當底物發生化學反應而產生的能量以光的形式釋放出來的時候，我們稱這個過程為化學發光。魯米諾（luminol）是常用的化學發光試劑之一，被過氧化物氧化后它會產生一種激發態的產物--aminophthalate。這種產物衰變至低能態的同時釋放出光子。專利添加物可以提高魯米諾反應的發光強度和持續時間（穩定性），從而使增強型化學發光（ECL）成為可能。
  化學發光成為大多數蛋白實驗室的檢測方法，其這些優點如下：1、使用化學發光可以通過多次曝光獲得好的成像結果；2、可以將檢測試劑去除，再對其他目的蛋白進行檢測并成像，或對檢測條件進行優化；3、具有很寬的線性響應范圍，從而可以檢測并定量很寬濃度范圍的蛋白質；4、化學發光在所有的檢測方法中具有高靈敏度。
  在化學發光分析中，如果再加入適當的增強劑，則靈敏度提高且發光時間延長，可改善測定的重現性。實驗證明，對位酚類衍生物的發光增強作用明顯，其發光效率可上升幾十倍，發光時間也獲得有效延長。
  吖啶酯或吖啶磺酰胺類化合物應用于化學發光免疫分析（CLIA），通常采用的體系是Acridinium ester/ H₂O₂系統。即用吖啶酯或吖啶磺酰胺標記抗體或抗原，用HNO₃+H₂O₂和NaOH作發光啟動試劑。有些在發光啟動試劑中加入Triton X-100，CTAC，Tween-20等表面活性劑以增強發光。
  自然中廣泛分布著生物發光有機體，其中包括細菌、真菌、魚、昆蟲等。在這些生物發光有機體中催化生物發光反應的各種酶都稱之為熒光素酶（Luciferases），底物則命名為熒光素（Luciferin）。D-熒光素（D-luciferin)是生物冷光檢查使用廣泛的物質，是熒光素檢測試劑盒的核心成份，廣泛應用于生物、醫藥、食品、衛生、環境等領域。D-熒光素、D-熒光素鉀鹽、D-熒光素鈉鹽，作為Luciferase的作用底物，常用于以下實驗：
 1．報告基因分析
 2．動物活體成像(In vivo imaging) 和細胞體外分析（In vitro imaging）
 3．三磷酸腺苷（ATP）測定
 4．其它 luciferase 及其基因相關的分析和研究工作
  熒光素類和羅丹明類是生物技術中常用的標記染料，廣泛應用于蛋白質和核酸的檢測分析中，人們對其結構和性能已經有了深入的了解。菁染料是一種比較特殊的染料，利用它摩爾消光系數高、光譜范圍廣且光量子產率高等特性，應用于生物大分子熒光標記。菁染料主要用于標記核酸。菁染料是一種比較特殊的染料，利用它摩爾消光系數高、光譜范圍廣且光量子產率高等特性，應用于生物大分子熒光標記。菁染料主要用于標記核酸。
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