RNA切割用重組CRISPR-Cas13a蛋白

來源：作者：人氣：-發表時間：2020-02-03 21:41:00【大中小】

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Cas13a是VI型CRISPR-Cas系統效應蛋白，具有RNA介導的RNA酶切活性，是目前第二大類CRISPR-Cas系統發現能夠降解RNA的蛋白。Cas9，Cpf1，C2c1均是由RNA介導的DNA核酸內切酶，對開發研究RNA工具，擴展CRISPR系統在基因編輯方面的運用具有重大價值。

古菌和細菌，利用CRISPR-Cas系統抵御外源DNA浸染的Cas蛋白有多種，它們都是由向導RNA介導的切割目標DNA的DNA核酸內切酶，如Cas9, Cpf1, C2c1等。Cas9和Cpf1已成功開發為重要的基因編輯工具，它們可作為開展基因功能研究、尋找合適藥物作用靶標的巧妙工具。

此前，基因編輯工具CRISPR-Cas9可以糾正個體細胞內的缺陷，預測可以預防多種人類疾病。但Cas9系統改變的是DNA，而不是RNA。專業人士認為CRISPR平臺事實上也可以用來修改RNA。CRISPR開始被發現在細菌中可將一段遺傳密碼換成另一段遺傳密碼，所以被稱為“分子剪刀。在CRISPR-Cas9系統中，Cas9是切割DNA的酶。

針對RNA的編輯工具也可以幫助科學家們修改基因的活性，同時不會對基因本身造成長久性改變。為研究RNA轉錄和RNA與基因位點的關系，CRISPR-dCas13系統與CRISPR-dCas9系統實現了對基因轉錄的RNA和基因位點的同時標記，提供了一個簡單和便利的新手段。針對2019新型冠狀病毒（2019-nCoV）研究應用時應注意，由于肺炎病毒RNA含量低，需要進行擴增插入探針，與13a反應被切割后檢測出來。

西寶生物現貨提供的CRISPR-Cas13a由含有Cas13a基因的大腸桿菌經發酵，然后通過分離方法之后，經過純化后再凍干制成。

CRISPR-Cas13a

純度>95% (SEC-HPLC/SDS-PAGE)

規格參數：100ug/1mg

使用說明：

將凍干 Cas13a純水溶解，濃度>100μg/ml，稀釋至工作濃度。避免反復凍融。

復溶后4℃可穩定儲存7-10天；短期保存請分裝后存放于-20℃。

產品特點：

含有Cas13a基因的E.coli經發酵分離和高度純化后凍干

產品用途：

體外RNA切割；體外RNA檢測；活細胞RNA的調控、RNA基因編輯；光學探針生物學標記。

相關產品推薦

名稱	英文名稱	規格	分子量或比活	純度
CRISPR-Cas9	Recombinant CRISPR-Cas9	100/500pmol	175KD	>95%
CRISPR-Cas12a	Recombinant CRISPR-Cas12a	100/2000pmol	140KD	>95%
CRISPR-Cas13a	Recombinant CRISPR-Cas13a	100/500pmol	140KD	>95%
SUMO蛋白酶	Recombinant SUMO Protease	1000U	20000U/mg	>95%
TEV蛋白酶	Recombinant TEV Protease	1000/10000U	1000U/mg	>99%

根據Cas蛋白的分類和效應復合物的性質主要分為兩大類Class 1和Class 2，六種不同類型。

1類系統包括類型I、III、IV，效應復合物由多個Cas蛋白（具有一個或多個內切酶活性組分）組成并與crRNA緊密結合，

2類系統包括類型II、V和VI，只有一個具有內切酶活性的多結構蛋白。

II類CRISPR-Cas系統CRISPR/Cas9系統已用于基因敲除和敲入以及基因組標記等，方便基因操作和基因組研究。

而VI類系統又叫CRISPR-Cas13系統，是向導RNA介導的RNA靶向的內切酶系統，從15年被發現至今一共鑒定出四個亞型：VI-A(Cas13a/C2c2)， VI-B(Cas13b)， VI-C(Cas13c)和VI-D(Cas13d)。已經開始運用于RNA的敲低，RNA定點編輯，RNA檢測以及RNA剪接調控。

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