Jackson 羊駝家族-納米抗體VHH上市

來源：作者：人氣：-發表時間：2019-09-24 13:48:00【大中小】

什么是納米抗體？

1993年，比利時科學家在自然雜志中首次報道羊駝外周血液中存在一種天然缺失輕鏈的抗體，即重鏈抗體（heavy-chain antibody，hcAb）。單域重鏈抗體（single domain antibody，sdAb）是指僅由重鏈抗體可變區（Variable region）組成的基因工程抗體，又稱為VHH抗體（variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody，VHH antibody）或納米抗體（Nanobody，Nb）。

該種抗體只包含一個重鏈可變區（VHH）和兩個常規的CH2與CH3區，卻具有非常好的穩定性，不像人工改造的單鏈抗體片段(scFv)那樣容易相互沾粘，甚至聚集成聚體。更重要的是單獨克隆并表達出來的VHH結構具有與原重鏈抗體相當的結構穩定性以及與抗原的結合活性，是目前已知的可結合目標抗原的較小單位，其分子量只有15KD，也因此被稱作納米抗體。

標準抗體、重鏈抗體和VHH納米抗體

納米抗體的應用：

納米抗體的應用優勢可用于生物醫藥研發（基因工程藥物研發、ADC藥物研發）；
用于臨床體外診斷（膠體金法、酶聯免疫吸附法、電化學發光法）；
用于腫瘤研究、免疫學研究等基礎研究；申請具有自主知識產權的發明專利及科研獎項；拓展研究思路、發表國際知名學術刊物。
鑒于其獨特的性質，VHH抗體（納米抗體）作為免疫工具越來越受歡迎。Jackson ImmunoResearch開發了xi相關試劑，以促進在多種平臺上識別VHH抗體，包括WesternBlotting、Elisa、流式細胞術和免疫熒光。

美國Jackson ImmunoResearch Inc.是二抗生產商，成立于1982年，專業致力于親和純化的二抗和純化的免疫球蛋白的生產及偶聯，30余年的專注，30余年的發展，Jackson的二抗以種類豐富（物種齊全，標記多樣，應用廣泛）、性價比高、供貨迅捷而深受國際科研學者和工業客戶的青睞。順應科技發展Jackson ImmunoResearch Inc.研究開發出一系列二抗應用于駱駝免疫球蛋白，可用于檢測、分析、加快VHH的發展研究，并提供羊駝二抗。歡迎來電咨詢：400-021-8158！

西寶生物科技（上海）股份有限公司為Jackson ImmunoResearch品牌在華授權代理商，渠道正規，并備有大量現貨。若您對Jackson ImmunoResearch產品感興趣，請致電 400-021-8158了解詳情。

納米抗體相對于傳統抗體具有眾多優勢：

納米抗體諸多方面均優于傳統抗體，基于羊駝重鏈抗體的VHH單域抗體的特殊結構，兼具了傳統抗體與小分子藥物的優勢，幾乎完美克服了傳統抗體的開發周期長，穩定性較低，保存條件苛刻等缺陷，逐漸成為新一代治療性生物醫藥與臨床診斷試劑中的新興力量。相比于常規抗體，納米抗體的優勢有：

分子量小，可穿透血腦屏障；VHH抗體可以穿過血腦屏障，進入其他偏遠的地方，使它們在藥物傳遞中發揮作用。良好的穩定性允許通過多種途徑吸收，包括靜脈和皮下注射、鼻吸入和口服。
原核或真核系統中高表達；VHH抗體易于克隆和修飾，它們可以在細菌、酵母和哺乳動物的表達系統中以高水平重組產生。
特異性強，親和力高；納米抗體較長的CDR3，可形成一穩定的暴露的凸環結構（凸環中具有穩定結構的二硫鍵），能夠深入抗原內部以更好的結合抗原從而提高了其抗原特異性和親和力。納米抗體較長的CDR3，可形成一穩定的暴露的凸環結構（凸環中具有穩定結構的二硫鍵），能夠深入抗原內部以更好的結合抗原從而提高了其抗原特異性和親和力。
對人的免疫原性弱；
耐熱性/穩定性好； VHH抗體具有良好的溶解性，對熱、蛋白酶和pH值極端穩定

Jackson旗下開發的VHH結構域抗體是通過從羊駝血清中高度純化的羊駝VHH片段來免疫山羊獲得的。我們已經證明這些抗體對羊駝和美洲駝都有很強的識別能力。

實驗案列：

	圖1：Ki-67和Tubulin對HEP-2細胞的雙重標記。 HEP-2細胞采用以下組合染色：羊駝抗兔ki-67（多克?。￢HH區域抗體和alexa fluor®488結合山羊抗羊駝免疫球蛋白G vhh結構域（128-545-230）（綠色）；小鼠抗Tubulin與RRX結合。山羊抗鼠免疫球蛋白G（115-295-146）（紅色）。用DAPI（藍色）進行核染色。
	圖2：用ELISA法檢測羊駝或駱駝的VHH抗體。每個rVHH按照10μg/ml涂于elisa板上，用HRP標記抗羊駝VHH抗體（128-035-230或128-035-232）和TMB底物檢測。

流式檢測案列：

山羊抗羊駝VHH抗體（例如Alexa Fluor®488共軛128-545-230）可用于檢測患者細胞上的VHH，而不識別內源性免疫球蛋白G或來自小鼠、兔或大鼠的主要抗體。目前的腫瘤學研究在許多T細胞定向策略中采用了納米體（VHH）技術來使用（先天性）免疫防御。這包括產生用于招募和激活細胞毒性或γδT細胞的雙特異性格式，納米源嵌合抗原受體（CAR）T細胞，以及開發阻斷納米抗體的免疫檢查點（chanier和chames，2019）。修飾性T細胞的特征通常是通過流式細胞術來完成的，這樣就可以對表達CAR的細胞進行分類和擴增。

我們使用多克隆羊駝VHH抗人免疫球蛋白G（而不是CAR）來證明128-545-230在流式細胞術中的應用。下面的實驗代表淋巴細胞上的門控樣本。山羊抗羊駝VHH不識別小鼠抗cd19，只有當VHH抗人免疫球蛋白G存在時才能檢測到人免疫球蛋白G。


Panel A: 控樣, 不含VHH 抗人免疫球蛋白G 一抗。細胞僅和小鼠抗-CD19 (APC-H7) 和Alexa Fluor® 488 山羊抗羊駝VHH抗體(128-545-230) 一起培養。 128-545-230 不能區分人免疫球蛋白G或小鼠一抗。	Panel B: 控樣, 不含小鼠抗-CD19。細胞僅和VHH 抗人免疫球蛋白G一抗和Alexa Fluor® 488山羊抗羊駝VHH抗體一起培養。檢出淋巴細胞表觀免疫球蛋白G	Panel C: 雙標細胞。細胞和小鼠抗-CD19 (APC-H7), VHH 抗人免疫球蛋白G一抗, 和Alexa Fluor® 488 山羊抗羊駝VHH抗體(128-545-230) 一起培養。在右上方顯示存在淋巴細胞，對人免疫球蛋白G和CD19皆顯陽性。

常用的羊駝和VHH二抗產品列表

標記物	☆山羊抗羊駝免疫球蛋白G (H+L)	☆山羊抗羊駝免疫球蛋白G (H+L)(min X 牛, 人, 小鼠, 兔, 大鼠血清蛋白)	☆山羊抗羊駝免疫球蛋白G, 子類 2+3 特異性(min X 牛, 人, 小鼠, 兔, 大鼠血清蛋白)	山羊抗羊駝免疫球蛋白G, VHH(min X 牛血清蛋白)	山羊抗羊駝免疫球蛋白G, VHH抗體(min X 牛, 人, 小鼠, 兔, 大鼠血清蛋白)
未標記	1.0 mg 128-005-003	1.0 mg 128-005-160	0.5 mg 128-005-229	0.25 mg 128-005-232	0.25 mg 128-005-230
辣根過氧化物酶	1.0 ml 128-035-003	0.5 ml 128-035-160	0.25 ml 128-035-229	0.25 ml 128-035-232	0.25 ml 128-035-230
堿性磷酸酶	1.0 ml 128-055-003	0.5 ml 128-055-160	0.25 ml 128-055-229	0.25 ml 128-055-232	0.25 ml 128-055-230
生物素	1.0 ml 128-065-003	0.5 ml 128-065-160	0.25 ml 128-065-229	0.25 ml 128-065-232	0.25 ml 128-065-230
DyLight™ 405	1.0 mg 128-476-003	0.5 mg 128-475-160	0.25 mg 128-475-229	0.25 mg 128-475-232	0.25 mg 128-475-230
Alexa Fluor® 488	1.0 mg 128-545-003	0.5 mg 128-545-160	0.25 mg 128-545-229	0.25 mg 128-545-232	0.25 mg 128-545-230
Fluorescein (FITC)	1.0 mg 128-095-003	0.5 mg 128-095-160	0.25 mg 128-095-229	0.25 mg 128-095-232	0.25 mg 128-095-230
Cy™ 3	1.0 mg 128-165-003	0.5 mg 128-165-160	0.25 mg 128-165-229	0.25 mg 128-165-232	0.25 mg 128-165-230
Rhodamine (TRITC)		0.5 ml 128-115-160	0.25 ml 128-115-229	0.25 ml 128-115-232	0.25 ml 128-115-230
Rhodamine Red-X™	1.0 mg 128-295-003	0.5 mg 128-295-160	0.25 mg 128-295-229	0.25 mg 128-295-232	0.25 mg 128-295-230
Alexa Fluor® 594	1.0 mg 128-585-003	0.5 mg 128-585-160	0.25 mg 128-585-229	0.25 mg 128-585-232	0.25 mg 128-585-230
Alexa Fluor® 647	1.0 mg 128-605-003	0.5 mg 128-605-160	0.25 mg 128-605-229	0.25 mg 128-605-232	0.25 mg 128-605-230
Cy™ 5		0.5 mg 128-175-160	0.25 mg 128-175-229	0.25 mg 128-175-232	0.25 mg 128-175-230

備注：☆這些抗體主要與Fc區反應，不建議用于檢測VHH抗體（納米抗體）

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