包括：(1)構建HBV Env126-138特異性CD4+ TCR轉基因小鼠；(2)采用rVSVEnv病毒載體在體激活T細胞；(3)多光子活體顯微技術觀察肝內免疫突觸形成；(4)單細胞RNA測序分析T細胞亞群；(5)CLEC4f-iDTR-YFP小鼠進行KCs特異性剔除；(6)慢性乙肝患者PBMCs體外培養驗證IL-27的治療潛力。

CD4+ T細胞逆轉CD8+ T細胞功能障礙

通過共轉輸實驗發現，Env126 CD4+ Teff細胞不僅能預防還能逆轉由肝細胞抗原提呈誘導的CD8+ T細胞功能障礙。被"拯救"的CD8+ T細胞增殖能力增強，抑制性受體(PD-1、Lag-3、CTLA-4)表達下降，同時效應分子(IFNγ、TNF、Grzm-B)分泌增加。

抗原識別是關鍵而非表位連鎖

研究證實CD4+ T細胞的輔助作用需要直接抗原識別，但不需要與CD8+ T細胞識別的表位物理連接。在MHC-II缺陷小鼠中，CD4+ T細胞無法提供有效幫助，說明TCR-MHC II相互作用不可或缺。

圖2 HBV特異性CD4+ TCR轉基因小鼠的構建與表征

肝臟局部免疫突觸形成

通過阻斷淋巴細胞歸巢證明，CD4+ T細胞的輔助作用可不依賴次級淋巴器官，直接在肝臟內完成。多光子成像捕捉到CD4+-CD8+-KCs三元穩定互作結構，互作時間超過20分鐘，符合免疫突觸特征。

庫普弗細胞的核心作用

選擇性剔除實驗顯示，KCs而非樹突狀細胞(DCs)是CD4+ T細胞發揮作用的關鍵平臺。被"許可"(licensed)的KCs高表達MHC II和共刺激分子(CD40、CD80、CD86)，并分泌IL-27。

IL-27的治療潛力

在慢性乙肝患者中，外源性IL-27能顯著增強HBV特異性CD8+ T細胞反應，尤其對聚合酶特異性T細胞效果最顯著。這為臨床轉化提供了直接依據。

這項研究顛覆了傳統"三細胞"模型認知，提出"肝內許可"新范式：CD4+ Teff→KCs→CD8+ T細胞的級聯激活途徑。這不僅解釋了為何部分慢性感染者能自發控制病毒，更重要的是，IL-27作為可成藥靶點，其臨床轉化風險較低，為開發"功能性治愈"乙肝的新策略奠定了理論基礎。研究還暗示，類似機制可能存在于其他慢性病毒感染或腫瘤微環境中，為免疫治療研究開辟了新方向。

參考資料

[1] CD4⁺ T cells license Kupffer cells to reverse CD8+ T cell dysfunction induced by hepatocellular priming