【產(chǎn)品推薦】鏈霉親和素(Streptavidin,SA)

來源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2019-08-28 08:58:00【大中小】

鏈霉親和素 (Streptavidin，簡稱SA)具有與生物素特異結(jié)合的能力，并能與HRP、AP、磁珠等結(jié)合，且等電點(diǎn)比親和素低，不含糖鏈，因而參與免疫學(xué)中的檢測信號放大，廣泛應(yīng)用于ELISA、IHC、WB等實(shí)驗(yàn)及親和色譜填料的制備、生物傳感器、生物芯片的制作。西寶生物提供優(yōu)質(zhì)的鏈霉親和素(Streptavidin，簡稱SA)，靈敏度高、特異性好、結(jié)合能力強(qiáng)且穩(wěn)定，咨詢熱線400-021-8158！

1 概述：

【名稱】鏈霉親和素 (streptavidin，SA)
【貨號】ECL0006G
【分子量】60 kDa
【來源】大腸桿菌重組表達(dá)
【保存條件】-20℃保存
【有效期限】2 年
鏈霉親和素 (Streptavidin，簡稱SA)，是鏈霉菌在培養(yǎng)過程中分泌的一種蛋白質(zhì)產(chǎn)物。具有與生物素特異結(jié)合的能力，結(jié)合常數(shù)高達(dá)1015M。同時(shí)，由于鏈霉親和素等電點(diǎn)比親和素低，且不含糖基鏈，故在檢測中的靈敏度和特異性都高于親和素，建立在此基礎(chǔ)上的生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)的應(yīng)用比生物素-親和素系統(tǒng)有更大優(yōu)勢。

2 結(jié)構(gòu)：

鏈霉親和素是四聚體蛋白，大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結(jié)合，兩者之間的親和力極為強(qiáng)烈，鏈霉親和素-生物素復(fù)合物的解離常數(shù)處于10 mol/L數(shù)量級，這一性質(zhì)常用于分子生物學(xué)用途。其中一條完整的SA肽鏈中有159個(gè)氨基酸殘基，分子量為16450。

3 質(zhì)量指標(biāo)：

Purity(SDS-PAGE)	≥95%
Purity(HPLC)	≥95%
Solubility	Colorless transparent liquid
pH	6.6~7.4
Identification	Positive
Appearance	White lyophilized powder, no visual foreign matters

4 用途：

鏈霉親和素可偶聯(lián)HRP、AP、生物素及磁珠等，參與免疫學(xué)中檢測信號的放大，廣泛應(yīng)用于ELISA、IHC、WB等實(shí)驗(yàn)及親和色譜填料的制備、生物傳感器、生物芯片的制作。

酶偶聯(lián)物標(biāo)記的鏈霉親和素

辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈和親霉素
1) 由高純度的鏈霉親和素和辣根過氧化物酶，通過特殊的偶聯(lián)技術(shù)生產(chǎn)；
2) 保持了過氧化物酶的高比活性。
應(yīng)用于：免疫組化（IHC）、免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）、原位雜交（ISH）等領(lǐng)域。

堿性磷酸酶標(biāo)記鏈霉親和素
1) 適合于固相分析，組織/細(xì)胞染色系統(tǒng)和印跡應(yīng)用，選擇特定的共價(jià)連接；
2) 綴合物穩(wěn)定并高活性。
應(yīng)用于：免疫組化（IHC）、免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法（ELISPOT）、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、原位雜交（ISH）及印跡應(yīng)用。

熒光基團(tuán)標(biāo)記的鏈霉親和素

熒光素標(biāo)記鏈霉親和素
1) 在免疫熒光、原位雜交或流式細(xì)胞術(shù)等應(yīng)用中可用于檢測生物素化的二抗和其他大分子；
2) 高度純化并具有非常低的非特異性結(jié)合特性；
3) 對生物素具有較高的親和力；
應(yīng)用于：免疫熒光（IF）、原位雜交（ISH）、流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cyt）。

鏈霉親和素酶標(biāo)板

將鏈霉親和素直接或間接預(yù)包被在酶標(biāo)板上，穩(wěn)定性高，易于保存，使用時(shí)只要加入生物素化的抗體或者抗原即可。

5 應(yīng)用領(lǐng)域：

6 注意事項(xiàng)：

1、凍干粉溶解后應(yīng)避免反復(fù)凍融，建議分裝成小包裝后分別凍存;
2、溶解后立即使用效果最好，不能4°C長期存放;

7 實(shí)驗(yàn)舉例&操作步驟：

一、在ELISA實(shí)驗(yàn)中用于包被和信號放大
1、用碳酸鈉緩沖溶液（pH 9.6）溶解凍干粉，將濃度稀釋成3-10ug/ml（客戶可設(shè)定梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)）
注意：由于SA等電點(diǎn)是7.4，包被不建議使用中性緩沖液
2、用移液器吸取100ul/孔，4℃過夜包被或者37℃包被2h；
3、洗滌：倒盡板孔中液體，加200ul洗滌液，靜放三分鐘，反復(fù)三次，最后將反應(yīng)板倒置在吸水紙上，使孔中洗滌液流盡，扣干
4、后續(xù)進(jìn)入封閉、洗滌、抗原抗體結(jié)合流程
若不立即進(jìn)入下游實(shí)驗(yàn)，包被板需要進(jìn)行烘干保存時(shí)。包被前，將包被液中加入20%蔗糖作為活性保護(hù)劑。

二、SA偶聯(lián)磁珠用于化學(xué)發(fā)光反應(yīng)
2.1 NHS 活化
1、充分混勻磁珠后，取100μl 羧基磁珠到1.5 ml 離心管中，置于磁性分離上，待固液分離后去除上清液；
2、取200μl MES溶液（25mM，pH 5.0）加入到離心管中，置于磁性分離上，待固液分離后去除上清液。重復(fù)該步驟1 次；
3、迅速加入新配制的50μlEDC溶液和50μl NHS 溶液（均為50mg/ml，以上述MES配制）到裝有磁珠的離心管中，漩渦混勻使磁珠充分懸浮，室溫下垂直混合30min；
4、反應(yīng)結(jié)束后，加入100μl 上述 MES 溶液洗滌 2 次；（活化狀態(tài)不宜長時(shí)間保存，建議立即進(jìn)行偶聯(lián)）

2.2 蛋白偶聯(lián)
1、將離心管置于磁性上，分離去除上清液，加入100μl蛋白溶液（25 mM MES，pH 5.0）
輕柔地混勻；（蛋白濃度在0.1-2.0mg/ml）
2、在室溫下垂直混合反應(yīng)2h，或在4℃條件下垂直混合過夜；
3、反應(yīng)結(jié)束后將離心管置于磁分離架上，磁性分離去除上清液，加入1ml乙醇胺溶液（3M，pH9.0）洗滌磁珠 2 次；
4、加1ml乙醇胺溶液（3M, pH 9.0）于離心管中，渦旋30s，將離心管置于垂直混合儀中室溫反應(yīng)1-2h；
5、反應(yīng)結(jié)束后，將離心管置于磁力架上，待固液分離后移除上清液，然后加入100μl純化水輕柔渦旋 30s，磁吸分離，重復(fù)該步驟 1 次；
6、加入適量的保存液保存于4°，如果固定的生物配體穩(wěn)定，可以在保存溶液中加入0.02%（W/V）疊氮化鈉作為抑菌劑。

8 相關(guān)產(chǎn)品列表：

貨號	中文品名	英文品名	規(guī)格
ECE0066N	辣根過氧化物酶	Peroxidase(HRP)	100mg,1g
DCE0108B	堿性磷酸酶	Phosphatase, Alkaline	10mg,100mg
DCE0005A	3,3'5,5'-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽	TMB-2HCl	1g,5g,25g
DCD0003A	4-硝基苯基磷酸二鈉鹽,六水	PNPP-2Na	1g,5g,25g
164894	鄰苯二胺片劑	OPD Tablets	100 piece
ECL0019A	重組蛋白A	Recombinant Protein A	1mg/10mg/100mg
ECL0020A	重組蛋白G	Recombinant Protein G	1mg/10mg/100mg
ECL0021B	重組蛋白A/G	Recombinant Protein A/G	5mg
ECL0018A	重組蛋白L	Recombinant Protein L	1mg/10mg
AAS0038A	EDC鹽酸鹽	EDC-HCl	5g/25g