生物制藥表征分析工具酶

來源：作者：人氣：-發表時間：2024-05-13 12:33:00【大中小】

背景

用作治病性生物藥物的抗體結構復雜，異質性高，在制造過程中需要嚴格監管和控制?？贵w分子大小異質性是抗體的生產工藝優化、生產過程控制及放行分析中重要質控指標之一。為了確保單克隆抗體及其他生物分子藥物的安全性和有效性，需要對這些藥物進行深入的表征分析。

隨著獲批的抗體藥物數量逐年急劇增加，例如mAb、Fc融合蛋白、Fab、ADC、雙特異性抗體和雙特異性T細胞接合劑(BiTE)，了解單個翻譯后修飾(PTM)可以更好地分析和預測抗體的體內功效、藥代動力學和作用機制。

治病性抗體、融合蛋白等的表征通常從三個水平進行，包括自上而下的完整分子量水平、自下而上的多肽水平、亞基水平。常用作治病性蛋白理化分析的工具酶有PNGase F酶、IdeS酶、Papain、GinsKHAN、GlySERIAS酶、肽圖分析用的胰蛋白酶Trypsin、GluC、LysC、糜蛋白酶Chymotrypsin等。

Seebio可提供一系抗體/蛋白理化分析工具酶，用于協助單克隆抗體、融合蛋白藥物、生物類似藥等生物藥的表征分析及其相關翻譯后修飾，助力生物藥物的開發和質量控制。

蛋白測序肽圖分析

蛋白酶	酶切位點	特點
重組胰蛋白酶（質譜級）	賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端	胰蛋白酶β型占比>80%；比活≥6200 USP U/mg（相當于18600 BAEE U/mg）強穩定性，凍融次數可達10次；和進口品牌比，肽段漏切率更低、蛋白鑒定數更高；批間差穩定，可提供相關法規支持文件。
重組賴氨酰內切酶(Lys-C)	賴氨酸羧基側的酰胺、酯和肽鍵	可單獨使用，也可與胰蛋白酶聯用，鑒定更多的蛋白數以及磷酸化位點數目；在4M尿素或者0.1%SDS存在的情況下仍可保持較高的酶活性。
Glu-C蛋白酶	谷氨酸或天冬氨酸殘基羧基端肽鍵	對于分析賴氨酸和精氨酸含量高的蛋白質，與胰蛋白酶聯用可顯著提高鑒定蛋白數目；適用于分離和富集磷酸化肽段；
重組人α-糜蛋白酶	酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸的羧基端肽鍵	特別適用于膜蛋白分析。
重組金屬蛋白酶Asp-N	天冬氨酸殘基 (Asp) 和谷氨酸殘基 (Glu) N 末端的肽鍵	當 pH 范圍在 4.0-9.0 時，Asp-N 的活性最佳。該測序級蛋白酶可以單獨使用，也可以與其它蛋白酶一起使用，以產生蛋白消化物，然后通過肽指紋圖譜或 MS/MS 光譜匹配用于肽圖譜或蛋白鑒定。該測序級蛋白酶適合于溶液或凝膠中的消化反應。

糖基化分析工具酶

糖苷酶	名稱	酶切位點	特點
唾液酸修飾	唾液酸酶(a2-3,6,8)	糖蛋白和寡聚糖上通過a2-3,a2-6,a2-8鍵連接的唾液酸	可同時作用于N-羥乙酰神經氨酸和N-乙酰神經氨酸。
唾液酸修飾	唾液酸酶(a2-3,6,8,9)	糖蛋白和寡聚糖上通過a2-3,a2-6,a2-8和a2-9鍵連接的唾液酸	可同時作用于N-羥乙酰神經氨酸和N-乙酰神經氨酸；可以忍受0.5%-1.0%的去污劑。
N-糖基化修飾	PNGase F	天冬酰胺和最內側的GIcNAc之間的糖苷鍵	適用于抗體和糖蛋白的N-糖基完全去除；可在變性與非變性條件下切割糖蛋白。
N-糖基化修飾	重組Endo H	N-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖核心結構	適用于抗體或者其它糖蛋白的N-連接高甘露糖的完全去除。存儲液中不含甘油。
O-糖基化修飾	O糖蛋白酶	粘蛋白型O-連接糖(無論是否唾液酸化)的絲氨酸或蘇氨酸殘基	適用于O-糖基化分析；無需唾液酸酶預先處理。

抗體切割酶

IdeS Protease和IdeZ Protease是分別來源于化膿性鏈球菌 (Streptococcus pyogenes)和馬鏈球菌獸瘟亞種 (Streptococcus equi)的重組蛋白酶，該蛋白酶具有極高的底物特異性，能識別人等特定物種和特定類型的IgG，并在抗體鉸鏈區下方的特定位點進行酶切，使IgG水解為完整的F(ab')2片段和Fc片段。IdeS/Z酶作為工具酶應用于抗體類藥物的制備和結構表征分析，是用于表征治病性抗體、單克隆抗體、抗體偶聯藥物、Fc融合蛋白和抗體-藥物復合物的有價值的工具。

名稱	酶切位點	特點
IdeS蛋白酶	特異識別IgG,并在IgG下鉸鏈區的特定位點	可將lgG水解為完整的F(ab')2片段和Fc片段。
IdeZ蛋白酶	特異識別IgG,并在IgG下鉸鏈區的特定位點	可同時作用于N-羥乙酰神經氨酸和N-乙酰神經氨酸；可以忍受0.5%-1.0%的去污劑。

標簽切除工具酶

名稱	酶切位點	特點
重組TEV蛋白酶（rTEV Protease）	嚴格識別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)切割位點在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。	一種用來切除融合蛋白上標簽序列的常用工具酶，較EK、SUMO等蛋白酶的位點專一性更強，具有高活性和高特異性的特點。

Seebio蛋白工具酶匯總

蛋白測序肽圖分析
貨號	產品名稱	規格
DCE0060U	重組胰蛋白酶（質譜級，液體）	25ug 100ug
DCE0060T	重組胰蛋白酶（質譜級，凍干）	25ug 100ug
EXK0369B	重組賴氨酰內切酶	20ug
AXJ4266C	重組Glu-C蛋白酶，凍干	25ug 100ug
EXJ4266E-1mg	Recombination Endoproteinase Glu-C（V8 Protease），lyophilizate	1mg 10mg
ECE0162A	重組金屬蛋白酶Asp-N	5ug 10ug 20ug
AXJ4266B	重組Glu-C蛋白酶	20ug 100ug
DCL0640B	重組人α-糜蛋白酶（凍干）	20ug 50ug 100ug
糖基化酶
ECE0441E	PNGase F重組糖苷酶	20KU 40KU
DCE0447C	重組Endo H	3KU 15KU
DCE1244A	EndoS（糖苷內切酶 S）重組	6KU 30KU
DCE0448B	O糖蛋白酶	20U 100U
DCE0448C	O-糖苷酶	2000KU 10000KU
DCE0457F	唾液酸酶(α2-3,6,8)	500U 2KU 10KU
DCE0457E	唾液酸酶(α2-3,6,8,9）	2KU 10KU
抗體切割酶
ECE0711A	IdeS蛋白酶	700U
ECE0712A	IdeZ蛋白酶	1KU 2KU
標簽切除工具酶
EBY3644A	Seebio®重組煙草蝕紋病毒蛋白酶（rTEV Protease）	1KU 5KU 10KU

相關產品

貨號	產品名稱	規格
ACH0011F	鹽酸胍	1kg
DCH0005D	二硫蘇糖醇（DTT）	5g，100g，250g，500g
AAU0091A	碘乙酸	1g，5g
ACC0030	三羥甲基氨基甲烷<結晶>(Tris base)	100g，500g，1kg，25kg
ACC0029	三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽(TRIS-HCl)	250g，500g，1kg，25kg