清晰明了的外泌體純化方法比較

來源：作者：人氣：-發(fā)表時間：2024-04-24 16:29:00【大中小】

外泌體的研究日益活躍并令人矚目。外泌體（exosomes）是一種能被機體內(nèi)大多數(shù)細胞分泌的直徑大約為 30-150 nm 的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡。它廣泛存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號分子，形成了一種全新的細胞間信息傳遞系統(tǒng)，影響細胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進程密切相關(guān)。

但是，由于外泌體的納米尺寸，同其它類型的胞外囊泡在理化和生化特征上部分重疊，以及自身在大小、組成和功能方面存在異質(zhì)性，其分離純化也面臨挑戰(zhàn)。為了更清晰的讓大家了解目前主流的幾種外泌體純化分離方法的優(yōu)缺點，參考文獻及網(wǎng)絡(luò)信息給大家做了如下總結(jié)，供大家參考。

近年來，研究人員根據(jù)外泌體理化性質(zhì)研發(fā)了多種分離純化方法常用的有:

超速離心/差速離心（UC法）
密度梯度超速離心法
尺寸排阻色譜（SFC）
超濾（UF）
多聚物沉淀法（PEG）
免疫親和法
磷酯酰絲氨酸（PS）
微流控等

以上不同方法的優(yōu)缺點及應用范圍見下表

純化方法	設(shè)備及耗材需求	時長	優(yōu)點	缺點	推薦用途
超速離心/差速離心（UC）	超速離心機	＞4h	操作規(guī)范，難度低，適用性廣，金標準	耗時長，回收率低，重復性差，純度低	外泌體功能學實驗
密度梯度離心	超速離心機，分離介質(zhì)	＞16h	外泌體純度高	耗時長，操作繁瑣，回收率低	組學研究
尺寸排阻色譜（SEC）	柱子、填料、自動層析系統(tǒng)	30 min	簡單、經(jīng)濟、大規(guī)模、外泌體純度高，結(jié)構(gòu)和功能限度得以保留	樣本經(jīng)過流動相稀釋，結(jié)合超濾濃縮可解決	組學、標志物研究
超濾（UF）	超濾管/離心機套裝（DEF）或恒流泵/膜包套裝（TFF）	＜4 h	簡單、經(jīng)濟、大規(guī)模、回收率高，常與其他方法復合使用	DEF濾膜容易堵塞，影響通量（可用TFF實現(xiàn)高通量）	需要對樣本濃縮并與其他方法復合使用的
聚合物沉淀法	離心機、PEG	0.3-12 h	操作簡單，設(shè)備簡單、耗時短，可處理大樣本量，易于與現(xiàn)有的分離方法結(jié)合	純度極低，易受到脂蛋白或病毒顆粒的污染，影響分析	不需要進行組學研究的極低純度要求研究者
免疫親和法	抗體、固定抗體的載體（例如磁性顆粒、微流體裝置）	4-20 h	特異性，純度高，能分離出特定的外泌體亞類	耗時，分離成本高，對試劑和儲存條件要求高，異質(zhì)性可能導致低純度或產(chǎn)量	需要分離特定外泌體亞類且需求高純度的研究者
PS親和法	磁珠、試劑	/	使用方便，純度高，形態(tài)完整，耗時短，無儀器需求	不適合大樣本分離，分離的外泌體可能含其他膜樣雜質(zhì)（可用wakoEV大規(guī)模分離純化柱）	適用于多數(shù)研究場景，適合小體積、不依賴設(shè)備的研究者
微流控	微流控平臺	/	高效方便，純度高，樣本污染風險小，可實現(xiàn)自動化診斷	門檻較高，只適合小樣本分離	僅需少量樣本、用于醫(yī)學診斷的研究者

*WAKO新推出的MassivEV™ EV純化分離柱 PS/MassivEV™ EV純化緩沖液套裝可解決以上PS親和捕獲法的不足，可滿足大規(guī)模純化外泌體等細胞外囊泡的分離。

PS親和法可實現(xiàn)完整EV的高度純化（引用FUJIFILM）

清晰明了的外泌體純化方法比較|產(chǎn)品推薦|西寶生物科技（上海）股份有限公司-咨詢電話：400-021-8158

綜上對比細胞外囊泡的純化方法，PS親和純化在EV回收率，純度，囊泡完整性等方面都有一定優(yōu)勢。WAKO重磅推出的MassivEV™ EV純化分離柱PS/MassivEV™ EV純化緩沖液套裝可完美解決PS親和捕獲法不適用大體積的缺點，可滿足大規(guī)模純化外泌體等細胞外囊泡的分離。詳情見——你需要的大規(guī)模純化外泌體方法來了

產(chǎn)品優(yōu)勢

使用方便，純度高，形態(tài)完整，耗時短，無儀器需求
可從大規(guī)格（10 mL至1L級別規(guī)格）細胞培養(yǎng)上清中高效分離和純化高純度EV
只需一個蠕動泵，無需切向流過濾（TFF）系統(tǒng)等昂貴設(shè)備
高性價比（處理同一樣品時，可重復使用分離柱5次）

產(chǎn)品概要

產(chǎn)品組成：MassivEV™ 細胞外囊泡（EV）純化分離柱 PS

MassivEV™ 細胞外囊泡（EV）純化緩沖液套裝

產(chǎn)品列表

適用于10 mL至1L級細胞培養(yǎng)上清

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品應用
131-19491 137-19493	MassivEV™ EV Purification Column PS MassivEV™細胞外囊泡（EV）純化分離柱PS	1mL 5mL	基因研究
295-96601	MassivEV™ Purification Buffer Set MassivEV™細胞外囊泡（EV）純化緩沖液套裝 ① EV Binding Enhancer ② Washing Buffer ③ EV Elution Buffer ④ EV-Stabilizer A ⑤ EV-Stabilizer B ⑥ Storage Buffer	1mL×10次用 (5mL×2次用)	基因研究

以上MassivEV™ EV Purification Column PS、MassivEV™ Purification Buffer Set請配合一同使用

相關(guān)產(chǎn)品

適用于從10 mL以下的細胞培養(yǎng)上清和體液樣品中分離和純化EV

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品應用
294-84101 290-84103	MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS Ver.2 MagCapture™外泌體提取試劑盒PS Ver.2	2 tests 10 tests	基因研究

外泌體ELISA檢測（更多產(chǎn)品點擊）

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品應用
298-80601	PS Capture™ Exosome ELISA Kit （Streptavidin HRP） PS Capture™ 外泌體ELISA試劑盒（鏈霉親和素HRP）	96T	基因研究

間充質(zhì)干細胞（MSC）增殖用培養(yǎng)基

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品應用
132-19345	MSCulture™High Growth Basal Medium MSCulture™ High Growth基礎(chǔ)培養(yǎng)基	500 mL	細胞培養(yǎng)
133-19331	MSCulture™ High Growth Supplement MSCulture™High Growth添加劑	5 mL	細胞培養(yǎng)

以上MSCulture™ High Growth基礎(chǔ)培養(yǎng)基、MSCulture™ High Growth添加劑請配合一同使用

間充質(zhì)干細胞（MSC）EV生產(chǎn)用培養(yǎng)基

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品應用
053-09451	Up™ EV Production Basal Medium for MSC, AF EV-Up™間充質(zhì)干細胞外泌體生產(chǎn)用基礎(chǔ)培養(yǎng)基，無動物源成分	95mL	細胞培養(yǎng)
298-84001	EV-Up™MSC EV Production Supplement, AF EV-Up™間充質(zhì)干細胞外泌體生產(chǎn)用添加劑，無動物源成分	5 mL（100 mL用）	細胞培養(yǎng)