熒光定量PCR用SYBR GREEN I染料助力2019-nCoV新冠病毒檢測研究用

來源：作者：人氣：-發(fā)表時間：2020-02-13 16:48:00【大中小】

目前已獲國家藥監(jiān)局批準(zhǔn)的針對新型冠狀病毒2019-nCoV的核酸檢測試劑盒均使用熒光PCR法。此處的“熒光”則表示在PCR反應(yīng)過程中引入熒光示蹤物。相較于常規(guī)PCR而言，熒光定量PCR技術(shù)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，通過熒光信號不斷累積而實現(xiàn)實時監(jiān)測PCR全程，然后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光PCR則可確定樣品中已知序列的絕對或相對量，通過得知反應(yīng)中熒光報告分子的熒光量累積，從而測得終產(chǎn)物量。西寶生物為支持2019-nCoV新型冠狀病毒相關(guān)研究和治療產(chǎn)品的開發(fā)提供眾多試劑盒用原料，我司自主研發(fā)的SYBR GREEN I是備受歡迎的一款熒光染料，并可提供進(jìn)口品牌Lumiprobe的SYBR GREEN I染料，咨詢熱線：400-021-8158 ！

SYBR Green I是一種結(jié)合于所有雙鏈DNA的具有綠色激發(fā)波長的染料。在游離狀態(tài)下，SYBR Green I發(fā)出微弱的熒光，但一旦與雙鏈DNA結(jié)合后，熒光大大增強(qiáng)。因此，SYBR Green I的熒光信號強(qiáng)度與雙鏈DNA的數(shù)量相關(guān)，可以根據(jù)熒光信號檢測出PCR體系存在的雙鏈DNA數(shù)量。

目前，熒光PCR中常用的染料是SYBR GREEN I

產(chǎn)品信息

適用于Real Time PCR的SYBR Green I,100×solution 10000×solution 20×solution

SYBR是一種滲入DNA鏈中的染料，高效特異作用于dsDNA。這種染料能用于實時定量PCR中檢測DNA鏈的合成。

光譜特性：
激發(fā)波長峰值：454nm
發(fā)射波長峰值：524nm
熒光量子產(chǎn)率：0.8

操作如下：

1.計算反應(yīng)所需試劑的體積

Reagent Final concentration in the mixture
dNTP 2 mM each
DMSO 10% vol.
Taq polymerase buffer 1x
Primer 1 0.1-1 uM
Primer 2 0.1-1 uM
Taq DNA polymerase 1.25 u per reaction
MgCl2 2 mM
SYBR Green I 1x

2. 在冰浴中用水和以上試劑混合

3. 將混合液轉(zhuǎn)移到試管或平板中，加入DNA(50ng反應(yīng))

4. 根據(jù)儀器說明進(jìn)行擴(kuò)增。

需要注意的是，SYBR GREEN I 大多是用來對于熒光PCR結(jié)果做定性判斷

儲存條件及注意事項

1、有效期12個月。-20℃干燥避光長期保存，短期使用可放4℃。
2、本品用DMSO溶解，因DMSO的熔點是18.5℃，使用前請放置到室溫充分溶解。
3、本品僅供科研使用。

產(chǎn)品信息：

品牌	貨號	名稱	規(guī)格	價格（元）
Seebio	EGY0004B	20×SYBR Green I for Real Time PCR	1ml	468.00
	EGY0004B	20×SYBR Green I for Real Time PCR	5ml	1488.00
	EGY0004C	10000×SYBR Green I for Real Time PCR	1ml	22000.00
	EGY0004C	10000×SYBR Green I for Real Time PCR	5ml	85800.00
Lumiprobe	11010	dsGreen for Real-Time PCR, 100×	100ul	624.00
Lumiprobe	41010	dsGreen for Real-Time PCR, 100×	1ml	4960.00