胃蛋白酶原I（PGI）-磁微粒化學(xué)發(fā)光法（AE/AP） /熒光免疫層析解決方案

來(lái)源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2024-07-04 15:59:00【大中小】

1.項(xiàng)目背景

摘自《中國(guó)胃癌篩查與早診早治指南（2022）》

PG是胃蛋白酶的無(wú)活性前體，可分為PGI和PGII種亞型。PGI主要由胃體和胃底腺的主細(xì)胞和頸黏液細(xì)胞分泌，而 PGII除由胃底腺分泌外，胃竇幽門腺和近端十二指腸 Brunner腺亦可分泌。當(dāng)胃黏膜發(fā)生萎縮時(shí)，血清PGI水平和（或）PGI/II比值（PGR）降低。血清中約存在人體1%的PG，其血清水平可作為胃黏膜形態(tài)和功能狀態(tài)的標(biāo)志，聯(lián)合Hp檢測(cè)可識(shí)別出胃癌的高危個(gè)體。一項(xiàng)納入27項(xiàng)人群篩查研究和15項(xiàng)針對(duì)特定高危人群（如萎縮性胃炎）研究、涉及約30萬(wàn)例受試者的Meta分析結(jié)果顯示，在一般人群研究中血清PG（PGI≤70ng/ml，PGR≤3）檢測(cè)診斷胃癌的靈敏度和特異度分別為77%和73%，在特定高危人群中靈敏度和特異度分別為57%和80%。另有3項(xiàng) Meta分析評(píng)估了PG檢測(cè)對(duì)胃癌診斷的靈敏度和特異度，結(jié)果顯示，血清PG檢測(cè)對(duì)胃癌診斷的靈敏度和特異度分別為57%～69%和 73%～85%。

2. 性能表現(xiàn)

針對(duì)PGI的檢測(cè)，西寶生物推出2種單克隆抗體及1種抗原。具體性能如下

（以下評(píng)估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行抗體交叉配對(duì)驗(yàn)證）。

2.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：

組合1（兩試劑模式）：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0287D）包被羧基磁珠+胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記吖啶酯；

組合2（三試劑模式）：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記生物素+胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0287D）標(biāo)記吖啶酯+鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）。

線性范圍：1ng/mL-200ng/mL；最低檢出限：1ng/mL。

濃度值在5000ng/mL以內(nèi)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)(HOOK效應(yīng))。

2.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：

組合3（兩試劑模式）：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0287D）包被羧基磁珠+胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記堿性磷酸酶；

組合4（三試劑模式）：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記生物素+胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0287D）標(biāo)記堿性磷酸酶+鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）。

線性范圍：1ng/mL-200ng/mL；最低檢出限：1ng/mL。

濃度值在5000ng/mL以內(nèi)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)(HOOK效應(yīng))。

2.3熒光免疫層析平臺(tái)：

組合5：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記熒光微球+胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0287D）劃膜；

線性范圍：1ng/mL-200ng/mL；最低檢出限：1ng/mL。

濃度值在5000ng/mL以內(nèi)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)(HOOK效應(yīng))。

熒光層析平臺(tái)抗原稀釋梯度

3.臨床相關(guān)性

3.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：

西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)PGI抗體配對(duì)組合1（兩試劑模式）與邁瑞醫(yī)療PGI試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R²>0.95，相關(guān)性良好；

西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)PGI抗體配對(duì)組合2（三試劑模式）與邁瑞醫(yī)療PGI試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R²>0.95，相關(guān)性良好。

3.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：

西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)PGI抗體配對(duì)組合3（兩試劑模式）與邁瑞醫(yī)療PGI試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R²>0.95，相關(guān)性良好；

西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)PGI抗體配對(duì)組合4（三試劑模式）與邁瑞醫(yī)療PGI試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R²>0.95，相關(guān)性良好。

3.3熒光免疫層析平臺(tái)：

西寶生物熒光平臺(tái)PGI抗體配對(duì)組合5與邁瑞醫(yī)療PGI試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R²>0.95，相關(guān)性良好。

4. 測(cè)試方案

4.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)

4.1.1抗體配對(duì)組合1（兩試劑模式）：

待測(cè)抗原:PGI抗原（貨號(hào)：EKY0731B）

樣本/校準(zhǔn)品:樣品加樣量10ul；

試劑1：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0287D）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；

試劑2：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；

反應(yīng)條件：

第一步：10ul樣品+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。

4.1.2抗體配對(duì)組合2（三試劑模式）：

待測(cè)抗原:PGI抗原（貨號(hào)：EKY0731B）

樣本/校準(zhǔn)品:樣品加樣量10ul；

M試劑：鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）稀釋物，用量50ul/測(cè)試；

試劑1：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記-生物素稀釋物，用量50ul/測(cè)試；

試劑2：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0287D）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；

反應(yīng)條件：

第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育5min；

第二步：加入50ul M試劑混合，37℃孵育5min，清洗；

第三步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。

測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。

4.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)

4.2.1抗體配對(duì)組合3（兩試劑模式）：

待測(cè)抗原:PGI抗原（貨號(hào)：EKY0731B）

樣本/校準(zhǔn)品:樣品加樣量10ul；

試劑1：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0287D）包被-磁珠稀釋物，用量100ul/測(cè)試；

試劑2：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；

反應(yīng)條件：

第一步：10ul樣品+100ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。

4.2.2抗體配對(duì)組合4（三試劑模式）：

待測(cè)抗原:PGI抗原（貨號(hào)：EKY0731B）

樣本/校準(zhǔn)品:樣品加樣量10ul；

M試劑：鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）稀釋物，用量50ul/測(cè)試；

試劑1：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記-生物素稀釋物，用量50ul/測(cè)試；

試劑2：胃蛋白酶原I(PGI)抗體（貨號(hào)：EKN0287D）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；

反應(yīng)條件：

第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育5min；

第二步：加入50ul M試劑混合，37℃孵育5min，清洗；

第三步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。

測(cè)試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。

4.3熒光免疫層析平臺(tái)：

抗體配對(duì)組合5

待測(cè)抗原:PGI抗原（貨號(hào)：EKY0731B）,樣本/校準(zhǔn)品:加樣量10ul；

反應(yīng)條件：樣品+稀釋液混勻，上樣，反應(yīng)時(shí)間（10min-15min）；

測(cè)試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。

5.產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱	貨號(hào)	推薦配對(duì)
胃蛋白酶原I(PGI)抗體	EKN0287D	胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0287D）包被羧基磁珠+胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合1）胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記生物素+胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0287D）標(biāo)記吖啶酯+鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）（發(fā)光配對(duì)組合2）胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0287D）包被羧基磁珠+胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光配對(duì)組合3）胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記生物素+胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0287D）標(biāo)記堿性磷酸酶+鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）（發(fā)光配對(duì)組合4）
胃蛋白酶原I(PGI)抗體	EKN0288D
胃蛋白酶原I(PGI)抗體	EKN0287D	胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記熒光微球+胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0287D）劃膜（熒光配對(duì)組合5）
胃蛋白酶原I(PGI)抗體	EKN0288D
胃蛋白酶原（PGI）抗原	EKY0731B
胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0287D）包被羧基磁珠濃縮液	DKY1331A
胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0287D）吖啶酯濃縮液	DKY1331B
胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0287D）標(biāo)記堿性磷酸酶濃縮液	DKY1331C
胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0288D）-吖啶酯濃縮液	DKY1331D
胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記生物素濃縮液	DKY1331E
胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記堿性磷酸酶濃縮液	DKY1331F
胃蛋白酶原I（PGI）抗體（貨號(hào)：EKN0288D）標(biāo)記熒光微球濃縮液	DKY1331G
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型）	DCD0517A
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型）	DCD0517B
羧基磁性微球，1.5um	DEG0800C
鏈霉親和素磁性微球，1.5um	DEG0814A-10ml
時(shí)間分辨熒光微球，羧基（200nm）	AEG0786B